Making PCR pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026
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具体描述
This is a behind-the-scenes account of the invention of one of the most significant biotechnological discoveries in our time - the polymerase chain reaction. Transforming the practice and potential of molecular biology, PCR extends scientists' ability to identify and manipulate genetic materials and accurately reproduces millions of copies of a given segment in a short period of time. It makes abundant what was once scarce - the genetic material required for experimentation. This study explores the culture of biotechnology as it emerged at Cetus Corporation during the 1980s and focuses on its distinctive configuration of scientific, technical, social, economic, political, and legal elements, each of which had its own separate trajectory over the preceding decade. The book contains interviews with the cast of characters who made PCR, including Kary Mullin, the maverick who received the Nobel prize for "discovering" it, as well as the team of young scientists and the company's business leaders. This book shows how a contingently-assembled practice emerged, composed of distinctive subjects, the site where they worked, and the object they invented.
作者简介
保罗・拉比诺，加利福尼亚大学伯克利分校人类学教授，著有《近代法国――社会环境的规范和形态》，与于贝尔・德雷富斯合著《米歇尔・福柯――超越结构主义和解释学》。
目录信息
读后感
分子克隆技术时代开创阶段，希斯特公司宽松自由的科研环境，上市后充足的资金支持，许多优秀的科学家共聚一堂，为PCR技术的诞生提供了很好的条件。 在众多有个性的科学家中，凯利-普莱斯这个特色人物，家境丰厚，化学出身，不知不觉发在自然杂志上发表过宇宙学...
评分作者是通过与多个与PCR产生相关的人的采访，比较客观还原了当时的情境。这种情境多是着眼于大环境或者个人的过往经历，这可能与作者的人类学专业有关。而对技术方面的描述则显得较为薄弱，在描述PCR技术成熟过程中各技术难点的解决，显得比较简单和平白，不能给作者以代...
评分 评分用户评价
