The first two editions of this manual have been mainstays of molecular biology for nearly twenty years, with an unrivalled reputation for reliability, accuracy, and clarity. In this new edition, authors Joseph Sambrook and David Russell have completely updated the book, revising every protocol and adding a mass of new material, to broaden its scope and maintain its unbeatable value for studies in genetics, molecular cell biology, developmental biology, microbiology, neuroscience, and immunology. Handsomely redesigned and presented in new bindings of proven durability, this three-volume work is essential for everyone using today's biomolecular techniques. The opening chapters describe essential techniques, some well-established, some new, that are used every day in the best laboratories for isolating, analyzing and cloning DNA molecules, both large and small. These are followed by chapters on cDNA cloning and exon trapping, amplification of DNA, generation and use of nucleic acid probes, mutagenesis, and DNA sequencing. The concluding chapters deal with methods to screen expression libraries, express cloned genes in both prokaryotes and eukaryotic cells, analyze transcripts and proteins, and detect protein-protein interactions. The Appendix is a compendium of reagents, vectors, media, technical suppliers, kits, electronic resources and other essential information. As in earlier editions, this is the only manual that explains how to achieve success in cloning and provides a wealth of information about why techniques work, how they were first developed, and how they have evolved.
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《Molecular Cloning》这本书,在我看来,不仅仅是一本教科书,更是一部“工具箱”。它里面应该装满了各种各样的“工具”,帮助我们解决在分子生物学研究中遇到的各种问题。我期待书中能够涵盖各种常用的分子生物学技术,并且对每一种技术都进行详尽的阐述。例如,从最基础的DNA提取和RNA提取,到各种PCR技术(如RT-PCR、qPCR),再到蛋白质印迹(Western Blot)、ELISA等,我都希望能在书中找到详细的介绍。我尤其对书中关于基因组DNA和质粒DNA的提取和纯化方法的说明抱有很高的期望。高质量的核酸是进行后续实验的基础,书中如果能提供多种提取方法的原理、操作步骤和注意事项,并对其优缺点进行分析,那将是非常实用的。我还注意到,书中可能会涉及一些关于基因组学和蛋白质组学研究中常用的技术,比如DNA测序、质谱分析等。这些技术与分子克隆紧密相关,它们共同构成了我们认识生命分子世界的完整框架。这本书,我期待它能够成为我手中那份不可或缺的“工具箱”,让我能够更自信、更高效地进行分子生物学研究。
