Mycobacterium Tuberculosis Protocols

Mycobacterium Tuberculosis Protocols pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:
作者:Parish, Tanya (EDT)/ Stoker, Neil G. (EDT)
出品人:
页数:418
译者:
出版时间:2001-5
价格:$ 236.17
装帧:
isbn号码:9780896037762
丛书系列:
图书标签:
  • 结核分枝杆菌
  • 结核病
  • 细菌学
  • 分子生物学
  • 实验室技术
  • 诊断
  • 治疗
  • 研究方法
  • 微生物学
  • 免疫学
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具体描述

Leading investigators with extensive practical knowledge and experience describe their best methods for studying the tuberculosis pathogen. Packed with step-by-step instructions to ensure successful results, these methods range from basic handling techniques to the application of functional genomics. Highlights include methods for the basic safety and culture of M. tuberculosis, fractionation of the bacterium (nucleic acids, lipids, culture filtrate, and capsule), the analysis of gene expression (start site mapping, real-time PCR microarrays, and proteomics), the growth of the bacterium in macrophages and low oxygen, cytological analysis of the bacteria, and diagnostics. Highly practical and accessible, Mycobacterium tuberculosis Protocols utilizes advanced functional genomics and mutagenesis methodologies to provide both experimental and clinical investigators all the powerful techniques needed to illuminate the molecular biology of tuberculosis and its interactions with host cells, and so drive work on the wide variety of emerging therapeutic opportunities.