这本《Making PCR》如同一位循循善诱的老师，让我这个初涉分子生物学领域的学生，在PCR技术的海洋中找到了清晰的航向。从最初对缩写感到一头雾水，到如今能够自信地设计引物、优化反应条件，这本书功不可没。它没有上来就用晦涩难懂的专业术语轰炸我，而是从PCR的核心原理——DNA的半保留复制——娓娓道来。通过生动形象的比喻，例如将DNA聚合酶比作辛勤的建筑工人，将dNTPs比作砖瓦，让我对DNA的合成过程有了直观的认识。随后，它详细解析了PCR的三个关键步骤：变性、退火和延伸，并且深入探讨了影响每个步骤效率的关键因素，如温度、时间和离子浓度。最让我印象深刻的是，书中提供了大量实际操作的技巧和注意事项，例如如何正确配制反应体系、如何避免PCR抑制剂的干扰、以及如何根据目标基因的特性调整引物设计。我曾多次因为PCR扩增效率不高而苦恼，通过参考书中的排错指南，我才发现原来是退火温度设置不当，或者是引物二聚体干扰了目标产物的扩增。这本书的价值不仅在于理论的传授，更在于其解决实际问题的能力，它让我从一个被动的学习者，转变为一个能够主动解决问题的科研工作者。即使是在实验室度过了一整个下午，当回到家翻开这本书，依然能够从中获得新的启发，仿佛每一页都隐藏着等待我去发掘的知识宝藏。它不仅仅是一本书，更像是我在科研道路上不可或缺的伙伴，陪伴我一步步走向成功。
评分《Making PCR》这本书就像一位经验丰富的老船长，带领我穿梭在分子生物学的浩瀚海洋中，而PCR技术就是那艘承载我探索未知的重要舰船。书中对DNA模板的制备和纯化给予了相当的重视，这往往是PCR实验成功的基石。它详细介绍了从细胞裂解、蛋白酶K消化、酚-氯仿抽提到硅胶柱纯化等多种DNA提取方法，并且深入分析了各种方法的优缺点以及适用范围。我曾多次因为DNA提取不充分或带有杂质而导致PCR扩增失败，通过阅读这本书，我才意识到，模板的质量直接决定了PCR的成败。作者还分享了许多实用的技巧，例如如何避免DNA在提取过程中降解，如何判断DNA的浓度和纯度，以及如何选择合适的DNA作为PCR模板。此外，在讲解PCR反应体系的构建时，本书不仅列出了各种组分的名称和功能，还详细解释了它们的最佳工作范围和相互之间的影响。例如，它深入探讨了Mg2+离子在DNA聚合酶活性和引物结合中的作用，并且提供了通过梯度PCR来优化Mg2+浓度的实验方案。这些详细的步骤和原理性的解释，让我能够更加自信地设计和优化PCR反应，有效地提高了我的实验成功率。这本书的价值在于，它不仅仅提供了技术指导，更重要的是，它培养了我对实验细节的敏感度和对实验结果的严谨性，让我能够成为一名更出色的科研人员。
评分《Making PCR》这本书给我最大的启示在于，它将PCR这一基础技术，通过极其详尽和深入的讲解，展现出其所包含的丰富知识和广阔的应用前景。在DNA模板的制备与纯化部分，本书不仅仅提及了DNA的提取方法，更深入地探讨了不同样本类型（如血液、组织、植物、微生物等）在DNA提取过程中可能遇到的问题，以及相应的解决方案。我曾经因为提取的DNA纯度不够高，导致PCR扩增效率低下，但在阅读了这本书后，我才意识到，选择合适的DNA提取方法，并且注重提取过程中的细节，是PCR成功的基石。它详细对比了酚-氯仿抽提法、硅胶柱法、磁珠法等多种DNA提取方法的优缺点，并根据不同的样本类型给出了推荐。在PCR反应条件优化部分，本书堪称我的“圣经”。它不仅仅列出了优化PCR反应的各种关键参数，如变性温度和时间、退火温度和时间、延伸温度和时间、dNTPs浓度、Mg2+浓度、引物浓度等，更重要的是，它深入分析了这些参数背后的分子机制，并提供了多种优化策略，如梯度PCR、Touchdown PCR、以及不同起始DNA量对PCR效率的影响。我曾一度对如何优化PCR条件感到迷茫，但在阅读了这本书后，我才发现，理解了原理，就能够更有针对性地进行优化。更重要的是，这本书不仅教授了技术，更重要的是，它培养了我严谨的科学态度和解决问题的能力，让我能够更自信地应对科研中的各种挑战。
评分《Making PCR》这本书的深度和广度，远远超出了我对一本技术书籍的预期。它并非简单地罗列PCR的步骤和试剂，而是从DNA复制的基本原理出发，层层深入地解析PCR的每一个环节。我尤其喜欢书中对DNA聚合酶的详尽介绍，它不仅仅是简单地提及Taq酶，而是详细地分析了其热稳定性、延伸速率、以及不同聚合酶在不同应用中的优势，例如高保真度的聚合酶在基因克隆中的应用，以及能够扩增长片段的聚合酶在特定研究中的作用。在PCR反应条件优化方面，本书提供了极其详尽的指导，让我从一个对PCR感到畏惧的初学者，成长为一个能够熟练运用PCR进行科研工作的实践者。它不仅仅列出了关键参数，如温度、时间、dNTPs浓度、Mg2+浓度、引物浓度等，更重要的是，它深入分析了这些参数背后的分子机制，并提供了多种优化策略，如梯度PCR、Touchdown PCR、以及不同起始DNA量对PCR效率的影响。我曾一度对如何优化PCR条件感到迷茫，但在阅读了这本书后，我才发现，理解了原理，就能够更有针对性地进行优化。更重要的是，这本书不仅教授了技术，更重要的是，它培养了我严谨的科学态度和解决问题的能力，让我能够更自信地应对科研中的各种挑战。它不仅仅是一本工具书，更是一本启迪我科学思维的宝藏。
