临床生物化学检验实验指导 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

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出版者:中国医药科技出版社

作者:郑铁生

出品人:

页数:135

译者:

出版时间:2004-8

价格:15.0

装帧:平装

isbn号码:9787506728669

丛书系列:

图书标签:

• 临床生物化学
• 检验医学
• 实验指导
• 医学检验
• 生物化学
• 医学教育
• 本科教学
• 实验教学
• 医学
• 检验

《现代分子生物学技术：原理与应用》 图书简介 本书全面深入地阐述了现代分子生物学领域中一系列核心技术的基本原理、实验流程、数据解读及其在生命科学研究和生物技术产业中的广泛应用。全书内容紧密围绕当前生命科学前沿，力求将理论深度与实验操作的实用性完美结合，旨在为生物学、医学、农学及相关理工科专业的学生、科研人员和技术工作者提供一本权威、详实、操作性强的参考指南。 第一部分：分子生物学基础与核酸操作技术 本部分首先回顾了分子生物学的核心概念，包括基因结构、基因组学概述以及蛋白质合成的基本调控机制，为后续技术的理解打下坚实的理论基础。 第一章：核酸提取与纯化 详细介绍了从不同生物材料（如血液、组织、植物细胞、微生物）中提取和纯化基因组DNA、质粒DNA和总RNA的关键技术。内容涵盖传统的酚-氯仿抽提法、硅胶柱离心法（Spin Column）的生化原理，以及针对特殊样本（如石蜡包埋组织FFPE样本）的优化策略。重点讲解了核酸纯度（260/280、260/230比值）和完整性（RNA电泳的28S/18S比值）的评估标准及影响因素。 第二章：聚合酶链式反应（PCR）及其变体 本章是分子生物学技术的核心。深入剖析了标准PCR反应的组分（Taq酶、引物设计、dNTPs、缓冲液体系）与热循环参数的优化。随后，系统介绍了多种重要的PCR衍生技术： 实时荧光定量PCR（qPCR/RT-qPCR）： 详细阐述了荧光报告系统（SYBR Green、TaqMan探针）的工作机制，标准曲线的建立与定量分析方法（$DeltaDelta$Ct法）。 反转录PCR（RT-PCR）： 侧重于RNA逆转录为cDNA的效率控制和后续的定量分析。 高保真PCR与长片段PCR： 讨论了提高扩增准确性和扩增长度的酶学选择与反应条件控制。 第三章：凝胶电泳与分子印迹技术 本章聚焦于核酸和蛋白质的分离、鉴定技术。对琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）电泳的原理、缓冲液体系及电压控制进行了详尽的描述。重点阐述了Southern Blotting（用于DNA检测）和Northern Blotting（用于RNA检测）的探针设计、杂交条件优化和信号检测方法。 第二部分：基因克隆与测序技术 本部分着重于基因的获取、修饰、表达及序列解析方法。 第四章：基因克隆与表达载体构建 系统讲解了基因克隆的策略，包括限制性内切酶的“粘性末端”与“平末端”连接的原理。详细介绍了各类载体（质粒、病毒载体）的选择依据，以及连接技术，包括传统连接法和更高效的Gibson Assembly、TOPO TA Cloning等现代连接技术。同时，对原核表达系统（如大肠杆菌）和真核表达系统（如酵母、哺乳动物细胞）的表达调控元件（启动子、终止子）进行了对比分析。 第五章：下一代测序（NGS）技术导论 本章介绍了NGS技术的基本框架，区别于传统的桑格测序法。核心内容包括： 文库构建： 片段化、接头连接与富集过程。 主要测序平台原理： 重点介绍Illumina SBS（边合成边测序）的化学原理和信号采集过程。 应用实例： 简述全基因组测序（WGS）、全外显子组测序（WES）和RNA测序（RNA-Seq）的基本流程和数据输出格式（FASTQ）。 第六章：生物信息学基础数据分析 鉴于现代分子生物学数据庞大，本章提供了一个实用的生物信息学分析入门。内容包括序列比对工具（如BLAST）的使用、基因组组装的基本概念，以及如何利用标准化软件对NGS原始数据进行质量控制（QC）和下游分析的初步流程。 第三部分：蛋白质组学与细胞水平分析技术 本部分将视角转向蛋白质这一生命活动的主要执行者，介绍其分离、鉴定和功能分析的技术。 第七章：蛋白质分离与定量技术 深入讲解了蛋白质提取和去盐纯化的方法，随后详细阐述了SDS-PAGE的原理及蛋白质的转移技术。核心内容是Western Blotting（免疫印迹）：抗原-抗体反应的特异性原理、一抗与二抗的选择、化学发光检测的灵敏度控制，以及如何通过条带的定量分析反映蛋白的表达水平变化。 第八章：蛋白质组学前沿技术 本章涵盖了与质谱技术紧密结合的蛋白质鉴定方法。介绍了二维电泳（2D-PAGE）在初步分离蛋白质中的应用，以及微量蛋白质样品如何通过酶解（胰酶消化）后进行串联质谱分析（LC-MS/MS）进行蛋白质的鉴定和相对定量。 第九章：细胞培养与分子生物学应用 本章聚焦于活细胞体系中的分子事件观察。详细介绍了无菌操作技术和不同细胞系（原代、永生化）的培养条件优化（培养基、血清、二氧化碳浓度）。重点介绍了免疫荧光（IF）和免疫细胞化学（ICC）技术，用于定位细胞内特定分子（蛋白质、核酸）的亚细胞位置，并讨论了如何利用绿色荧光蛋白（GFP）等报告基因来实时监测基因表达和蛋白转运过程。 第十章：基因编辑技术：CRISPR/Cas9系统 本章作为前沿技术的代表，系统讲解了CRISPR/Cas9系统的作用机制，即sgRNA的靶向识别和Cas9的DNA切割活性。详细介绍了如何设计和构建sgRNA载体，以及在哺乳动物细胞中实现基因敲除（Knockout）、基因敲入（Knock-in）或碱基编辑的具体实验步骤和筛选策略。 全书内容结构逻辑清晰，配有大量流程图和典型实验数据图例，确保读者在掌握技术原理的同时，能有效指导实际的实验操作与结果分析。本书不仅适用于常规分子生物学实验的教学，更可作为从事生物技术开发与生命科学前沿研究人员的案头必备工具书。

