实用RNAi技术

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出版者:人民卫生出版社
作者:Ute Schepers
出品人:
页数:259
译者:王俊
出版时间:2006-8
价格:37.00元
装帧:简裝本
isbn号码:9787117078337
丛书系列:
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具体描述

作为一本实验工具书,本书有以下特点:①理论性强。本书系统介绍了 RNAi的作用机制,如Dicer、RISC和RdRp在RNAi作用中的地位。②时效性强。本书呈现给广大科研人员的是RNAi领域的最新进展和参考文献。③实践性强。本书含有大量RNAi相关的实验方法,可以引导初学者入门,并帮助RNAi 研究人员熟练掌握这项技术。④指导性强。实验方案中的注意事项有助于提高实验者的工作效率。

  本书内容丰富,图文并茂。全书共分为四个部分:①RNAi:2002年的重大突破;②线虫的RNAi;③果蝇的RNAi;④哺乳动物的RNAi。在每一部分中都包含有丰富、翔实的实验方案及问题解决方案。除此之外,本书每一部分均附有相关网站的网址、参考文献和书籍;在本书的末尾还提供了试剂公司的信息。

《基因沉默的艺术:RNAi技术详解与应用》 RNA干扰(RNAi)作为一种高效、特异的基因沉默机制,已经彻底改变了我们理解和调控基因表达的方式。本书《基因沉默的艺术》将带您深入探索RNAi技术的方方面面,从其发现的科学历程,到复杂的分子机制,再到广泛的应用前景,为您提供一个全面而详实的知识体系。 第一章:RNAi的起源与发展 本章将追溯RNAi技术发现的科学足迹,介绍早期在秀丽隐杆线虫等模式生物中观察到的RNAi现象,并重点阐述Andrew Fire和Craig Mello因其开创性研究而荣获诺贝尔奖的里程碑意义。我们将详细解析RNAi从基础科学发现走向强大的生物技术工具的发展历程,以及在这个过程中涌现出的关键科学突破和技术革新。 第二章:RNAi的核心分子机制 深入理解RNAi,离不开对其核心分子机制的透彻解析。本章将详细介绍双链RNA(dsRNA)如何被 dicer酶切割成小干扰RNA(siRNA)或微小RNA(miRNA),以及siRNA/miRNA如何与RNA诱导沉默复合物(RISC)结合。我们将重点讲解RISC复合物在识别靶标mRNA,进而导致mRNA降解或抑制翻译的关键步骤。此外,还将探讨siRNA和miRNA在细胞调控中的不同角色和作用方式,以及内源性miRNA在基因调控网络中的复杂性。 第三章:siRNA的设计与递送策略 siRNA作为RNAi技术的核心效应分子,其设计和递送直接影响实验的效率和结果。本章将提供一套详尽的siRNA设计原则,包括靶标序列的选择、反义链和有义链的互补性要求、以及如何避免脱靶效应。我们将详细介绍多种siRNA递送方法,从传统的脂质体和病毒载体递送,到新兴的纳米颗粒、化学修饰以及电穿孔等技术,并分析各种方法的优缺点、适用场景和优化策略。 第四章:miRNA的调控与研究 miRNA作为内源性的基因调控因子,在细胞分化、发育、疾病发生发展等过程中扮演着至关重要的角色。本章将深入探讨miRNA的生物合成途径,包括Pri-miRNA、Pre-miRNA的生成以及miRNA的成熟过程。我们将详细解析miRNA如何结合到靶标mRNA的3’非翻译区(3’UTR),并阐述其通过抑制翻译或促进mRNA降解来调控基因表达的具体机制。此外,还将介绍研究miRNA表达谱、功能以及与疾病关联的常用技术,如RT-qPCR、高通量测序、miRNA芯片等。 第五章:RNAi在生命科学研究中的应用 RNAi技术已成为生命科学研究中不可或缺的强大工具。本章将列举并深入分析RNAi在基因功能研究中的广泛应用,包括: 基因敲低与功能获得性研究: 通过siRNA或shRNA高效敲低特定基因的表达,以研究该基因在特定生物学过程中的作用。 通路分析与药物靶点筛选: 利用RNAi技术构建基因干扰文库,对细胞信号通路进行系统性分析,识别关键的药物靶点。 疾病模型构建: 在体外细胞模型或体内动物模型中应用RNAi技术,模拟人类疾病的发生发展,为疾病机理研究和治疗策略开发提供平台。 表观遗传学研究: 探索RNAi在调节染色质结构、DNA甲基化和组蛋白修饰中的作用,揭示其在表观遗传调控中的潜在功能。 第六章:RNAi的临床应用与发展前景 RNAi技术在疾病治疗方面展现出巨大的潜力,并在多个领域取得突破性进展。本章将重点关注RNAi在临床应用方面的最新进展: 罕见病治疗: 介绍基于RNAi疗法治疗遗传性疾病的成功案例,如家族性淀粉样变性(ATTR-CM)等,以及其作用机制和临床疗效。 肿瘤治疗: 探讨RNAi在抑制肿瘤生长、转移和耐药性方面的应用,包括靶向关键癌基因、诱导肿瘤细胞凋亡等策略。 病毒感染性疾病: 分析RNAi在抑制病毒复制、阻断病毒感染等方面的作用,如针对HIV、HBV等病毒的RNAi疗法。 其他疾病领域: 展望RNAi在心血管疾病、神经退行性疾病、代谢性疾病等领域的应用潜力,以及正在进行的临床试验和未来研究方向。 第七章:RNAi技术的挑战与未来展望 尽管RNAi技术取得了显著的进步,但在其广泛应用过程中仍面临一些挑战。本章将深入探讨这些挑战,包括: 递送效率与特异性: 如何提高siRNA/shRNA的体内递送效率,并确保其靶向特定细胞和组织,减少脱靶效应。 免疫原性: 解决外源性RNA分子可能引起的免疫反应,确保治疗的安全性和有效性。 稳定性和体内半衰期: 提高RNA分子的体内稳定性和半衰期,延长其作用时间。 成本与可及性: 探索降低RNAi疗法生产成本、提高其可及性的途径。 最后,本章将对RNAi技术的未来发展趋势进行展望,包括新型RNAi分子的设计、多功能载体的开发、以及与基因编辑、CRISPR等技术的整合,描绘RNAi技术在精准医疗和生物技术领域更广阔的应用前景。 本书旨在为生命科学研究人员、临床医生以及对基因调控技术感兴趣的读者提供一份详实、权威的指导。通过学习本书,您将能够更深刻地理解RNAi技术的原理,掌握其在研究和治疗中的应用方法,并对这一前沿技术的发展趋势有更清晰的认识。