深入探索病毒学的奥秘:一个全面的实验手册 书籍名称: 病毒学核心技术与前沿应用 作者: 资深病毒学家团队 出版社: 科学前沿出版社 出版日期: 2024年秋季 --- 内容概述 《病毒学核心技术与前沿应用》是一部面向实验室研究人员、研究生以及生物医学专业人士的权威性、操作性极强的实验指南。本书汇集了当前病毒学研究领域最尖端、最实用的技术方法,旨在为读者提供一个从基础病毒分离培养到复杂病毒-宿主相互作用机制解析的完整技术蓝图。全书内容紧密围绕现代病毒学的关键挑战和新兴领域展开,重点强调实验设计的严谨性、操作的标准化以及数据解读的准确性。 本书摒弃了对特定病原体的深度历史回顾或临床流行病学分析,而是将焦点完全置于实验室内如何成功、高效地研究病毒这一核心目标上。它详细阐述了病毒学研究中不可或缺的分子生物学、细胞生物学、免疫学以及生物信息学交叉技术的应用。 章节结构与核心内容详解 本书共分为六大部分,覆盖了病毒学研究的各个关键环节: 第一部分:病毒分离、培养与鉴定(基础构建) 本部分是所有病毒学研究的基石。它详尽地介绍了从临床样本、环境样本或动物组织中成功分离和富集病毒颗粒的优化流程。 样本预处理与无菌操作规范: 强调了在处理潜在高致病性病毒时的生物安全等级(BSL-2至BSL-4)操作规程,包括气溶胶控制和表面去活技术。 细胞培养体系的建立与优化: 详细对比了不同宿主细胞系(如Vero、HEp-2、MDCK及原代细胞)的选择标准、培养基配方优化(如血清替代品的应用)以及快速传代技巧。特别关注了如何培养对特定细胞系有高亲和力的难驯化(fastidious)病毒。 病毒滴定与定量: 提供了包括标准半数组织培养感染剂量(TCID50)、斑点形成单位(PFU)测定在内的多种定量方法的标准操作程序(SOPs),并对不同方法的准确性、耗时和成本进行了深入的比较分析。 形态学鉴定: 聚焦于透射电子显微镜(TEM)和扫描电子显微镜(SEM)在初步鉴定病毒形态和结构特征上的应用,包括负染技术的高级技巧。 第二部分:病毒基因组学与分子克隆技术(“硬核”解析) 本部分深入探讨了病毒遗传物质的提取、测序、分析及功能重构。 核酸提取的挑战与策略: 针对不同类型的病毒(DNA/RNA,单链/双链,有无包膜),提供了差异化的核酸提取方案,重点解决低病毒载量样本中的提取效率问题。 下一代测序(NGS)在病毒学中的应用: 详细介绍了宏基因组测序(mNGS)的工作流程,用于未知病毒的发现和变异株的快速鉴定。内容包括文库制备、生物信息学数据预处理(去除宿主序列污染)和从头组装策略。 病毒基因组的逆转录克隆与修饰: 提供了构建完整基因组cDNA文库的详细步骤,以及使用CRISPR/Cas系统对病毒基因组进行定点编辑的技术,用于研究基因功能或构建遗传缺失株。 实时荧光定量PCR(qPCR/RT-qPCR)的验证与标准曲线建立: 强调了如何设计高特异性的引物探针,以及在不同病毒载量区间内确保定量结果的线性关系和可重复性。 第三部分:蛋白质组学与病毒结构生物学工具 本部分关注病毒蛋白的表达、纯化和三维结构解析技术。 重组病毒蛋白的表达系统选择: 比较了真核细胞(如杆状病毒表达系统)、原核细胞(大肠杆菌)和酵母系统在生产具有正确翻译后修饰(PTM)的病毒抗原上的优劣。 亲和层析与离子交换层析: 提供了从细胞裂解液中纯化高纯度、高活性的膜蛋白或包膜糖蛋白的梯度洗脱和去污剂选择策略。 冷冻电镜(Cryo-EM)数据采集与处理流程: 概述了病毒颗粒低温冷冻、图像采集的关键参数设置,以及用于三维重建的入门级软件操作指南。 病毒-宿主相互作用的蛋白质组学分析: 详细介绍了免疫共沉淀(Co-IP)与质谱联用(IP-MS)技术,用于鉴定病毒蛋白与宿主因子形成的蛋白复合体。 第四部分:病毒与细胞信号转导研究 本部分聚焦于病毒如何操纵宿主细胞通路以促进自身复制和逃避免疫监视。 报告基因载体构建与功能分析: 如何利用荧光素酶或报告基因驱动的重组病毒,实时监测病毒启动子活性和转录调控过程。 免疫荧光和共聚焦显微镜技术: 详细指导如何优化多重免疫荧光染色,以准确解析病毒蛋白在细胞内的定位(如核内包涵体、内质网相关聚集)以及病毒与特定细胞器的相互作用。 高通量筛选技术: 介绍了使用siRNA/shRNA文库筛选宿主因子(Host Factors)的方法,以发现新的抗病毒靶点,并讨论了筛选结果的验证策略。 凋亡与自噬通路的分子探针应用: 针对病毒感染后激活或抑制的细胞死亡通路,推荐了最灵敏的Western Blot和流式细胞术分析方案。 第五部分:功能性动物模型与体内研究(非临床侧重) 本部分提供了在生物学模型中研究病毒致病性(Pathogenesis)和疫苗保护潜力的实验方法,完全侧重于动物实验的操作规范和数据收集。 小鼠模型的建立与替代: 详述了人源化小鼠模型(如NSG系)的维护,以及使用转基因小鼠研究特定病毒的潜力。 病毒接种的技术: 详细描述了静脉、气管内、腹腔和皮下注射的标准化操作,以及不同接种途径对病毒在体内分布的影响。 体内病毒载量测定与病理学观察: 提供了器官匀浆后进行病毒学滴定(如qPCR或组织病理学评分)的最佳实践。 保护性免疫评估: 聚焦于体液免疫(ELISA测定中和抗体效价)和细胞免疫(体外T细胞激活与细胞因子谱分析)的标准化流程。 第六部分:生物信息学在病毒研究中的整合应用 现代病毒学研究离不开大数据分析,本部分为研究人员提供了实用的计算工具箱。 系统发育树的构建与进化分析: 介绍使用MEGA、Phylogeny.fr等工具对病毒株进行系统发育分析,追踪传播链和变异株起源。 病毒基因组注释与结构预测: 指导如何使用NCBI工具和BLAST进行初步注释,并利用AlphaFold等工具预测关键结构蛋白的三维模型。 宿主免疫反应的RNA-seq数据分析: 重点讲解如何使用DESeq2或edgeR等R包分析病毒感染前后宿主转录组差异,以识别被激活的关键信号通路。 本书的特色与优势 1. 高度的实验可操作性: 每项技术都配备了详细的“故障排除”部分,预测了实验中可能出现的常见问题及其解决方案。 2. 跨学科整合: 成功地将分子生物学、蛋白质组学和生物信息学前沿技术无缝集成到一个病毒学研究框架中。 3. 面向未来: 重点介绍了微流控芯片在病毒捕获和快速诊断中的新兴应用潜力。 本书目标读者是那些需要快速掌握前沿技术、提升实验效率和数据分析能力的病毒学领域研究人员和技术人员。它是一本实实在在的“工具书”,而非理论教科书。

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读后感

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用户评价

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我是一名刚刚进入微生物学研究领域的学生,对于Mycobacterium tuberculosis 这个名字,既熟悉又带着一丝敬畏。当我偶然翻阅到这本《Mycobacterium Tuberculosis Protocols》时,立刻被它的名字所吸引。我脑海中浮现出无数个关于如何“抓住”并“读懂”这个微小但强大的生命体的画面。我迫切地想知道,这本书是否会像一本详细的操作手册,一步步教我如何从临床样本或者环境样本中分离出Mycobacterium tuberculosis?它是否会提供关于不同培养基的选择和优化建议,以确保这些“挑剔”的细菌能够茁壮成长?我特别感兴趣的是,书中是否会介绍一些用于表征这些细菌的常用技术,比如生化鉴定方法,或者更先进的基因组学和蛋白质组学分析技术,这些都能帮助我们更深入地了解它们的生物学特性。而且,作为初学者,我对实验的每一步都充满疑问,期待这本书能提供清晰、准确、易于理解的指导,减少操作中的盲目性。我希望这本书能够成为我通往结核病研究领域的第一块坚实的基石,指引我安全、高效地进行实验。