评分当我拿到《Molecular Cloning》这本书的时候,我的第一反应是它沉甸甸的重量,仿佛里面承载了无数的科学智慧。我一直认为,分子生物学领域最令人着迷的地方,就在于那些看不见的分子是如何精妙地相互作用,从而构建起生命这个宏大的系统。这本书,我期待它能够带领我深入到这个微观的世界。我尤其好奇书中对DNA复制和修复机制的讲解。这些过程是生命得以延续的基础,而分子克隆技术,正是建立在对这些自然过程的深刻理解之上。书中是否会详细阐述DNA聚合酶的工作原理,以及核酸酶在DNA修复中的作用?我同样对书中关于RNA的合成和翻译过程的介绍抱有很大的期望。基因的表达最终体现在蛋白质的合成上,而分子克隆技术,往往是为了实现特定基因的表达。书中如果能深入讲解转录和翻译的调控机制,以及如何利用分子克隆技术来影响这些过程,那将是非常有价值的学习。我还注意到,书中可能会涉及一些关于基因组学和转录组学的基础知识,这些领域与分子克隆息息相关,它们共同构成了我们理解生命信息流动的完整图景。这本书,对我来说,不仅仅是学习一种技术,更是理解生命本身运作方式的一次深度探索。
评分坦白说,在阅读《Molecular Cloning》之前,我对分子克隆的理解还停留在比较表面的概念层面。我知道它涉及到DNA的剪切、连接和复制,但具体的操作细节和背后的科学原理,我一直是模糊不清的。这本书的出现,彻底改变了我的认知。它以一种极其系统和逻辑的方式,将分子克隆的各个环节娓娓道来。我尤其欣赏书中对实验原理的深入讲解。它不是简单地告诉你“怎么做”,而是告诉你“为什么这样做”。例如,在介绍PCR(聚合酶链式反应)时,书中不仅详细描述了各个循环的温度和时间设置,还深入剖析了DNA聚合酶的活性、引物的退火机制,以及dNTPs在DNA链合成中的作用。这种基于原理的讲解,让我能够真正理解每一个步骤的重要性,并能够在遇到问题时,根据原理进行分析和排查。此外,书中对各种分子生物学工具的介绍也让我受益匪浅。无论是各种类型的载体(质粒、噬粒、病毒载体等),还是各种标记技术(荧光标记、放射性同位素标记等),书中都进行了详细的阐述,并分析了它们在不同实验中的应用。我还注意到,书中对实验数据的分析和解读也有专门的章节,这对于将实验结果转化为有意义的科学结论至关重要。我甚至可以想象,书中会列出许多常见的实验陷阱和注意事项,帮助初学者避免走弯路。这本书,无疑是我在分子生物学领域求学道路上的一盏明灯,它点亮了我对复杂技术的理解,让我能够更加自信地投入到实际的实验操作中。
评分《Molecular Cloning》这本书,对我来说,更像是一份“地图”,指引着我在浩瀚的分子生物学海洋中航行。我深知,要在这个领域取得进展,扎实的基础知识和熟练的技术操作是必不可少的。我期待这本书能够提供一套详尽的操作指南,覆盖分子克隆的每一个关键步骤。例如,从如何准备无菌的实验环境,到如何精确地称量试剂,再到如何进行高效的离心和孵育,每一个细节都至关重要。书中是否会提供详细的实验流程,并配以清晰的图示,让我能够清晰地理解每一步的操作?我同样对书中关于各种常用实验仪器的使用和维护的介绍抱有浓厚的兴趣。一个好的实验,离不开精密的仪器。书中如果能对PCR仪、电泳仪、离心机等常用仪器的工作原理、使用方法和注意事项进行详细的说明,那将是极大的福音。我还注意到,书中可能会包含一些关于实验数据的记录和分析的方法,这对于科学研究的严谨性至关重要。一本好的技术书籍,应该能够让读者在掌握基本操作的同时,也培养出严谨细致的科学态度。这本书,我期待它能够成为我手中那份不可或缺的“航海图”。
评分我选择《Molecular Cloning》这本书,很大程度上是出于对前沿科学技术的渴求。在当今生物技术飞速发展的时代,分子克隆作为一项基础且核心的技术,其重要性不言而喻。这本书的标题本身就带着一种“开创性”的意味,仿佛暗示着它将带领读者进入分子世界的最前沿。我非常期待书中能够提供最新的分子克隆技术和策略。例如,随着基因编辑技术(如CRISPR-Cas9)的兴起,如何将其与传统的分子克隆技术相结合,实现更精准、更高效的基因改造,是我非常感兴趣的一个方面。书中是否会提供相关的技术指南和实验案例?我同样对书中关于基因表达调控和蛋白质工程方面的论述抱有很高的期望。分子克隆的最终目的往往是为了研究基因的功能,或者改造蛋白质的性质。因此,书中如果能深入探讨如何设计和构建能够高效表达目标蛋白的载体,如何利用分子克隆技术进行基因敲除、基因敲入,以及如何通过蛋白质工程来改变蛋白质的活性和功能,那将是一次令人兴奋的学习体验。我甚至设想,书中可能会包含一些关于合成生物学的基础知识,以及如何利用分子克隆技术来构建人工生命系统。这本书,对我来说,不仅仅是一本技术手册,更是一扇通往未来生物技术世界的大门,我渴望通过它,窥见科学的无限可能。
评分我选择《Molecular Cloning》这本书,是希望它能够帮助我理解那些在文献中频繁出现的、看似高深的分子生物学概念。我经常在阅读科研论文时遇到诸如“插入突变”、“同源重组”、“表达载体”等术语,但对其背后的具体原理和实现方法却知之甚少。这本书,我期待它能够为我揭开这些概念的神秘面纱。我尤其对书中对不同类型载体的详细介绍感到好奇。我知道载体在分子克隆中扮演着至关重要的角色,它们是将外源DNA导入宿主细胞的关键。书中是否会深入讲解各种载体的结构组成,以及它们在选择性标记、复制能力和插入片段大小等方面的差异?我同样对书中关于基因转化和筛选方法的阐述抱有很大的期望。将构建好的重组DNA导入宿主细胞并筛选出阳性克隆,是分子克隆实验的必经之路。书中如果能详细介绍电转化、化学转化、病毒转导等方法,并对各种筛选标记(如抗生素抗性基因、荧光蛋白等)的应用进行深入讲解,那将是非常有帮助的。我还注意到,书中可能会涉及一些关于基因组编辑的原理和技术,这对于理解现代分子生物学研究的前沿动态至关重要。这本书,我期待它能够成为我理解科学文献、掌握前沿技术的“钥匙”。
