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页数:480

译者:

出版时间:2004-1

价格:39.00元

装帧:简裝本

isbn号码:9787302077886

丛书系列:

图书标签:

• 内科学
• 医学
• 临床医学
• 疾病内科
• 诊断学
• 治疗学
• 医学教材
• 医学参考书
• 医师资格证
• 住院医师规范化培训

好的，这是一本名为《现代分子生物学技术与应用》的图书简介。 --- 《现代分子生物学技术与应用》 图书简介 导言：解码生命的蓝图 在二十一世纪的生命科学领域，分子生物学已不再是单纯的基础研究工具，而是驱动生物技术、医学诊断、药物开发乃至农业革新的核心引擎。本书《现代分子生物学技术与应用》旨在为广大生命科学领域的学生、研究人员以及临床工作者提供一个全面、深入且兼具实践指导意义的知识体系。它专注于介绍当前最前沿、最核心的分子生物学技术，并详细阐述这些技术在基础研究、疾病机制解析及临床转化中的实际应用。我们力求通过详实的图解、精炼的文字和丰富的案例，将复杂的分子操作转化为清晰可循的步骤和深入的理论认知。 本书的结构设计充分考虑了技术的演进与学科的交叉性，从基础的分子克隆技术出发，逐步深入到高通量测序、基因编辑和单细胞分析等尖端领域。我们相信，掌握这些工具，如同获得了理解和重塑生命的钥匙。 第一部分：分子生物学基础与经典技术：构建基石 本部分聚焦于分子生物学领域的基石技术，这些技术构成了现代生物学研究的“工具箱”。 第一章：核酸的提取、纯化与定量 详述了从不同生物材料（如血液、组织、细胞系、植物组织）中高效提取DNA、RNA（包括总RNA、mRNA和非编码RNA）的原理与操作规范。重点对比了酚氯仿抽提法、硅胶柱纯化法以及磁珠法在效率、纯度和成本上的差异。同时，详细讲解了紫外分光光度计、微量核酸分析仪（如Nanodrop）和荧光定量检测系统（如Qubit）在核酸浓度和纯度评估中的应用及常见误差分析。 第二章：聚合酶链式反应（PCR）及其衍生技术 本章深入剖析了PCR技术的分子机制，包括引物设计原则、热循环参数的优化。在此基础上，系统介绍了多种高级PCR技术： 实时荧光定量PCR (RT-qPCR/qPCR)： 侧重于绝对定量与相对定量（ΔΔCt法）的统计学基础和数据解读，尤其是在基因表达调控研究中的应用。 反转录PCR (RT-PCR)： 阐述了cDNA合成的效率与模板质量对下游分析的影响。 高保真PCR与长片段PCR： 讨论了如何通过改进酶体系和反应条件，实现对长靶序列的精确扩增。 数字PCR (dPCR)： 介绍其在超低丰度靶标（如循环肿瘤DNA, ctDNA）的绝对定量中的突破性优势。 第三章：分子克隆与重组DNA技术 这是现代生物技术的核心环节。本章详细介绍了限制性内切酶的选择与使用策略，连接酶的反应动力学。重点讲解了不同载体系统（质粒、噬菌体、病毒载体）的选择标准，以及用于构建重组DNA的常用策略： 经典粘性末端连接与平末端连接。 限制酶单一或双酶切策略。 基于同源重组的克隆方法（如Gibson Assembly、SLIC）： 强调其在多片段无缝组装中的效率。 基因的异源表达系统： 探讨了在大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞中表达外源蛋白的技术要点、翻译后修饰的差异及纯化策略。 第二章：蛋白质的表达、纯化与结构分析 本部分关注生命活动的主要执行者——蛋白质，及其在体内的功能探究。 第四章：蛋白质表达与大规模纯化 详细介绍了诱导表达条件的选择（如IPTG浓度、温度梯度），蛋白的溶解性问题及包涵体的复性技术。