Arabidopsis Protocols

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出版者:Humana Pr Inc
作者:Salinas, Julio (EDT)/ Sanchez-Serrano, Jose J., Ph.D. (EDT)
出品人:
页数:496
译者:
出版时间:2006-3
价格:$ 224.87
装帧:HRD
isbn号码:9781588293954
丛书系列:
图书标签:
  • Arabidopsis
  • Plant Biology
  • Molecular Biology
  • Genetics
  • Plant Physiology
  • Biotechnology
  • Protocols
  • Laboratory Techniques
  • Plant Science
  • Research Methods
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具体描述

This collection of readily reproducible Arabidopsis protocols has been updated to reflect recent advances in plant biology, the completion of the Arabidopsis genome sequence, which is essential for studying plant function, and the development of whole systems approaches that allow global analysis of gene expression and protein and metabolite dynamics. The authors have included nearly all techniques developed in Arabidopsis, others recently adapted from the traditional work in crop species, and the most recent ones using Arabidopsis as a model system. This book highlights include the most recent methods - transcriptomics, proteomics, and metabolomics - and their novel applications (phosphoproteomics, DNA microarray-based genotyping, high throughput metabolite profiling, and single-cell RNA).

现代植物生物学前沿技术与应用 图书简介 本书深入探讨了现代植物生物学研究中的一系列前沿技术与应用,旨在为植物科学家、研究生以及相关领域的研究人员提供一份全面、实用的操作指南和理论参考。全书内容聚焦于理解植物生命活动的分子机制、发育过程的调控网络以及植物对环境胁迫的响应,涵盖了从基础的分子生物学技术到复杂的系统生物学分析方法。 第一部分:分子生物学基础技术与基因操作 本部分详细阐述了在植物研究中不可或缺的分子生物学核心技术。首先,系统介绍了植物基因组文库的构建与筛选策略,包括如何针对不同物种和研究目的选择合适的载体系统和文库类型。重点解析了高通量测序技术(Next-Generation Sequencing, NGS)在植物转录组、重基因组和表观遗传组学研究中的具体应用流程与数据解读,尤其关注了RNA-Seq在解析植物组织特异性表达谱和应激响应通路中的优势。 随后,本书深入讲解了基因功能验证的各类先进技术。CRISPR/Cas9基因编辑系统在植物中的应用是本章的重中之重,不仅提供了精准的基因敲除、敲入和位点突变的操作指南,还探讨了如何通过多重基因编辑策略实现对复杂调控网络的重构。此外,还详细介绍了基因沉默技术(RNA干扰,siRNA/shRNA)的优化方法,以及瞬时表达系统(如农杆菌介导的瞬时表达)在快速验证基因功能和蛋白质定位研究中的实践技巧。我们特别强调了在植物组织中实现高效转化和再生植株的优化条件。 第二部分:蛋白质组学与生物化学分析 本部分侧重于植物蛋白质的研究,这是理解生命活动执行层面的关键。我们首先梳理了植物蛋白质的分离、纯化与鉴定技术。从大规模的二维凝胶电泳(2D-PAGE)到高效液相色谱(HPLC)分离技术,均有详尽的操作步骤和常见问题排查指南。重点介绍了定性和定量蛋白质组学分析的流程,包括使用质谱技术(如MALDI-TOF/TOF和Orbitrap)对蛋白质的修饰、互作和丰度变化进行精确测定。 在功能分析方面,本书详细阐述了蛋白质互作研究的多种策略,包括经典的酵母双杂交(Y2H)系统在植物因子互作网络构建中的优化,以及共免疫沉淀(Co-IP)与质谱联用技术(Co-IP/MS)在体内(in vivo)蛋白质复合物鉴定中的应用。此外,还收录了酶活性测定、蛋白质稳定性分析以及利用荧光报告系统(如FRET、BRET)实时监测活体细胞内蛋白质动态过程的方法。 第三部分:发育生物学与细胞生物学前沿探究 植物的发育过程是高度精确和时空调控的结果。本部分着重介绍了解析植物形态发生和器官构建的先进工具。 组织和细胞成像技术是核心内容之一。详细介绍了荧光显微镜技术(如共聚焦显微镜和超分辨显微镜)在解析细胞骨架、细胞器动态以及信号分子扩散轨迹中的应用。特别地,我们为读者提供了活体成像技术(Live-Cell Imaging)的优化方案,包括如何构建能够稳定维持植物组织或幼苗在显微镜下的培养系统,以观察如气孔发育、根毛伸长等关键过程。 在细胞器生物学方面,本书探讨了叶绿体、线粒体和过氧化物酶体分离与功能分析的标准化方法,并介绍了如何利用靶向信号肽技术构建报告基因系统,精确追踪这些细胞器的亚定位。 此外,植物激素信号转导通路的研究占据了重要篇幅。从激素提取、纯化到其信号转导组分(受体、转录因子)的定位与活性测定,提供了从生化到分子水平的完整研究框架。例如,如何利用DR5等报告基因系统检测生长素响应,或如何通过突变体库筛选解析脱落酸和赤霉素信号的关键节点。 第四部分:环境生物学与胁迫生理学研究 面对日益严峻的气候变化,植物对非生物胁迫(如干旱、盐碱、高温和病原体)的响应机制研究显得尤为重要。 本部分介绍了构建和模拟环境胁迫的实验系统,并重点解析了胁迫下的表观遗传调控。内容涵盖了DNA甲基化、组蛋白修饰(乙酰化、甲基化)在胁迫记忆和基因激活中的作用,以及相应的富集测序技术(如ChIP-Seq)。 在代谢组学方面,本书指导读者如何全面分析植物在胁迫下的次生代谢产物和初级代谢物流变化。详细阐述了气相色谱-质谱联用(GC-MS)和液相色谱-质谱联用(LC-MS)在鉴定和定量植物防御化合物(如类黄酮、萜类)中的技术要点。 最后,本部分探讨了植物-微生物互作的前沿研究方法,特别是根际微生物组(Rhizobiome)的构建与功能分析,包括宏基因组学方法在解析植物健康与病害抗性中的应用。 结语 本书集合了近年来植物生物学领域最具突破性和应用价值的技术方法,力求在理论深度和实验操作的实用性之间找到最佳平衡点。通过详尽的图表和详实的步骤描述,我们期望读者能够熟练掌握这些工具,加速他们在各自研究领域的发现进程。

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