Essentials of Nucleic Acid Analysis pdf epub mobi txt 电子书下载 2026

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出版者:

作者:Keer, Jacquie T. (EDT)/ Birch, Lyndsey (EDT)

出品人:

页数:272

译者:

出版时间:2008-2

价格:$ 240.69

装帧:

isbn号码:9780854043675

丛书系列:

图书标签:

核酸分析
分子生物学
生物化学
DNA
RNA
基因组学
生物技术
实验室技术
生命科学
核酸化学

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具体描述

Over the last decade there has been a rapid development of molecular techniques, with an increasing range of instrumentation now available. The development of accompanying reference literature has not kept pace with technological advances and this poses significant challenges to the analyst. Essentials of Nucleic Acid Analysis sets out to guide the analyst through the steps needed to obtain good quality results in DNA analysis. The underlying principles for achieving this goal were formulated by LGC (formerly the Laboratory of the Government Chemist) as the six principles for ensuring valid analytical measurement, which are detailed in the introduction. The reader is also provided with guidelines for method validation and quality control of established and emerging DNA measurement techniques. The authors of each chapter are practitioners of the art of DNA analysis in areas where the quality of the result is critical. Technical details and examples of application of key techniques in nucleic acid analysis are provided while highlighting best practice, available standards and practical advice on improving measurement quality. This book provides an indispensable handbook and premier reference for those working in the widely varying areas and specifically in the fields of food analysis and forensic applications.

好的，这是一本关于核酸分析的图书简介，内容详尽，旨在为读者提供深入而全面的基础知识和技术指导。 --- 书名：现代分子生物学技术：从基础理论到前沿应用书籍简介《现代分子生物学技术：从基础理论到前沿应用》是一本全面、深入、且极具实践指导意义的教材与参考手册。本书旨在为分子生物学、生物化学、生物技术、医学检验以及生命科学相关专业的研究人员、高级本科生和研究生提供一个系统学习和掌握当代分子生物学核心技术的框架。我们深知，精准的实验技术是推动生命科学研究和临床转化的基石，因此，本书力求在理论阐述与实际操作之间搭建坚实的桥梁。本书结构严谨，内容涵盖了分子生物学领域最为关键和前沿的几大技术板块，从核酸的提取与纯化，到基因的检测与定量，再到蛋白质的分析与相互作用研究，为读者描绘了一幅完整的分子生物学实验图景。第一部分：分子生物学实验的基石——核酸的获取与分析本部分重点聚焦于生命科学研究中最基础也最关键的步骤：核酸的提取、纯化与初步分析。核酸提取与纯化：我们详细探讨了从不同来源（血液、组织、植物、微生物）高效、高质量提取DNA和RNA的方法。内容涵盖了传统的酚氯仿萃取法、硅胶柱吸附法、磁珠法等。特别关注了确保高纯度和高完整性的关键技术点，包括RNase污染的预防、组织匀浆的优化以及大规模样本处理的策略。凝胶电泳技术：无论是DNA还是RNA的初步鉴定，琼脂糖凝胶电泳都是不可或缺的工具。本书深入解析了电泳的原理，包括不同琼脂糖浓度的选择、缓冲液的配制、分子量标准的校准，以及如何通过电泳图谱评估核酸的完整性和降解程度。我们还探讨了高分辨率的聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）在分析小片段核酸和寡核苷酸时的应用。核酸定量与纯度评估：准确的起始材料量决定了后续实验的成功率。本书详尽介绍了分光光度法（如NanoDrop的应用及局限性）、荧光染料法（如Qubit系统）在DNA/RNA定量中的精确操作，并对核酸的纯度指标（A260/A280, A260/A230）进行了深入的解读和问题排查。第二部分：基因的放大与检测——聚合酶链式反应（PCR）的精深应用 PCR技术是现代分子生物学的核心引擎。本部分将PCR的理论、实践及其衍生技术进行了全方位的剖析。基础PCR与热循环原理：详细解释了DNA聚合酶的特性、引物设计的原则（退火温度计算、二聚体预防）、dNTP的选择以及反应体系的优化。重点阐述了热循环仪的工作机制及其对扩增效率的影响。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）：作为基因表达分析的金标准，本书详细介绍了SYBR Green法和TaqMan探针法的原理、操作流程和数据分析方法。内容涵盖了Ct值的确定、标准曲线的建立、内参基因的选择与验证，以及绝对定量与相对定量的计算模型（如$DeltaDelta Ct$法）。高级PCR技术：探讨了多种重要的PCR衍生技术，包括反转录PCR（RT-PCR）用于RNA分析、高保真PCR（High-Fidelity PCR）用于克隆，以及多重PCR（Multiplex PCR）用于同时检测多个靶点。第三部分：核酸序列的解析与修饰研究理解核酸序列是生命科学研究的终极目标之一。本部分着眼于序列测定和分子克隆技术。 DNA测序技术概述：简要回顾了Sanger测序的经典原理，并重点介绍了新一代测序技术（NGS）的基本流程，包括文库制备、簇生成和高通量数据解读的基本概念。分子克隆与重组DNA技术：详细阐述了限制性内切酶的选择与酶切反应的优化、DNA的连接（Ligation）技术，以及将目标片段插入载体的策略。同时，本书对大肠杆菌转化、酵母菌转化等常用的宿主系统进行了操作指南。分子杂交技术：深入解析了Southern Blotting（用于DNA检测）和Northern Blotting（用于RNA检测）的原理、探针的标记与检测方法，以及这些经典技术在基因组分析中的地位。第四部分：从核酸到蛋白质——中间环节的分析本部分将视野拓展到从基因表达的产物——蛋白质的分析，强调核酸研究与蛋白质研究的整合。蛋白质的提取与分离：涵盖了细胞裂解液的制备、组织匀浆优化，以及SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳）的详细操作，包括胶的制备、上样与电泳分离。蛋白质的检测与鉴定：详细介绍了Western Blotting（免疫印迹）的完整流程，包括转膜技术、一抗/二抗的选择与优化、显色方法（化学发光与酶促显色），以及信号的定量分析。蛋白质相互作用研究基础：初步介绍了酵母双杂交（Y2H）等用于研究分子间相互作用的基础技术原理。本书特色与读者受益 1. 注重实验操作细节：每项技术都配有详尽的“关键点提示”和“常见问题及故障排除”章节，帮助实验人员规避常见错误，提高实验成功率。 2. 理论与实践紧密结合：每个技术模块均以清晰的原理图谱开篇，随后迅速过渡到实际操作流程和数据解读，确保读者不仅“知其然”，更能“知其所以然”。 3. 前沿技术视野：尽管侧重于基础和核心技术，本书也适度引入了如CRISPR/Cas9基因编辑的基础分析流程和高通量测序数据初步分析的概念，为读者面向未来研究做好准备。《现代分子生物学技术：从基础理论到前沿应用》是实验室必备的“技术宝典”，它将系统地提升读者的分子生物学实验技能，使其能够自信、高效地开展从基础研究到生物制药的各类复杂实验项目。 ---