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目录信息

读后感

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用户评价

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当我第一次接触到《实用RNAi技术》这本书时,我正在为一项关于植物抗病基因沉默的研究项目寻找可靠的指导。我原本以为会看到很多晦涩难懂的理论,但令我欣喜的是,这本书以一种非常易于理解的方式,将RNAi技术的核心原理和实践操作娓娓道来。作者并没有一开始就深究复杂的分子生物学细节,而是从一个宏观的视角,将RNAi描述成一种“自然界中的基因调控武器”,这种形象的比喻立刻吸引了我的注意力。我特别喜欢书中关于RNAi在植物研究中的应用章节,它详细介绍了如何利用RNAi技术来沉默植物体内特定的基因,从而研究其功能,或者增强植物的抗逆性。 书中对于植物RNAi实验的每一个步骤都进行了细致的讲解,从RNAi载体的构建、转化方法的选择,到沉默效率的评估和结果的分析,都提供了非常详细的指导。我印象最深刻的是,作者提供了一个关于如何优化载体设计以提高沉默效率的案例研究,这对我正在进行的实验非常有启发。书中还介绍了多种常用的RNAi工具和平台,以及在植物基因沉默研究中可能遇到的常见问题和相应的解决方案。这本书的优点在于,它不仅提供了理论知识,更侧重于实际操作的指导,让我感觉自己仿佛有一个经验丰富的导师在旁边手把手教学。我计划将书中介绍的一些高效载体构建方法和基因沉默分析策略应用到我的研究中,相信能够大大提高我的实验成功率。