评分《Making PCR》这本书的阅读体验，就像是在一位经验丰富、耐心细致的导师的指导下学习一项复杂的技术。它没有采用枯燥的理论堆砌，而是通过生动形象的比喻和详实的实验案例，将PCR技术的核心原理剖析得淋漓尽致。我尤其欣赏书中对DNA聚合酶的介绍，它不仅仅简单地描述其功能，而是深入地探讨了不同类型DNA聚合酶的酶学特性、热稳定性以及它们在PCR中的应用。例如，它详细解释了Taq酶是如何在高温下保持活性的，以及随着二代、三代聚合酶的出现，PCR反应的效率和特异性得到了怎样的提升。此外，本书在讲解PCR反应条件优化时，也提供了极其详尽的指导。它不仅列出了各种关键参数，如模板DNA的浓度、dNTPs的浓度、引物的浓度、Mg2+的浓度等，还深入分析了这些参数对PCR结果的影响，并且提供了多种优化策略，如梯度PCR、Touchdown PCR等。我曾经在优化PCR反应条件时感到无从下手，但在阅读了这本书后，我才发现，原来每一个参数的调整都蕴含着精妙的科学原理。更重要的是，这本书不仅仅停留在理论层面，它还提供了大量实用的实验技巧，例如如何避免PCR污染、如何正确储存PCR试剂、以及如何对PCR产物进行初步鉴定等。这些细节的处理，充分体现了作者对实验操作的深刻理解和对科研工作者的关怀。这本书不仅提升了我的PCR技术，更让我对分子生物学实验的严谨性有了更深的认识。
评分《Making PCR》以一种极其易于理解的方式，将PCR技术这一看似复杂的概念剖析得淋漓尽致。它成功的关键在于其对基础知识的扎实构建，以及对实际操作细节的精益求精。在探讨PCR循环的每一个环节时，本书都力求从最基本的原理出发，例如在解释退火步骤时，它不仅阐述了引物与互补DNA序列结合的重要性，还详细介绍了影响退火效率的多种因素，包括引物的长度、GC含量、温度和盐浓度。作者甚至引用了相关的热力学原理，帮助读者理解这些参数如何影响引物的结合稳定性。我特别欣赏书中对于不同PCR应用场景的介绍，例如基因克隆、基因分型、病毒检测等，并且详细阐述了在这些特定应用中，PCR条件的优化策略和需要注意的关键点。当我想要将PCR技术应用于我自己的研究项目时，本书提供的这些案例分析和解决方案，极大地节省了我的时间和精力。它让我明白，PCR并非一成不变的公式，而是需要根据具体的实验目标和材料进行精细调整的艺术。书中对于PCR抑制剂的讨论也让我受益匪浅，例如血液中的血红素、植物组织中的多酚类化合物等，以及如何通过去除这些抑制剂或调整反应体系来克服它们的影响。这本书的知识深度和广度，以及其极强的可操作性，让我从一个对PCR感到畏惧的初学者，成长为一个能够熟练运用PCR进行科研工作的实践者。
评分不得不说，《Making PCR》是一本真正能够点燃我科研激情的书籍。在阅读过程中，我仿佛置身于一个充满活力的实验室，与作者一起探索PCR技术的奥秘。它并没有将PCR描述成一个冰冷的技术名词，而是将其还原为生物体内的生动过程。书中对DNA聚合酶的讲解尤为精彩，它不仅仅是简单的提及，而是深入剖析了其酶学特性、催化机制以及不同的聚合酶类型在PCR中的应用。我尤其对书中关于热稳定DNA聚合酶的介绍印象深刻，它解释了为什么这些酶能够在高温下保持活性，从而实现了PCR过程中的反复变性循环。此外，本书对PCR反应体系中各种组分的比例优化进行了详尽的阐述，例如dNTPs、引物、模板DNA以及缓冲液的浓度，并详细解释了这些组分对PCR效率和特异性的影响。我曾经对如何确定最佳的Mg2+浓度感到困惑，书中通过多个实验数据和图表，让我直观地理解了Mg2+在DNA聚合过程中的关键作用，以及过量或不足的Mg2+可能带来的负面影响。更重要的是，这本书不仅仅停留在理论层面，它还提供了大量实用性的建议，例如如何选择合适的PCR管、如何防止PCR产物在后续分析中的降解，以及如何对PCR产物进行定量分析。这些细节的处理，充分体现了作者对实验操作的深刻理解和对科研工作者的关怀。这本书不仅提升了我的PCR技术，更让我对整个分子生物学实验有了更深入的认识和更系统的理解，是一本真正值得反复研读的经典之作。