核心内容聚焦于层析技术： 亲和层析（Affinity Chromatography）： 详细阐述了His-tag、GST-tag、GST-tag等标签系统的原理、操作流程及洗脱条件优化。 离子交换层析（IEC）与分子筛层析（SEC）： 讨论如何利用蛋白质的等电点（pI）和分子量进行初步分离和精纯。 蛋白质的稳定性与储存： 探讨缓冲液配制、添加剂（如甘油、去垢剂）的使用，以及冷冻干燥技术的应用。 第五章：蛋白质的鉴定与互作研究 本章介绍如何确认目标蛋白质的存在和功能状态： Western Blotting (WB)： 从抗体制备与选择、上样缓冲液配制到显影系统的优化，确保结果的特异性和灵敏度。 蛋白质组学基础： 概述二维电泳（2D-PAGE）及质谱（MS）技术在蛋白质鉴定中的应用。 蛋白质互作技术： 深入探讨酵母双杂交（Y2H）系统、荧光互补法（BiFC）以及免疫共沉淀（Co-IP）的实验设计与数据验证。 第三部分：高通量测序与基因组学前沿技术 随着测序成本的急剧下降，高通量技术已成为解析复杂生物系统的标准范式。 第六章：新一代测序技术（NGS）原理与流程 系统阐述了Illumina SBS（边合成边测序）技术的核心流程，包括文库构建（片段化、接头连接、富集）的质量控制。本书特别强调了数据分析的生物信息学前处理：质量评估（如FastQC）、序列比对（如BWA, Bowtie2）和变异检测（如GATK）。 第七章：NGS的核心应用：转录组与表观遗传学 RNA-Seq（转录组测序）： 比较了全长RNA测序与Poly(A)捕获法的优劣，详细讲解了差异表达基因（DEG）的筛选、富集分析（GO/KEGG）及可视化方法。 ChIP-Seq（染色质免疫沉淀测序）： 侧重于实验中如何精确控制抗体特异性、文库质量以及峰值识别算法（如MACS）。 ATAC-Seq（可转座酶染色质开放性测序）： 介绍其作为评估染色质可及性、快速定位增强子/启动子的新方法。 第四部分：基因编辑与细胞示踪技术 本部分探讨了直接修改遗传物质的能力，这是现代生物医学最具革命性的进展。 第八章：CRISPR-Cas9及其优化系统 本书对CRISPR/Cas9系统的分子结构（sgRNA的设计、Cas9的切割机制）进行了细致的解析。重点讨论了其在真核细胞中的递送策略（脂质体、电穿孔、慢病毒感染）。此外，还涵盖了CRISPR的升级版： 碱基编辑器（Base Editors）与先导编辑器（Prime Editors）： 阐述它们如何实现无双链断裂的精确点突变。 CRISPR/Cas12a (Cpf1)及其他核酸酶的应用。 脱靶效应的评估与抑制策略。 第九章：细胞示踪、成像与流式细胞术 强调了将分子事件与细胞表型关联起来的重要性： 荧光蛋白技术（GFP, RFP, YFP等）： 讨论其在活细胞成像中的应用、光漂白问题及FRET（Förster共振能量转移）原理。 流式细胞术（FACS）： 详细介绍多色上样策略、补偿校准的必要性，以及细胞周期分析、凋亡检测、细胞分选（Sorting）的标准操作流程。 免疫荧光与共聚焦显微镜： 介绍组织切片和细胞培养中固定、通透、抗体孵育及三维重建的技术细节。 结语：技术的融合与未来展望 本书最后总结了分子生物学技术如何日益与其他学科（如计算生物学、工程学、材料学）深度融合，催生了合成生物学、类器官培养等新兴交叉领域。我们鼓励读者不仅要掌握现有技术的“如何做”，更要理解其背后的“为什么”，从而能够批判性地评估数据，并设计出更具创新性的实验方案。 《现代分子生物学技术与应用》力求成为一本实用、前沿且值得反复研读的工具书。

