Field Manual of Techniques in Invertebrate Pathology

Field Manual of Techniques in Invertebrate Pathology pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:
作者:Lacey, Lawrence A. (EDT)/ Kaya, Harry K. (EDT)
出品人:
页数:888
译者:
出版时间:2007-10
价格:$ 145.77
装帧:
isbn号码:9781402059322
丛书系列:
图书标签:
  • Invertebrate Pathology
  • Insect Pathology
  • Microbial Control
  • Disease Ecology
  • Entomology
  • Pathogens
  • Laboratory Manual
  • Techniques
  • Diagnosis
  • Applied Entomology
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具体描述

"The Field Manual of Techniques in Invertebrate Pathology" is designed to provide background and instruction on a broad spectrum of techniques and their use in the evaluation of entomopathogens in the field. The second edition of the Field Manual provides updated information and includes two additional chapters and 12 new contributors. The intended audience includes researchers, graduate students, practitioners of integrated pest management (IPM), regulators and those conducting environmental impact studies of entomopathogens. Although it can function as a stand alone reference, the Field Manual is complementary to the laboratory oriented "Manual of Techniques in Insect Pathology" and to comprehensive texts in insect pathology. The Editors have structured the 40 chapters of the Field Manual into 10 sections to provide the tools required for planning experiments with entomopathogens and their implementation in the field. The basic tools include chapters on the theory and practice of application of microbial control agents (MCAs) (Section I), statistical considerations in the design of experiments (Section II), and three chapters on application equipment and strategies (Section III). Section IV includes individual chapters on the major pathogen groups (virus, bacteria, microsporidia, fungi, and nematodes) and special considerations for their evaluation under field conditions. This section sets the stage for subsequent chapters on the impact of naturally occurring and introduced exotic pathogens and inundative application of MCAs. Twenty-three chapters on the application and evaluation of MCAs in a wide variety of agricultural, forest, domestic and aquatic habitats comprise Section VII of the Field Manual. In addition to insect pests, the inclusion of mites and slugs broadens the scope of the book. Most of the chapters in this section include step by step instructions on handling of inoculum, design of field experiments and experimental plots and application and assessment of efficacy of dozens of MCAs. Several of these chapters include supplementary techniques and media for conducting follow up laboratory studies for confirmation of infection, determination of persistence, etc. The three final chapters include: special consideration for evaluation of Bt transgenic plants (Section VIII); resistance to insect pathogens and strategies to manage resistance (Section IX); and guidelines for evaluating effects of MCAs on nontarget organisms (Section X). Due to uncertainty regarding the future availability of organophosphate and other conventional chemical insecticides, MCAs will play increasingly important roles in IPM. The Field Manual will provide researchers and IPM practitioners with techniques and practical guidance for the study and optimal use of MCAs in a variety of settings.