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我是一名对生物信息学和基因调控感兴趣的学生,在学习过程中,RNAi技术一直是我想深入了解的部分。直到我遇到《实用RNAi技术》这本书,我才真正感觉自己抓住了这项技术的“脉搏”。这本书的独特之处在于,它将理论知识、实验操作和数据分析这三个关键环节有机地结合起来,形成了一个完整的学习闭环。作者在介绍RNAi原理的同时,并没有忽略实际操作中的细节。我尤其欣赏书中关于siRNA设计和验证的部分,它详细讲解了如何利用在线工具和数据库来筛选高特异性的siRNA序列,以及如何通过实验验证siRNA的沉默效率和脱靶效应。 书中还深入探讨了RNAi技术在基因功能分析中的应用,通过大量的案例,展示了如何利用RNAi来“敲低”特定基因的表达,从而揭示其在细胞生理、发育过程以及疾病模型中的作用。我特别喜欢书中关于如何解读RNAi实验结果的章节,它列举了多种数据分析方法,并提供了相应的可视化工具推荐,这对我进行后续的数据分析工作非常有帮助。这本书的优点在于,它能够将看似枯燥的生物信息学分析过程变得生动有趣,并且能够指导读者如何从海量的数据中提取有价值的信息。我计划将书中介绍的siRNA设计策略和数据分析流程应用到我即将开始的基因功能挖掘项目中,相信能够为我的研究打下坚实的基础。

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我一直对基因治疗和药物研发领域充满浓厚的兴趣,尤其关注那些能够直接靶向疾病相关基因的新型疗法。在一次偶然的机会下,我读到了《实用RNAi技术》这本书,它让我对RNAi技术在药物研发中的巨大潜力有了全新的认识。这本书并非一本晦涩难懂的专业论文集,而是以一种非常生动和易于理解的方式,将RNAi技术的核心原理、药物开发策略以及在临床应用中的挑战与机遇进行了深入的阐述。我最喜欢的是,书中详细介绍了如何利用RNAi技术来开发新型药物,例如如何设计siRNA来靶向病毒基因,如何利用RNAi来调控免疫反应,以及如何克服siRNA在体内的递送和稳定性问题。 书中还通过大量的临床前和早期临床试验案例,展示了RNAi药物在治疗艾滋病、乙型肝炎以及遗传性疾病等领域的应用前景。我尤其关注了书中关于RNAi药物递送系统的开发,作者详细分析了各种递送方式的优缺点,例如脂质体、纳米颗粒和病毒载体等,并提供了一些成功的案例和未来的发展方向。这本书的亮点在于,它能够将前沿的RNAi药物研发理念转化为读者易于理解的语言,并且能够提供关于RNAi药物开发和临床转化的详细指导。我计划将书中介绍的siRNA药物递送策略和安全性评估方法应用到我的药物研发项目中,希望能够为开发更安全有效的RNAi药物贡献一份力量。

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在我的研究工作中,我常常需要对特定基因的功能进行深入探究。传统的方法往往耗时耗力,而且效果不尽如人意。偶然间,我接触到了《实用RNAi技术》这本书,它为我打开了基因沉默研究的新篇章。这本书不仅仅是关于RNAi技术的介绍,更像是一本“探索基因功能的工具箱”。作者用一种非常清晰和条理分明的方式,将RNAi技术的核心原理、实验设计以及结果解读等关键环节进行了详细的阐述。我最喜欢的是,书中深入探讨了RNAi技术在功能基因组学研究中的应用,通过大量的案例,展示了如何利用RNAi来快速、高效地筛选和验证与特定生物学过程相关的基因。 书中还详细介绍了如何利用RNAi技术来构建基因敲低细胞系,以及如何将RNAi技术与高通量筛选技术相结合,以实现大规模的基因功能研究。我尤其关注了书中关于如何设计和优化RNAi实验以获得可靠结果的部分,作者提供了多种策略,并且通过具体的例子说明了如何避免常见的实验误差,提高结果的准确性。这本书的优点在于,它能够将看似复杂的基因功能研究过程变得系统化和流程化,并且能够指导读者如何从实验设计到结果分析,全面地掌握RNAi技术在功能基因组学研究中的应用。我计划将书中介绍的高通量RNAi筛选策略应用到我的研究项目中,希望能够快速发现新的基因调控网络。

