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出版者:北京医科大学出版社

作者:董志伟，王琰主编

出品人:

页数:359

译者:

出版时间:2002-6

价格:99.80元

装帧:

isbn号码:9787810711623

丛书系列:

图书标签:

• 抗体制备
• 抗体工程
• 抗体
• 蛋白质工程
• 免疫学
• 生物技术
• 分子生物学
• 生物医药
• 单克隆抗体
• 抗体药物
• 蛋白质设计

深入探索基因编辑的边界：CRISPR-Cas9技术的应用与未来 图书简介 本书旨在为生物医学研究人员、生物技术从业者以及对前沿基因编辑技术抱有浓厚兴趣的读者，提供一份详尽、前瞻性的指南，聚焦于当前最具革命性的基因组编辑工具——CRISPR-Cas9系统。我们不会涉及抗体工程的任何相关内容，而是将全部篇幅聚焦于解析CRISPR-Cas9系统的基础原理、技术迭代、广泛应用及其所引发的伦理与监管挑战。 --- 第一部分：CRISPR-Cas9的起源与分子机制的精妙 第一章：从细菌防御到分子剪刀的跃迁 本章将追溯CRISPR（规律间隔成簇短回文重复序列）的发现历程，详细阐述其在细菌和古菌中作为适应性免疫系统的原始功能。我们将深入剖析CRISPR-Cas系统的经典类型，特别是II型系统（以S. pyogenes的Cas9蛋白为代表）如何被“驯化”并重塑为一种通用的基因编辑工具。 重点内容包括： 核心组件解析： 结构解析Cas9核酸内切酶的活性位点、向导RNA（gRNA，包括crRNA和tracrRNA）的设计原理及其如何引导Cas9识别并切割特定的DNA双螺旋靶点。 PAM序列的重要性： 探讨前间隔序列（Protospacer Adjacent Motif, PAM）在靶点识别中的不可或缺性及其对编辑窗口的限制。 DNA损伤修复途径： 详细比较非同源末端连接（NHEJ）与同源定向修复（HDR）这两种关键的细胞内修复机制，解释它们如何决定最终的基因编辑结果（基因敲除或精确的碱基替换/插入）。 第二章：技术的优化与Cas蛋白的多样性 CRISPR-Cas9系统并非一成不变，本章着重介绍为克服原始系统的局限性（如脱靶效应、递送难度）而发展出的各类改进型技术和新型Cas效应子。 增强与失活的Cas9变体： 介绍高保真Cas9（hiFi Cas9）和“死”Cas9（dCas9）的结构特点和功能，为后续的基因调控研究奠定基础。 碱基编辑器（Base Editors）： 详细阐述融合了脱氨酶的碱基编辑器（如CBE和ABE）的工作原理，解释如何实现无双链断裂（DSB）的单碱基精准编辑，显著降低插入缺失（Indel）的风险。 先导编辑（Prime Editing）： 深入剖析Prime Editor（PE）系统，该系统结合了逆转录酶，允许研究者在不依赖HDR模板的情况下，实现目标DNA位点的精确插入、删除和所有12种碱基转换，是目前最灵活的“搜索与替换”技术。 新型Cas酶的探索： 介绍Cas12、Cas13等其他家族成员的特性，特别是Cas12（Cpf1）的PAM识别偏好变化，以及Cas13在RNA编辑和诊断中的独特应用。 --- 第二部分：CRISPR-Cas9在基础研究与应用科学中的前沿探索 第三章：构建精准的疾病模型 CRISPR-Cas9极大地加速了人类疾病机理的研究。本章聚焦于利用该技术快速、高效地创建细胞系、动物模型和类器官系统。 细胞模型构建： 如何在原代细胞、永生化细胞系中实现对特定致病基因的敲除或敲入，用于药物筛选和通路验证。 