实用分子生物学实验指南 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

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出版者:河北大学

作者:牛建章主编

出品人:

页数:269

译者:

出版时间:2005-1

价格:36.00元

装帧:

isbn号码:9787810970082

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《细胞信号转导的分子机制与调控》 内容简介 本书深入剖析了细胞信号转导过程中的关键分子事件、调控网络及其在生命活动中的核心作用。全书结构严谨，内容详实，旨在为生命科学研究人员、高等院校师生提供一个全面且深入的参考框架。 第一部分：信号转导的基础：分子元件与信号类型 本部分首先系统介绍了细胞信号转导的定义、历史发展及其在细胞生命活动中的不可替代性。重点阐述了信号分子（如生长因子、细胞因子、神经递质、激素等）的结构特征、分泌途径以及它们如何与细胞表面的受体分子精准结合。 受体蛋白学导论： 详细探讨了三大类主要的细胞表面受体：G蛋白偶联受体（GPCRs）、酪氨酸激酶受体（RTKs）以及离子通道型受体。对每类受体的结构域划分、跨膜机制、激活后的构象变化进行了精细的分子生物学描述。特别是对GPCRs的异源三聚体G蛋白激活和RTKs的自身磷酸化/异源二聚化过程，配以高分辨率的结构模型进行解析。 细胞内信号分子： 聚焦于第二信使（如cAMP、cGMP、Ca2+、IP3、DAG）的生成、降解动力学及其在细胞质中的扩散特性。同时，详细论述了各类衔接蛋白（Adaptor Proteins）和支架蛋白（Scaffold Proteins）在信号通路中的组装和功能，阐明它们如何确保信号的专一性和效率。 第二部分：核心信号通路解析 本卷是全书的技术核心，系统地解构了目前已知最重要的几条细胞信号转导通路，并着重分析了通路间的串扰与整合机制。 MAPK通路家族精讲： 详述了经典Ras-Raf-MEK-ERK通路，解析其如何响应生长因子刺激，调控基因表达和细胞增殖。此外，还深入探讨了p38 MAPK和JNK通路的激活机制及其在应激反应和凋亡中的独特作用。对激酶级联反应中的正反馈与负反馈调控环节进行了定量分析。 磷脂酰肌醇信号网络： 深入解析了PI3K/Akt/mTOR通路。重点阐述了PI3K的亚型区分及其在磷脂酰肌醇的磷酸化位点特异性。详细描述了Akt（PKB）的激活机制，特别是其T308和S473位点的磷酸化对下游mTOR复合体（mTORC1/mTORC2）调控的差异性影响，以及该通路在代谢、生存和自噬中的核心地位。 JAK-STAT通路： 聚焦于细胞因子信号的传递。描述了JAK激酶如何被活化的细胞因子受体募集，进而对STAT蛋白进行磷酸化、二聚化并转移至细胞核。探讨了STAT家族成员（STAT1-STAT6）的功能分化及其在免疫应答中的特异性。 钙离子信号的复杂性： 将钙离子视为一种通用信号，详细描述了内质网和线粒体钙库的调控，IP3R和Ryanodine受体的分子特性。重点分析了钙离子如何通过钙调蛋白（CaM）及其依赖性激酶（CaMKs）影响下游靶点，如CREB转录因子。 第三部分：信号转导的精密调控与失调 信号转导的精准性依赖于复杂的“开/关”机制。本部分致力于阐释维持系统稳态的各种分子调控手段，并探讨信号失常与疾病发生的关系。 磷酸化与去磷酸化动力学： 详细梳理了激酶（Kinases）和磷酸酶（Phosphatases）的分子家族分类和底物特异性。特别是对蛋白酪氨酸磷酸酶（PTPs）和丝/苏氨酸磷酸酶（PSPs）在信号终止中的关键作用进行了深入讨论，强调了它们与激酶之间动态平衡的维持。 泛素化与蛋白降解调控： 阐述了E3泛素连接酶如何通过泛素化修饰（单泛素化、K63链接、K48链接）来调控信号蛋白的活性、定位或降解。详细分析了涉及信号通路的关键靶蛋白（如IκB、各种受体）的泛素化依赖性命运决定。 信号整合与网络拓扑： 引入系统生物学的视角，分析信号通路如何通过“交叉对话”（Crosstalk）实现信息的集成。讨论了网络结构对信号响应时间、振荡行为以及细胞命运选择的影响。 第四部分：疾病中的信号转导异常 本部分将理论知识与临床应用相结合，重点阐述了信号通路失调在重大疾病（癌症、代谢紊乱、神经退行性疾病）中的病理生理机制。 肿瘤信号学： 聚焦于RTK的激活突变（如HER2、EGFR）如何导致细胞失控增殖。深入剖析了Ras/Raf通路在肿瘤发生发展中的“驱动基因”地位，以及p53和Rb等肿瘤抑制网络如何被信号通路靶向失活。 代谢与内分泌紊乱： 分析了胰岛素信号通路（IRS底物、Akt）的功能障碍与2型糖尿病的关系。讨论了激素抵抗性背后的分子机制，特别是信号通路的慢性炎症性激活。 神经系统信号学： 探讨了神经递质受体（如NMDA受体）的调节及其在学习、记忆和突触可塑性中的作用。分析了错误折叠蛋白聚集如何干扰关键信号转导步骤，导致阿尔茨海默病和帕金森病等神经退行性病变。 总结与展望 本书最后一部分对当前信号转导研究的前沿领域进行了展望，包括单细胞水平的信号分析、类器官模型中的动态追踪，以及基于小分子抑制剂和靶向疗法在调控异常信号通路中的最新进展。 本书适合生命科学、生物医学工程、药学等相关专业的研究生及高年级本科生作为教材或参考书，同时也为药物研发人员和资深研究者提供必要的理论深度和技术视角。书中所涉及的每一个分子、每一个修饰，均基于最新的高分辨率生物化学数据和结构生物学发现。