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从语言风格上来说，这本书的叙述方式非常独特，它成功地在保持学术严谨性的同时，融入了一种平易近人的叙事口吻。读起来完全没有那种传统教材的枯燥和距离感，反而像是在和一位耐心的专家进行一对一的探讨。特别是在介绍那些复杂的酶动力学曲线或代谢通路图时，作者总能找到绝妙的比喻或类比，瞬间打通读者的认知壁垒。这种行文的艺术性，极大地提升了阅读体验，使得学习过程不再是痛苦的煎熬，而更像是一场充满发现乐趣的探险。我甚至发现，即便是反复阅读，也不会产生阅读疲劳，这得益于作者对节奏和措辞的精妙把控。

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这本书对于拓展视野的帮助，也是我极为看重的一点。它显然不仅仅局限于基础的血液或尿液分析，而是将目光投向了更前沿、更精细的分子诊断领域。在不同的章节中，时不时穿插着对最新研究进展的简要介绍和对未来发展趋势的展望，这使得这本书的“保质期”大大延长，它不像某些书籍那样，出版后不久就显得过时。对于追求知识更新的读者而言，这种前瞻性无疑是巨大的吸引力，它鼓励读者不仅仅满足于完成当前的实验任务，而是去思考如何利用这些基础知识去推动未来的医学进步。它提供的不仅仅是“怎么做”，更是“为什么这样做，以及未来可以怎样做得更好”。

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这本书的实用性简直是教科书级别的典范。我尤其赞赏其中关于仪器操作和质量控制部分的详尽描述，简直就像一本“保姆级”的现场指导手册。它没有采用那种冷冰冰的说明书腔调，而是融入了许多实战中可能遇到的“陷阱”和“疑难杂症”的解决之道。比如，当某个指标出现异常波动时，书中会立即给出多个维度的排查思路，从样本采集到试剂有效期，再到仪器校准，覆盖面极广，体现了作者对临床工作流程的深刻洞察。这种前瞻性的指导，极大地降低了新手在实际操作中犯错的概率，对于即将踏入实验室环境的我们来说，这份踏实感是无价之宝。

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说实话，这本书在概念阐述上的深度和广度，远超出了我的预期。它不仅仅是简单地罗列公式和操作步骤，而是深入挖掘了每一个实验背后的生物学原理和临床意义。我最欣赏它对那些“为什么”的解答，那种层层递进的剖析，让原本晦涩难懂的生化反应过程变得如同观看一场精心编排的戏剧，每一个角色（分子）都有其明确的动机和作用。很多教材往往在关键的理论支撑上含糊其辞，但这本书却毫不保留地展示了其学术根基，使得读者在实践操作时，不仅仅是机械地执行流程，而是真正理解了实验的灵魂所在。这种兼顾理论深度与操作实用的平衡感，是很多同类书籍难以企及的。

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这本书的排版真是让人眼前一亮，那种典雅的字体和恰到好处的留白，读起来感觉非常舒适。我特别喜欢它在章节结构上的设计，逻辑脉络清晰得仿佛一张精密绘制的地图，引导着你一步步深入复杂的知识海洋。初拿到手，我就被那种沉稳的气质所吸引，封面设计既不过分花哨，也绝不显得单调，恰到好处地传达出专业与严谨。内页的纸张质量也无可挑剔，即便是长时间阅读，眼睛也不会感到疲劳，这对于需要反复查阅资料的学生来说，无疑是一大福音。整体来看，它给人的感觉就像是一位经验丰富、学识渊博的导师，用最清晰、最美观的方式呈现知识的殿堂，让人从拿起书本的那一刻起，就充满了学习的欲望。

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