评分《Making PCR》这本书给我带来的最大震撼，在于它将PCR这一基础技术，通过极其细致和深入的讲解，展现出其蕴含的丰富知识和无限可能。在解读DNA模板的使用时，书中不仅仅提及了DNA的浓度，更深入探讨了DNA的完整性、是否存在抑制PCR的物质，以及如何选择合适的DNA提取方法来应对不同的样本类型。我曾一度认为只要有DNA就能做PCR，但这本书让我明白了，高质量的DNA模板是PCR成功的关键。它详细分析了不同DNA提取方法的优缺点，比如酚-氯仿抽提法的效率高但操作繁琐，硅胶柱法的便捷快速但可能存在部分抑制剂残留。作者还分享了如何通过琼脂糖凝胶电泳来评估DNA的质量，这让我对DNA的形态有了更直观的认识。在PCR反应条件的优化方面，本书堪称我的“Bible”。它不仅列出了温度、时间、dNTPs浓度、引物浓度等关键参数，更重要的是，它解释了这些参数背后的分子机制。例如，它深入剖析了变性温度对DNA双链解链效率的影响，以及退火温度如何影响引物与模板的特异性结合。书中还详细介绍了梯度PCR的应用，以及如何利用梯度PCR来快速找到最佳的退火温度，这为我节省了大量的实验时间。这本书的价值在于，它不仅教会了我“怎么做”，更重要的是，它让我理解了“为什么这么做”，从而能够让我更灵活、更有效地应用PCR技术解决科研问题。
评分《Making PCR》这本书给我最大的感受是，它不仅仅是一本技术手册，更是一门关于科学思维的启蒙。它没有直接灌输结论，而是通过引导读者去思考PCR反应中的每一个环节，从而构建起完整的知识体系。在讲解引物设计时，本书首先从DNA双螺旋结构和碱基配对原则入手，让我理解了引物与模板结合的基础。随后，它详细介绍了各种可能影响引物设计的因素，例如引物的长度、GC含量、Tm值、发夹结构、二聚体形成以及交叉杂交等。更重要的是，书中通过大量的图示和实例，直观地展示了这些因素如何影响PCR的特异性和效率。我曾一度对引物设计的复杂性感到头疼，但在阅读了这本书后，我才发现，理解了背后的原理，选择合适的工具，并且注重细节，引物设计并非遥不可及。此外，书中对PCR抑制剂的分析也让我印象深刻。它不仅列举了常见的PCR抑制剂，如酚类化合物、多糖、血红素等，还详细阐述了它们对PCR反应的干扰机制，以及如何通过选择合适的DNA提取方法、调整反应体系或者添加特异性添加剂来克服这些抑制作用。这种对问题根源的深入探究，让我能够更有效地解决实际实验中遇到的各种难题。这本书不仅提升了我的PCR技术水平，更重要的是，它培养了我严谨的科学态度和解决问题的能力，让我能够更加自信地面对科研中的各种挑战。
评分《Making PCR》的编排结构堪称完美，每一章节都如同一块精心打磨的拼图，自然而然地衔接在一起，构建起我对PCR技术的全面认知。它没有采用简单粗暴的堆砌知识点的方式，而是循序渐进，从基础概念到复杂应用，层层递进。读到关于引物设计的章节时，我惊叹于作者的细致入微。书中不仅列举了多种引物设计原则，如GC含量、Tm值、发夹结构和二聚体的避免，还深入剖析了这些原则背后的分子机制。例如，它解释了为什么过高的GC含量会增加引物与模板结合的稳定性，从而可能导致非特异性结合，而过低的GC含量则会影响引物的退火效率。更难能可贵的是，书中提供了多个真实的引物设计案例，并且对每一步的设计思路进行了详细的解读，让我能够将理论知识融会贯通，并且举一反三。在实际操作中，我尝试了书中所介绍的多种引物设计软件，但最终还是发现，理解了背后的原理，才能更好地驾驭这些工具。此外，这本书还专门开辟了一个章节来讨论PCR的常见故障排除，这对我来说是无价的。当我面对PCR产物模糊不清、条带杂乱的困境时，这本书就像是一盏指路明灯，让我迅速找到问题的症结所在，并提供了切实可行的解决方案。无论是优化dNTPs的浓度、调整Mg2+的含量，还是尝试不同的热启动方法，书中都给出了详实的指导，并且强调了实验的严谨性和可重复性。这本书不仅仅教授技术，更传递了科学探索的精神，让我对PCR技术的使用和优化有了更深刻的理解和更全面的掌握。
评分作者已列入My list of dream advisors.
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