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这本书的排版和图示质量，真的可以称得上是行业标杆。我承认，我对视觉呈现的要求比较高，因为在做复杂的空间定向实验时，一张模糊的示意图顶过千言万语的文字描述。这本书在涉及三维结构操作的部分，例如病毒载体的包装流程，或是脂质体构建过程，采用了高质量的**三维渲染图**，清晰地展示了各个组分在微观层面的相互作用和空间排列。这种清晰度极大地降低了对实验过程的想象门槛。我记得以前看过的某些书籍，关于凝胶电泳槽的连接图，画得像电路原理图一样复杂难懂，让人怀疑自己是不是在做生物实验还是在搭电台。这本书在这方面做得非常到位，所有的设备连接、缓冲液流向，都用清晰的箭头和颜色区分开来，即便是一个初次接触电泳设备的人，也能快速上手。而且，它对实验耗材的选用也有独到的见解，比如在谈到微量移液时，它不仅提到了枪头过滤芯的重要性，还对比了不同材料枪头对DNA/RNA吸附率的差异，这些细微之处的考量，体现了作者对**微量操作的精益求精**。

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从一个长期负责初级科研人员和研究生培训的角度来看，这本书的实用性达到了一个令人惊叹的高度。它的语言风格非常**口语化**，但又保持着严谨的科学态度，读起来完全没有那种高高在上的学术腔调。我尤其喜欢它在每个实验模块末尾设置的“常见陷阱与快速排除”小节。比如，Western Blotting里抗体孵育时背景过高的问题，它一口气列出了七种可能的原因，从二抗稀释度不当到封闭液选择错误，每一种都有对应的验证方法和纠正措施。我曾指导的一位研究生，为了一张干净的WB图，足足浪费了一个月时间，来回折腾封闭和洗涤步骤。如果当时有这本书作为参照，我相信那个月的迷茫期可以缩短到一周。此外，书中对各种仪器的**维护与校准**部分也写得非常细致，不仅仅是告诉你要定期清洗，还给出了不同品牌离心机转速误差的允许范围和校准工具的推荐。这对于实验室管理来说，是极大的帮助，因为它保障了数据采集的准确性，而这一点往往在教学中被忽视。这本书真正做到了“授人以渔”，它教的不是一个特定的实验，而是一种科学的、系统性的解决问题的思维模式。