评分《Molecular Cloning》这本书,在我看来,不仅仅是关于“技术”的,更是关于“思想”的。它所蕴含的,是一种严谨的科学思维方式,以及一种对分子世界精巧设计的敬畏。我尤其欣赏书中对实验设计的逻辑性分析。它不仅仅是告诉我们如何一步步操作,而是引导我们思考“为什么”要这样操作,以及不同的操作选项可能会带来的不同结果。例如,在设计一个基因克隆实验时,我们需要考虑选择什么样的限制性内切酶,使用什么样的载体,以及如何设计引物来实现PCR扩增。书中是否会提供一套系统的思维框架,帮助我们进行这些关键的决策?我同样对书中对实验结果的解读和验证方法有着浓厚的兴趣。在分子克隆实验中,我们常常需要通过多种方法来确认我们得到的DNA片段是否正确,以及目标蛋白是否被成功表达。书中如果能详细介绍各种验证技术,比如核酸序列测定、Southern Blot、Western Blot等,并对其原理和应用进行深入讲解,那将是极大的帮助。我还注意到,书中可能会包含一些关于实验失败的案例分析,以及如何从失败中学习和改进的经验。这种“反思性”的学习,对于成长为一名优秀的科研人员至关重要。这本书,让我看到了科学研究的严谨性、创新性和实用性,它不仅仅传授技术,更塑造一种科学素养。
评分这本《Molecular Cloning》给我最直观的感受,就是它所呈现的知识的深度和广度。当我翻开第一页,我就被书中密集而又清晰的图表和文字所吸引。它不仅仅是一本技术手册,更像是一部关于分子生物学技术发展的编年史。从最初的DNA片段分离技术,到如今越来越精细的基因编辑手段,这本书几乎囊括了分子克隆领域的所有重要里程碑。我尤其对其中关于DNA提取和纯化章节的详尽描述感到惊讶。要知道,高质量的DNA是所有下游实验的基础,书中对各种提取方法的原理、优缺点以及适用范围都进行了深入剖析,从传统的酚-氯仿抽提法,到如今高效的柱式纯化技术,每一个细节都力求做到最精确。我还注意到,书中对不同种类的酶,尤其是限制性内切酶和DNA连接酶,进行了非常详尽的介绍。这不仅仅是列出它们的名称和作用,而是深入探讨了它们的催化机制、底物特异性,以及如何根据实验需求来选择最合适的酶。我甚至能想象到,书中会对各种缓冲液的配制、pH值的影响,以及温度对酶活性的调控进行详细的说明,这些看似微小的细节,往往是实验成败的关键。更让我惊喜的是,书中还对各种基因克隆的策略进行了归纳和总结,比如同源重组、TA克隆、Gateway克隆等等,并分析了它们各自的适用范围和技术优势。这让我意识到,分子克隆并非只有一种方法,而是存在着多种多样的解决方案,供研究者根据具体的研究目标来选择。这本书,就像一个经验丰富的实验室导师,在我面前徐徐展开了一幅分子生物学实验的宏大画卷,让我对其精妙之处有了更深刻的认识。
评分我选择《Molecular Cloning》这本书,是希望它能够帮助我建立一个完整的分子生物学实验知识体系。我知道,在进行任何一项科学研究之前,对相关的技术和原理有一个全面的了解是至关重要的。这本书,我期待它能够提供一个清晰的框架,让我能够将零散的知识点串联起来,形成一个有机的整体。我尤其对书中对基因表达调控机制的深入讲解感到好奇。基因表达的精确调控是生命活动的根本,而分子克隆技术,正是为了研究和改造基因表达而发展起来的。书中是否会详细阐述转录因子、启动子、增强子等调控元件的作用,以及如何利用分子克隆技术来研究和操控这些元件?我同样对书中关于基因组编辑和定向进化等前沿技术的介绍抱有很高的期望。这些技术代表着分子生物学研究的最新发展方向,它们为我们提供了前所未有的研究工具。书中如果能对这些技术进行深入的介绍,并结合实际的应用案例进行说明,那将是非常有启发性的。我还注意到,书中可能会涉及一些关于生物信息学在分子克隆中的应用,比如序列比对、基因预测等。这些工具的掌握,能够极大地提升研究的效率和准确性。这本书,我期待它能够成为我构建分子生物学知识体系的“基石”。
评分这本书的封面上“Molecular Cloning”几个字,本身就带着一种神秘而又庄重的气息,仿佛是打开了基因奥秘宝藏的金钥匙。我当初选择这本书,很大程度上是被它的名字所吸引。在科研的道路上,我们总是在不断地探索未知的领域,而“分子克隆”这个词,在我看来,就是连接已知与未知的桥梁。它意味着将特定的DNA片段分离出来,在体外进行大量的复制,然后通过各种技术手段,让这些片段在新的宿主中表达出来,从而实现特定的功能。这其中的每一步,都充满了精妙的设计和严谨的操作。我尤其好奇的是,书中会如何细致地阐述这些过程。是会从最基础的酶切位点识别讲起,还是会直接切入复杂的载体构建?那些看似枯燥的步骤,在作者的笔下,又会呈现出怎样的魅力?我期待着书中能够详细介绍各种限制性内切酶的特性,了解它们在DNA双链上的精确切割机制,以及不同类型的质粒和噬粒载体是如何被设计来容纳和复制外源DNA的。更重要的是,我希望书中能够深入讲解连接反应的原理,以及如何巧妙地选择合适的DNA连接酶来确保DNA片段的稳定整合。每当我想到,通过这些技术,我们能够将一段特定的基因“克隆”出来,让它在实验室环境中“安家落户”,甚至赋予它新的生命,就觉得充满了无限的可能。这本书,或许就是我实现这些可能性的第一步。我甚至设想,它可能会包含一些经典的实验案例,通过这些案例,我能更直观地理解分子克隆的实际应用,比如基因表达调控的研究,或者基因工程药物的开发。这本书的名字,本身就是一种召唤,召唤着我深入了解分子世界的精巧设计。
评分当年实验室买了代理商的最后一套
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