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我最近一直在研究细胞凋亡的调控机制,想要找到能够抑制癌细胞生长的靶点。之前尝试过很多方法,但效果都不尽如人意。偶然间看到了《实用RNAi技术》这本书,抱着试一试的心态翻开,结果却意外地惊喜。这本书不仅详细介绍了RNAi的基本原理,还深入探讨了它在疾病研究中的具体应用。作者用丰富的案例,展示了如何利用RNAi技术来靶向特定基因,从而深入探究其在疾病发生发展中的作用。我特别关注了书中关于肿瘤研究的部分,作者详细阐述了如何设计siRNA来沉默与肿瘤生长、转移相关的关键基因,并提供了相关的实验数据和分析方法。 让我印象深刻的是,书中对于不同疾病模型下RNAi应用的讨论非常透彻,例如在心血管疾病、神经退行性疾病以及传染病等领域,都给出了具体的案例和技术指导。作者并没有回避RNAi技术在临床应用中面临的挑战,比如递送效率、脱靶效应等问题,而是深入分析了当前的研究进展和潜在的解决方案。这本书的亮点在于,它能够将前沿的科学研究与实际的实验操作紧密结合,让读者在学习理论知识的同时,也能掌握实用的实验技能。我计划将书中的一些思路应用到我的实验中,特别是关于siRNA在肿瘤微环境中的靶向递送策略,相信能够为我的研究带来新的突破。

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最近我迷上了研究基因编辑技术,尤其是CRISPR-Cas9系统。但一直以来,RNAi技术对我来说都像是一个神秘而遥远的领域。当我拿到《实用RNAi技术》这本书时,我带着一种“学习新知识”的心态去阅读,但这本书却远远超出了我的预期。它不仅仅是关于RNAi的介绍,更像是一本“通往基因沉默世界的指南”。作者非常巧妙地将RNAi技术的发展历程、核心原理以及在各种研究领域的应用巧妙地融合在一起。我最喜欢的是,书中不仅仅是罗列技术,而是深入分析了不同RNAi策略的优缺点,以及它们在特定研究场景下的适用性。 例如,书中对比了shRNA、siRNA和miRNA等不同RNAi工具的设计思路和应用场景,并且详细分析了它们在细胞系、动物模型以及临床前研究中的不同表现。我尤其关注了书中关于RNAi在神经科学研究中的应用部分,作者通过多个实际案例,展示了如何利用RNAi技术来探究神经递质的合成、受体的功能以及神经信号的传递机制。书中对于如何设计和验证靶向特定神经元亚群的RNAi递送系统,也提供了非常详细的指导。这本书的亮点在于,它能够将复杂的理论知识转化为清晰易懂的文字和图表,并且能够引导读者思考,激发他们对RNAi技术的进一步探索。我打算将书中介绍的shRNA稳定表达系统的构建方法应用到我的长期基因沉默研究中,相信能够带来一些令人兴奋的发现。

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最近我一直在关注癌症治疗的新进展,尤其对能够靶向癌细胞基因的新型疗法很感兴趣。在翻阅文献时,我偶然发现了《实用RNAi技术》这本书,它立刻吸引了我。这本书并非一本枯燥的学术专著,而更像是一本“揭秘RNAi疗法”的实践指南。作者用一种非常生动和易于理解的方式,将RNAi技术的核心概念和在癌症治疗中的应用进行了详细的阐述。我最喜欢的是,书中不仅仅停留在理论层面,而是深入探讨了RNAi在癌症治疗中的具体策略,例如如何设计siRNA来靶向致癌基因,如何利用病毒载体或纳米颗粒将siRNA递送到癌细胞中,以及如何克服递送效率和脱靶效应等难题。 书中还通过大量的临床前和早期临床试验案例,展示了RNAi技术在治疗不同类型癌症中的潜力,例如肝癌、肺癌和白血病等。我尤其关注了书中关于RNAi在耐药性癌症治疗中的应用,作者详细分析了如何利用RNAi来克服癌细胞对化疗药物的耐药性,从而提高治疗效果。这本书的亮点在于,它能够将前沿的科学研究转化为读者易于理解的语言,并且能够提供关于RNAi疗法开发和应用的详细指导。我计划将书中介绍的纳米颗粒递送系统和siRNA设计策略应用到我的研究中,希望能够为开发更有效的癌症治疗方法贡献一份力量。