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这本书的语言风格非常具有个人魅力，它没有那种高高在上的学术腔调，反而更像是一位经验丰富、学识渊博的前辈，坐在你的身边，耐心地与你交流临床心得。行文中充满了对患者病情的体恤和对医学伦理的思考，这在冰冷的医学文献中是十分难得的。例如，在描述慢性病管理时，作者不止一次地提醒读者，治疗方案的制定必须考虑患者的生活质量、依从性以及社会经济背景，而不是仅仅追求教科书上的“完美指标”。这种人文关怀渗透在每一个知识点中，使得学习过程充满了温度。我尤其欣赏作者在讨论某些治疗方案的局限性时所展现出的坦诚，他会直言不讳地说：“尽管这是目前最好的方案，但我们仍有很长的路要走。”这种诚实的态度，建立了一种基于信任的学习关系，让我们这些读者在学习专业知识的同时，也能潜移默化地接受更深层次的医学人文熏陶，这是任何纯粹的技术手册都无法比拟的。

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这本书的叙事逻辑和知识的组织方式，简直是为我们这些非科班出身，但又急需了解系统医学知识的自学者量身定制的。它没有一上来就抛出那些晦涩难懂的分子机制或复杂的生化通路，而是从最基础的症状入手，层层递进。比如讲到呼吸系统疾病时，作者先描述了患者最常见的“咳、喘”是何种感觉，然后才慢慢引入肺部解剖和生理学的知识，让你在理解生理功能的基础上，再去分析病理变化，这种“由果溯因”的讲解方式，极大地降低了理解门槛。我特别喜欢它在每一章末尾设置的“临床思维训练”小节，它不是简单地列举病例，而是提出一个开放性的临床难题，引导你去思考：为什么是这个诊断？还有哪些可能被忽略的鉴别诊断？这种互动式的学习体验，远胜于那种填鸭式的知识灌输，让人感觉自己不是在被动接受信息，而是在主动构建知识体系。坦白说，我之前对很多内科概念感到头大，但读完这本书里关于肾内科的那几个章节后，我对水钠平衡的理解清晰度简直提升了一个档次，那段文字的流畅性和深度感，令人印象深刻。

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这本书在处理罕见病和疑难杂症时的处理方式，是我个人认为其“大家风范”的体现。对于那些在日常门诊中很少遇到的病症，很多教材往往只是草草带过，甚至完全忽略。但这本书的作者似乎抱着一种对所有医学知识都应有所交代的态度，对一些少见病，比如某些遗传代谢性疾病或非常特殊的自身免疫性疾病，都给予了足够篇幅的介绍。他们不仅描述了典型的临床表现，还细致地讲解了其发病机制的复杂性，以及在哪些特定的地理区域或特定人群中更常见。这种“不求有功，但求无过”的全面性，极大地拓宽了读者的视野，让我意识到内科学的广阔和深邃。特别是关于神经内科一些运动障碍性疾病的描述，那种对病理生理过程的细致描摹，让人对疾病的复杂性有了更深层次的敬畏。这种对知识的包容度和深度，真的体现了其作为一本“权威参考”的价值。

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这本书的排版实在是让人眼前一亮，完全不是那种传统教科书那种枯燥乏味的黑白印刷。装帧设计上用了那种略带磨砂质感的封面，手感非常好，拿在手里沉甸甸的，就知道内容肯定很扎实。更让我惊喜的是，里面的插图和图表质量极高，那种彩色的病理切片照片清晰得仿佛触手可及，血管的走向、细胞的结构，连最细微的炎症反应都能看得一清二楚。我记得有几张关于心肌梗死后心室壁重构的示意图，用不同的颜色区分了坏死区、瘢痕组织和存活心肌，那种三维的立体感，比我在任何电子资料上看到的都要直观得多。而且，作者在关键的诊断流程图上非常用心，流程图的逻辑清晰到让人一眼就能把握住复杂的鉴别诊断路径，这对于临床实践中的快速决策简直是福音。相比我以前看过的几本经典教材，这本书在视觉呈现上达到了一个全新的高度，学习起来完全没有压力，更像是在欣赏一部医学艺术品，而不是啃一本厚厚的参考书。这种对细节的极致追求，足见出版社和作者团队的专业与诚意。

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我必须强调这本书在“与时俱进”方面的表现。医学知识更新速度快得惊人，很多老教材里还在沿用几十年前的观点，但这本书显然是在紧跟最新的国际指南和研究进展。我随便翻到关于高血压管理的那一部分，就看到了关于2023年欧洲和美国指南的对比分析，甚至提到了新的降压药物分类和联合用药的最新推荐。这种时效性对于临床一线人员来说至关重要。更难得的是，它不仅仅是简单地罗列新数据，而是深入剖析了这些新指南背后的循证医学基础，引用了近期有影响力的研究论文。这使得我们不仅知道“该怎么做”，还能理解“为什么这么做”。我在阅读心血管部分的章节时，深切感受到了作者对循证医学的尊重和运用，他不会武断地下结论，而是清晰地展示了不同干预措施的有效性和风险比。这种严谨的科学态度，让整本书的权威性和可信度大大提高，让人敢于相信书中所写的一切。

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