动物模型的创制与优化： 详细讨论在斑马鱼、小鼠、大鼠等模式生物中应用CRISPR进行基因定点突变，以及如何克服合子外（mosaicism）和效率问题。 类器官（Organoids）的赋能： 探讨利用CRISPR编辑肠道、脑部、肝脏类器官，以更贴近体内环境的方式研究复杂疾病（如囊性纤维化、神经退行性疾病）的进展。 第四章：从实验室到临床：基因治疗的革命 本章全面审视CRISPR技术在临床医学中的潜力与实施策略，重点区分体内（in vivo）和体外（ex vivo）编辑技术。 体外编辑策略： 详细介绍CAR-T细胞疗法中利用CRISPR/Cas9敲除T细胞抑制性受体（如PD-1）以增强抗肿瘤活性的具体流程和成功案例。 体内编辑的前景： 讨论如何设计安全的递送系统（如AAV载体、脂质纳米颗粒LNP）将CRISPR组件输送到特定组织（如肝脏、眼部）。重点分析镰状细胞病和转甲状腺素淀粉样变性（ATTR）等疾病的临床试验进展。 表观遗传调控的新维度： 介绍dCas9融合了转录激活因子（CRISPRa）或抑制因子（CRISPRi）系统，如何实现对基因表达的动态、可逆调控，而无需改变底层DNA序列。 第五章：农业生物技术与环境工程的新篇章 CRISPR-Cas9的应用早已超越了人类医学，正深刻地重塑农业和生物燃料领域。 精准育种： 探讨利用CRISPR技术编辑农作物的基因，以增强抗病虫害能力、提高营养价值（如低过敏性小麦）或改良产量和成熟时间。重点分析与传统转基因技术在监管和公众接受度上的区别。 牲畜改良： 案例分析如何通过基因编辑培育出抗非洲猪瘟的猪、低致敏性的奶牛等。 合成生物学与生物燃料： 介绍CRISPR在优化微生物细胞工厂（如酵母、蓝藻）代谢通路中的作用，以提高目标产物（如生物燃料、特种化学品）的产率。 --- 第三部分：技术的可行性、挑战与监管前沿 第六章：递送系统的优化与安全性考量 CRISPR系统的效力高度依赖于其能否安全、高效地抵达目标细胞核。本章深入探讨递送技术的“瓶颈”及其解决策略。 病毒载体（AAV）： 优缺点分析，特别是其包装容量限制和潜在的免疫原性问题。 非病毒载体： 详细阐述脂质纳米颗粒（LNP）和高分子载体在递送mRNA或RNP（核糖核蛋白复合体）方面的优势，特别是其可扩展性和较低的致瘤风险。 脱靶效应的量化与控制： 介绍评估和最小化脱靶编辑的方法学，包括全基因组测序（WGS）和 GUIDE-seq 等先进技术。 第七章：基因编辑的伦理、法律与社会影响（ELSI） 任何颠覆性技术都伴随着深刻的伦理考量。本章将以审慎的态度，探讨生殖系编辑（Germline Editing）引发的全球性争议和监管现状。 体细胞与生殖系编辑的界限： 明确区分影响个体与影响后代的编辑行为，并深入分析目前国际社会对生殖系编辑的普遍立场和限制。 监管框架的演变： 对比美国、欧洲、中国等主要经济体在基因编辑产品审批和研究规范上的差异化政策。 技术普及与公平性： 探讨如何确保这些昂贵的、高技术含量的治疗手段能够被全球范围内的患者所公平获取，避免加剧健康不平等。 结论：展望下一个十年 总结CRISPR-Cas9技术在过去十年中对生命科学产生的不可逆转的影响，并展望未来可能出现的“下一代编辑技术”，如对RNA的更精细编辑、体内高精度基因组“重写”技术，以及如何将这些技术与人工智能深度融合，实现更高效的靶点预测和系统优化。 本书内容将完全聚焦于基因编辑技术的理论、实践、应用扩展和相关社会影响，不包含任何关于蛋白质结构、抗体生产、免疫球蛋白类型或B细胞/T细胞功能等抗体工程领域的内容。其核心目标是提供一个全面、深入且紧跟前沿的CRISPR-Cas9技术参考手册。