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在我看来,一本以“Protocols”为名的科学专著,其核心价值在于其实用性和指导性。当我接触到《Mycobacterium Tuberculosis Protocols》这本书时,我的脑海中立刻勾勒出一个清晰的画面:一本包含了大量细节、步骤清晰、易于操作的实验指南。我非常期待书中能够详细阐述如何准备实验所需的各种试剂和耗材,如何进行精确的样品处理,以及在进行关键实验步骤时需要注意的细节和潜在的陷阱。例如,在进行细菌培养时,不同菌株对培养基成分和环境条件的需求可能差异很大,这本书是否会提供关于如何根据具体需求优化培养条件的指导? 再者,对于那些对实验室安全要求极高的实验,比如涉及活体结核分枝杆菌的操作,我希望书中能够提供详尽的安全操作规程,包括个人防护装备的选择、生物安全柜的使用、废弃物的处理等等,以确保实验人员的人身安全和实验室的生物安全。一本真正优秀的实验手册,应该能够让即使是经验稍显不足的研究者,也能按照书中的指引,顺利完成实验并获得可靠的结果。

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这本书的封面设计非常吸引人,一种深邃的紫色背景搭配着略带磨砂质感的白色字体,勾勒出“Mycobacterium Tuberculosis Protocols”这个标题,本身就散发着一种专业而严谨的气息。作为一名对结核病研究领域略有涉猎的读者,我被它传递出的信息所吸引——这不仅仅是一本关于方法论的书,更像是一扇通往理解这一古老而顽固的病原体微观世界的窗口。我很好奇,在这样一本聚焦于“协议”的书里,是否会详细阐述各种检测和培养Mycobacterium tuberculosis 的方法,从基础的显微镜技术到更复杂的分子生物学手段?我期待看到关于如何安全有效地分离、鉴定以及分析这些细菌的详细步骤。尤其想知道,书中是否会涵盖一些关于耐药性检测的最新技术,毕竟,耐药结核病是当前全球公共卫生领域面临的巨大挑战。同时,我也在思考,这本书在实验操作的安全性方面会给出怎样的指导,因为处理病原体,尤其是像结核分枝杆菌这样具有高传染性的微生物,安全规程至关重要。它是否会详细列出必要的防护措施,以及在处理过程中可能遇到的风险和应对方案?这些细节的呈现,将直接影响到这本书的实用价值。

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作为一名在实验室工作中摸爬滚打多年的研究员,我深知每一个可靠的实验结果都离不开精确、可重复的实验方案。当我看到《Mycobacterium Tuberculosis Protocols》这个书名时,我的第一反应是它可能包含了大量关于如何在不同研究场景下,高效、规范地处理和研究Mycobacterium tuberculosis 的方法。我非常想知道,书中是否会针对不同的研究目的,例如菌株的鉴定、耐药性的评估、致病机制的探索,或者疫苗和药物的开发,提供一套完整的、经过验证的实验流程? 我对书中关于DNA/RNA提取、PCR扩增、基因测序以及蛋白质表达和纯化等分子生物学技术在结核分枝杆菌研究中的具体应用充满好奇。此外,考虑到结核分枝杆菌的特殊性,例如其细胞壁的复杂结构,我猜测书中可能也会详细介绍一些针对性的处理方法,例如如何进行有效的细胞裂解,或者如何克服其生长缓慢的特点来优化实验周期。一本能够涵盖如此广泛技术细节的书,无疑对提高研究效率和结果的可信度有着至关重要的作用。

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从一名旁观者的角度审视,《Mycobacterium Tuberculosis Protocols》这个书名本身就给我一种沉甸甸的学术感。它不像一本轻松的科普读物,更像是为那些真正投入到结核病研究战线上的科学家和技术人员量身打造的工具书。我很好奇,这本书是否会涵盖从基础到前沿的各种研究方法,能够满足不同层次研究者的需求? 我猜想,书中可能会详细介绍一些经典的、被广泛认可的实验技术,同时也会收录一些最新的、代表性的研究方法。例如,在研究结核分枝杆菌的致病机制时,除了传统的细胞培养和动物模型,是否会包含一些关于基因编辑、CRISPR技术在结核杆菌研究中的应用? 又或者,在药物筛选和疗效评估方面,是否会介绍一些高通量筛选的方法,或者关于耐药性监测的分子流行病学技术?一本能够不断更新和迭代的研究方法汇编,对于推动结核病研究的进步无疑至关重要。我期待它能成为一本能够引领研究方向,启发新思路,并为科研人员提供强大技术支持的参考书。

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