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我是一名初学者,对分子生物学领域中的各种技术都充满好奇,尤其是那些能够直接干预基因表达的技术。在众多选择中,RNAi技术以其精准高效的特点吸引了我。《实用RNAi技术》这本书恰好满足了我对这项技术的好奇心。它以一种非常友好和易于上手的方式,将RNAi的核心原理、基本操作以及在各种研究领域的应用一一呈现。我最喜欢的是,书中不仅仅是讲解概念,而是非常详细地介绍了如何进行RNAi实验的每一步,从siRNA的合成、细胞转染,到基因沉默效率的检测,都提供了非常细致的指导。 书中还提供了大量的实验 protocol,包括常用的siRNA设计软件、转染试剂的选择、以及沉默效率的定量检测方法。我尤其关注了书中关于如何设计有效的siRNA和shRNA的部分,作者提供了多种策略,并且通过具体的例子说明了如何避免脱靶效应,提高沉默效率。这本书的优点在于,它能够将复杂的技术操作分解成易于理解的步骤,并且提供了大量的实用技巧和经验,让我感觉自己仿佛拥有了一个“万能的实验助手”。我计划将书中介绍的siRNA转染protocol和沉默效率检测方法应用到我的细胞培养实验中,相信能够为我快速掌握RNAi技术打下坚实的基础。

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我对细胞信号通路的研究一直很感兴趣,但有时候想要探究某个特定信号通路中某个关键基因的功能,却感觉无从下手。《实用RNAi技术》这本书正好弥补了我的知识盲区。它以一种非常结构化和系统化的方式,将RNAi技术的核心原理、实验设计以及在细胞信号通路研究中的应用进行了全面的介绍。我最喜欢的是,书中不仅仅是讲解概念,而是非常详细地介绍了如何利用RNAi技术来探究细胞信号通路中的关键分子,例如如何设计siRNA来敲低某个蛋白的表达,如何观察其对下游信号的影响,以及如何通过实验验证其在信号通路中的作用。 书中还提供了大量的实验 protocol,包括常用的siRNA设计软件、细胞培养和转染方法,以及信号通路检测的常用方法,例如Western Blot、qPCR和ELISA等。我尤其关注了书中关于如何设计和优化RNAi实验以获得可靠结果的部分,作者提供了多种策略,并且通过具体的例子说明了如何避免脱靶效应,提高沉默效率。这本书的优点在于,它能够将复杂的信号通路研究过程变得条理清晰,并且能够指导读者如何从实验设计到结果分析,全面地掌握RNAi技术在细胞信号通路研究中的应用。我计划将书中介绍的siRNA敲低实验方法和信号通路检测技术应用到我的研究项目中,希望能够深入揭示我所研究的信号通路的调控机制。

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这本《实用RNAi技术》真是让我大开眼界!我一直对基因沉默的技术充满好奇,但总觉得它遥不可及,充满了复杂的理论和难以捉摸的实验步骤。拿到这本书,我原本是抱着一种“姑且看看”的心态,没想到它瞬间就击碎了我所有的顾虑。作者没有一开始就丢给我一堆枯燥的分子生物学名词,而是从RNAi最基本的概念讲起,用非常形象的比喻和生动的插图,把一个看似抽象的概念变得触手可及。比如,把RNAi比作细胞内的一个“剪刀手”,专门负责“剪断”那些不该存在的RNA,从而实现基因的沉默,这个类比简直太绝了!它让我瞬间理解了RNAi的核心机制,而不是死记硬背那些拗口的术语。 接着,书的重点就落到了“实用”二字上。我尤其喜欢它在实验设计部分花费的大量篇幅。它详细介绍了如何选择合适的siRNA序列,如何设计实验对照,以及可能遇到的各种技术难点和解决方案。我记得有一节讲到siRNA的脱靶效应,作者列举了好几种避免或减少脱靶效应的策略,并且提供了具体的实验案例,让我学到了很多在课堂上和文献中都很难找到的“干货”。书中还提供了许多实用的工具和软件推荐,以及如何解读实验结果的指导,这些都是我进行RNAi实验时非常宝贵的参考。我觉得这本书不仅仅是教你“怎么做”,更是教你“为什么这么做”以及“这样做有什么风险和应对方法”,这种循序渐进、深入浅出的讲解方式,对于我这样想要真正掌握这项技术的读者来说,简直是福音。

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