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我得承认，一开始我对这本书的**地域风俗研究**抱有很大怀疑，总觉得这类作品难免陷入猎奇或主观臆断的泥潭。然而，作者用铁一般的事实和近乎人类学家的细致入微，彻底颠覆了我的看法。他花了整整三年时间，深入到**某偏远山区的村落**，记录了大量口述历史和近乎失传的仪式。书中最感人的是对“成年礼”的描述，作者没有采用审视者的姿态，而是以一种近乎参与者的尊重和敬畏，记录了那群年轻人如何在一夜之间完成身份的转变，他们所面对的恐惧、勇气和社群的期待。那种对文化多样性的珍视和对传统智慧的挖掘，令人动容。更厉害的是，作者通过对比不同村落间同一仪式的微小变异，推导出了迁徙路线和文化接触的历史轨迹，将社会学观察与历史地理学完美结合，构建了一个立体、鲜活的文化图景。读罢，我仿佛闻到了那山间泥土和篝火的味道。

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坦白说，我最初是被这本书的封面设计吸引的，那种深沉的墨绿色配上烫金的纹样，透着一股沉静的力量感。翻开之后，我才发现它的真正魅力在于其对**XXX领域**的开创性探索。作者似乎对这个领域有着近乎偏执的热爱和极高的专业素养，书中对某个核心理论模型的构建过程，那种严谨的逻辑推演和对前人研究的批判性继承，让人叹为观止。我特别喜欢它在阐述原理时所采用的类比方法，比如用**一个生活化的场景**来解释一个晦涩的数学概念，一下子就让原本高不可攀的理论变得触手可及。虽然涉及大量专业术语，但作者的行文风格非常克制且精确，绝不拖泥带水，每一个句子都仿佛经过了精密的计算，直击要害。对于我这种非科班出身的读者来说，这极大地降低了学习门槛，让我能够跟上作者的思路，深入领会其思想的精髓，而不是在术语的海洋里迷失方向。这本书无疑会成为我未来工作中经常翻阅的工具书，其参考价值是无可替代的。

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这本书的哲学思辨部分，简直是一场酣畅淋漓的思想体操。作者似乎毫不留情地撕开了我们习以为常的社会表象，直指**人性与权力**的本质。我印象最深的是关于“被遗忘的规则”那一章，探讨了在信息爆炸的时代，我们是如何主动或被动地放弃了对某些基本判断力的构建。作者的论证过程充满了张力，他不断设置悖论，强迫读者跳出舒适区进行反思。例如，他对**某种现代消费主义现象**的剖析，不是简单的道德批判，而是深入到文化基因层面，追溯其在特定历史时期是如何被编码和强化的。行文如同一把锋利的手术刀，冷静地解剖着现代社会的诸多病灶，观点尖锐却又富有建设性。读完之后，我发现自己看待日常新闻和社交媒体评论的视角都发生了微妙的、但却是根本性的转变，变得更加审慎和批判，少了许多盲从和轻信。这绝对是一本需要慢读、细品的“精神食粮”。

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这本厚重的《**XX**》简直是打开了新世界的大门，我原本以为它会是一本枯燥的理论大全，没想到作者以一种近乎于讲故事的叙事方式，将复杂的历史脉络梳理得井井有条。书中对中世纪欧洲贵族阶层权力更迭的分析，特别是对几个关键家族联姻与战争的描述，简直是教科书级别的精彩。我记得有一章专门细致地描绘了某次宫廷政变的前夜，人物的心理活动和环境氛围的营造，让我仿佛身临其境，能感受到空气中弥漫的紧张与不安。尤其值得称赞的是，作者并没有停留在对事件的简单罗列，而是深入挖掘了当时社会结构、经济基础与意识形态之间的复杂关联，比如探讨了羊毛贸易如何悄然改变了地方领主的经济实力，并间接影响了中央集权的速度与形态。那种宏大叙事下的微观视角切换得非常自然，让你在为历史的波澜壮阔感到震撼的同时，也能体会到个体命运的无常与挣扎。读完这部分，我对那段历史的理解不再是碎片化的知识点，而是一个相互勾连、有机的整体，对“历史的必然性”有了更深刻的感悟。

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这部关于**当代艺术批评**的文集，其语言的跳跃性和思维的跳跃性简直是为“后现代”量身定做。作者完全不遵循传统的论证结构，而是采用一种拼贴、解构的方式，将不同的艺术媒介——从行为艺术到数字影像——并置在一起，探讨“意义”在当下的瓦解与重构。他对于**某一特定装置艺术**的解读，一开始让我摸不着头脑，他用了一整段话来描述光线在金属表面折射的随机性，然后突然跳跃到对资本流动性的隐喻。这种看似漫不经心的联想背后，隐藏着对当代审美疲劳的深刻洞察。我特别欣赏作者那种敢于“冒险”的笔法，他似乎总是在挑战读者的阅读习惯，迫使我们去重新定义“什么是美”、“什么是艺术价值”。这本书更像是一个智力游戏，需要读者全神贯注地参与到意义的再创造过程中去，读起来非常过瘾，尽管有时需要反复咀嚼才能体会到那层“弦外之音”。

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