昆虫病理学手册:无脊椎动物病害研究方法 导言 在农业、林业、环境保护以及生物防治等诸多领域中,对昆虫病原微生物及其引起的病害的深入理解和有效管理至关重要。《昆虫病理学手册:无脊椎动物病害研究方法》 汇集了当代理论与实践经验,旨在为昆虫病理学家、微生物学家、生态学家以及从事昆虫害虫综合治理(IPM)的专业人员提供一套全面、系统的实验室及田间研究技术指南。本书不侧重于某一特定病原体的深入分类学研究,而是着力于方法论的构建与标准化,确保研究结果的可重复性与跨学科比较性。 本书的结构设计旨在引导读者从基础的病原体分离培养,逐步深入到分子生物学检测、田间流行病学调查,直至病原菌制剂的生物学活性评估。我们深知,无脊椎动物病原体种类繁多,涵盖细菌、真菌、病毒、微孢子虫以及线虫等,每类病原体都需要特定的技术来捕捉、鉴定和量化。因此,本书的重点在于提供普适性的技术框架和针对性强的操作规程。 第一部分:基础技术与样本处理 本部分奠定了整个研究的基础,涵盖了从现场采集到实验室初步分离的全部流程。高质量的样本处理是成功分离和鉴定病原体的先决条件。 1.1 样本采集与田间记录 详细阐述了在不同生态环境(如农田、森林、水体)中采集受感染昆虫的规范流程。强调了采集工具的选择(避免机械损伤和二次污染)、采集时间(与病程阶段匹配)以及必要的田间记录要求,包括寄主信息、环境温湿度数据、发病率和死亡率的初步观察记录。特别关注了活体样本与死亡样本的处理差异。 1.2 组织解剖与病原体初步分离 系统介绍了无脊椎动物的无菌解剖技术,重点在于如何安全、有效地分离受感染的组织器官(如脂肪体、肠道、血淋巴)。对于细菌和真菌的分离,提供了不同营养琼脂培养基的配方、优化条件(温度、光照)以及初级筛选指标。对于病毒和微孢子虫等细胞内病原体,则详细描述了组织匀浆、离心纯化以及超速离心分离的步骤。 1.3 显微镜观察与形态学鉴定 本章聚焦于光学显微镜在病原体初筛中的应用。包括活体观察技术(如血细胞计数盘的应用)、染色技术(如革兰氏染色、姬姆萨染色、乳酸品红染色)以及制作永久性玻片标本的方法。对于特定形态结构(如真菌的分生孢子、微孢子虫的囊泡)的测量和记录标准进行了规范化定义。 第二部分:特定病原类群的培养与纯化技术 无脊椎动物病原体多样,本部分深入探讨了针对主要病原体类群的专业培养技术,旨在获得高纯度的病原体供后续分析或生物测定。 2.1 细菌性病原体的培养与纯化 详细介绍了昆虫病原细菌,如苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)和蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)的实验室大规模培养技术,包括液体发酵培养基的优化、芽孢的诱导和收获。对于兼性厌氧或专性细胞内细菌(如肠道共生菌群中的致病菌),提供了特定的厌氧培养箱操作规程和高选择性培养基的配置方法。 2.2 真菌性病原体的分离、培养与孢子制备 重点阐述了白色拟青霉(Penicillium whitei)和虫草菌属(Cordyceps spp.)等重要的昆虫真菌的分离与纯化技术。包括如何从土壤或受感染组织中分离菌丝体,诱导其产孢,以及收获高质量、高活性的分生孢子悬浮液。特别强调了真菌活性的保持和孢子纯度的检测方法。 2.3 病毒与微孢子虫的体内外增殖 针对昆虫病毒(如核多角体病毒 NPV 和颗粒体病毒 GVs),本书介绍了最可靠的增殖系统——活体寄主增殖法(In Vivo Propagation)。同时,也涵盖了昆虫细胞系(例如Sf9、High Five)的建立、维持与病毒批次扩增的技术细节。对于微孢子虫,则详细描述了如何利用活体寄主诱导孢子形成,并通过密度梯度离心技术分离和纯化高密度的囊泡状孢子。 第三部分:分子生物学与免疫学诊断工具 现代昆虫病理学研究高度依赖分子技术进行快速、灵敏的病原体鉴定和宿主免疫反应的评估。 3.1 核酸提取与定量检测 系统介绍了从不同昆虫组织(脂肪体、血淋巴、肠道)中高效提取高质量总核酸的方法,特别针对细菌内毒素或真菌细胞壁成分对PCR的抑制问题提供了解决方案。详细说明了基于PCR、实时荧光定量PCR(qPCR)的病原体特异性检测引物设计原则、反应体系优化及结果的定量分析。 3.2 病原体基因组学初步分析 介绍了利用通用引物或针对特定基因(如rRNA基因)进行扩增和测序的初步鉴定技术。提供了通过BLAST比对和系统发育分析进行微生物身份确认的基本步骤,使研究者能够快速将分离株归类至已知物种或识别潜在的新型病原体。 3.3 宿主免疫反应的初步评估 探讨了如何通过检测昆虫血细胞的吞噬活性、酚氧化酶(PO)系统的激活水平,以及相关免疫基因(如凝集素、抗菌肽基因)的表达变化,来评估昆虫对特定病原体的初始抵抗力。 第四部分:生物活性测定与生物防治应用技术 本部分将实验室研究成果转化为具有实际应用价值的技术,重点在于评估病原体的毒力和制剂的田间效果。 4.1 昆虫病原体的生物活性测定(Bioassay) 这是评估病原体效力的核心环节。详细介绍了口服法、浸渍法和注射法等主要的生物测定规程。针对不同病原体,给出了标准的剂量-反应关系建立方法,包括确定中度致死剂量(LC50)和中度感染剂量(EC50)。强调了对照组设置的科学性(如使用灭活病原体、溶剂对照)。 4.2 病原体制剂的稳定性和配方研究 指导研究者如何将高活性病原体转化为可储存、易于施用的生物农药或生物防治剂。涵盖了粉剂(WP)、可湿性粉剂(WP)和悬浮剂(SC)的制备流程,以及加速老化试验、储存期活性衰减率的测定方法。 4.3 田间流行病学调查与应用效果评估 提供了在实际农田环境中监测病原体自然发生率和评估人工施用效果的田间试验设计方案。包括网格抽样法、重复性设计(如随机化区组设计RCBD)的应用,以及如何区分自然死亡与接种死亡,准确评估生物防治的贡献度。 结论 《昆虫病理学手册:无脊椎动物病害研究方法》致力于提供一个坚实的、可操作的技术平台,以推动无脊椎动物病理学研究向更精确、更标准化的方向发展。本书的价值在于其对“如何做”的详尽阐释,而非“是什么”的详尽分类。通过掌握这些方法,研究人员将能更有效地发现、鉴定和应用那些在生态系统中扮演关键角色的微生物因子,为可持续的害虫管理贡献力量。

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