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我尤其赞赏这本书对**新兴技术**的包容度和整合能力。在很多传统实验指南里，你很难找到关于CRISPR-Cas9介导的基因编辑系统在非模式生物中进行初步验证的详细步骤，或者关于单细胞测序文库制备中去除双胞胎的生物信息学预处理环节的实验控制。这本书却展现了非常强的时效性，它专门辟出了一章来讨论“高通量筛选中的噪音控制与数据质量保障”。这不再是单纯的分子生物学操作，而是将湿实验与干实验有效地衔接起来。我关注到它详细描述了如何根据不同的DNA/RNA提取方法选择合适的文库构建试剂盒，以及如何通过QC数据来反推实验操作中可能存在的偏差，比如文库的片段长度分布异常可能意味着酶切或接头连接效率的问题。这无疑是为我们这些需要紧跟前沿研究方向的资深用户提供了极大的便利。它不满足于指导我们重复已有的成功，更鼓励我们去探索和优化那些尚未完全成熟的前沿操作，真正体现了“实用”二字在当代科研背景下的扩展意义。

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这本新书的装帧设计真是深得我心，那种略带磨砂质感的封面，拿在手里沉甸甸的，让人感觉内容一定非常扎实可靠。我特别欣赏它在章节布局上的用心，不像某些教科书那样堆砌公式和理论，而是非常直观地将实验步骤分解开来。比如，它对“细胞培养基优化”那一章节的处理，简直是教科书级别的示范——从基础配方的选择，到不同批次血清的性能评估，再到污染排查的流程图，描述得详尽而又不失条理。我上次尝试一个比较复杂的转染实验，光是前期准备工作就耗费了我大半周时间，很多细节上的把握总觉得不到位。这本书里专门用了好几页来详述不同细胞系对转染试剂的最佳兼容性曲线，这简直是救命稻草。我感觉作者在撰写时，绝对是站在一线实验人员的角度，把那些我们在实际操作中容易犯的“低级错误”都预先标注了出来，并且给出了清晰的规避方案。这种“过来人”的经验总结，比单纯的原理阐述要珍贵得多。看到那些关于核酸提取纯化后电泳条带清晰度的对比图，我仿佛又回到了刚开始做实验时的那种摸索状态，但这次，我知道该如何避免那些拖尾和弥散的条带了。可以说，光是阅读和对照这些图表，就已经让我的实验思路清晰了不少，对提升实验的**重复性**和**成功率**，有着立竿见影的效果。

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我是一个偏好宏大叙事和深入探讨底层机制的研究者，所以很多“操作手册”型的书籍往往让我感到有些枯燥和碎片化。然而，这本书的独特之处在于，它并没有仅仅停留在“怎么做”的层面，而是巧妙地融入了大量的“为什么必须这么做”的分子机制解释。举个例子，在讨论PCR产物纯化时，它没有简单地写“使用吸附柱进行洗脱”，而是详细阐述了硅胶膜在不同pH值下与核酸的结合/解离动力学，以及洗脱液中低离子强度对这一过程的精准调控。这种对原理的深度挖掘，让我对很多过去只是靠经验操作的步骤有了全新的认识。我过去一直疑惑为什么在酶切反应后需要进行酚氯仿抽提，这本书里给出的解释是关于Triton X-100等去污剂残留对后续DNA聚合酶活性的潜在抑制作用，这比我从其他文献中学到的要具体和令人信服得多。对于我这种需要设计全新实验流程的科研人员来说，这种深入理解核心原理的能力比死记硬背操作步骤重要得多。它就像一个技术高超的建筑师，不仅教你砌砖，还告诉你砂浆的配比和钢筋的受力分析，让你有能力去设计自己的“大厦”。我期待着用它提供的理论框架，去优化我们实验室现有的蛋白质相互作用分析流程，特别是那些涉及到荧光淬灭和信号增强的敏感性实验。

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