Cloning, Gene Expression and Protein Purification

Cloning, Gene Expression and Protein Purification pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:
作者:Hardin, Charles C. (EDT)/ Harbin, Charles C. (EDT)
出品人:
页数:444
译者:
出版时间:2001-3
价格:$ 101.64
装帧:
isbn号码:9780195132946
丛书系列:
图书标签:
  • Cloning
  • Gene Expression
  • Protein Purification
  • Molecular Biology
  • Biotechnology
  • Genetic Engineering
  • Protein Science
  • Laboratory Techniques
  • Life Science
  • Biochemistry
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具体描述

The central purpose of this combination lecture/laboratory manual is to present detailed protocols for the multi-step process involved in isolating a gene, cloning and characterizing it, expressing the encoded protein, purifying the protein, and characterizing rudimentary aspects of its basic physical properties. The manual includes 20 experiments designed to train students to prepare, manipulate, and analyse plasmids, to produce fusion proteins in bacteria, and to purify these proteins based on unique chemical properties or substrate affinities. Electrophoresis, Southern and Western blotting and cominatorial techniques are emphasized. Radioisotopes, fluorophores and solvent effects on protein structure are discussed. (No radioisotopes are required.) The experiments included have been selected because of their high success rate and because they emphasize a project-oriented approach. Sufficient detail and background are provided such that the intended audience includes advanced undergraduate students, beginning graduates, and practising professionals engaged in a broad range of pursuits. Each experiment is accompanied by detailed process rationale. Where appropriate, alternate methods are also discussed. Maximizing its utility for both studetns and instructors, this unique manual precedes each lab experiment with the necessary background theory and principles, which culminate in a detailed process rationale and, ultimately, the experimental techniques themselves. While many lab manuals list background references, this innovative book combines both theory and procedure into one manageable volume. In addition to this theoretical background material, new innovations and insights are provided along with carefully selected primary source research literature.

生物学研究前沿:从分子到系统的深度探索 本书旨在为生物科学领域的研究人员、高级本科生和研究生提供一个全面、深入的指南,涵盖了当代生物学研究中几个至关重要且相互关联的领域。我们着重于解析生命系统的复杂性,从基因组的精细调控到细胞乃至整个生物体的功能整合。 第一部分:基因组学与表观遗传学:生命的蓝图与调控 1. 基因组的结构与变异: 本部分深入探讨了真核生物和原核生物基因组的组织方式。我们详细阐述了染色质结构、核小体组装,以及基因组在三维空间中的折叠模式如何影响基因功能。内容涵盖了全基因组测序技术(如二代和三代测序)的原理与应用,重点分析了结构变异(如拷贝数变异、大片段易位)对表型的影响机制。 2. 表观遗传学的核心机制: 表观遗传修饰是连接环境信息与基因表达的桥梁。本章详尽介绍了DNA甲基化(5mC、5hmC及其酶促机制)、组蛋白的翻译后修饰(乙酰化、甲基化、磷酸化等)及其对染色质可及性的调控作用。我们还探讨了非编码RNA(ncRNA),特别是长链非编码RNA(lncRNA)和微小RNA(miRNA)如何作为染色质重塑和转录调控的分子开关。 3. 转录调控的复杂网络: 基因的开启与关闭是一个高度精确的网络过程。本书详细分析了转录因子(TFs)的结合特异性、协同作用模式,以及远端调控元件(增强子、沉默子)在介导染色体环化中的作用。我们通过对转录起始位点(TSS)和核糖体分析的深入讨论,揭示了转录调控在细胞分化和疾病发生中的关键地位。 第二部分:信号转导通路:细胞间的对话与响应 4. 跨膜受体与细胞内信号级联: 细胞必须对其内外部环境的变化做出反应。本部分聚焦于膜受体的类型,包括G蛋白偶联受体(GPCRs)、酪氨酸激酶受体(RTKs)以及离子通道偶联受体。我们系统梳理了关键的信号通路,如MAPK、PI3K/AKT/mTOR轴和JAK/STAT通路,详细描述了这些通路中激酶、磷酸酶和适配蛋白如何构建信息放大的级联反应。 5. 信号整合与细胞命运决定: 单一信号分子往往不足以驱动复杂的细胞行为。本章探讨了信号交叉对话(crosstalk)的现象,即不同信号通路之间如何相互影响和整合信息,以决定最终的细胞命运(如增殖、凋亡或分化)。我们利用动态建模的视角,解释了信号振荡和开关行为在生物过程中的重要性。 6. 炎症与免疫信号转导: 免疫系统依赖于快速且精确的信号响应。本节聚焦于模式识别受体(PRRs)如Toll样受体(TLRs)激活的下游事件,包括NF-$kappa$B和IRFs的激活,以及这些通路如何调控细胞因子和趋化因子的产生,从而驱动炎症反应和适应性免疫的启动。 第三部分:细胞生物学与细胞骨架动力学 7. 细胞器功能与动态平衡: 细胞器的结构和功能是维持生命活动的基础。本书细致考察了线粒体的能量代谢、内质网(ER)的蛋白质折叠质量控制系统(UPR),以及高尔基体的膜运输和物质分选机制。我们特别关注了这些细胞器在响应代谢压力和细胞应激时的适应性重塑。 8. 细胞骨架的结构与运动: 细胞的形态、迁移和物质运输依赖于精密的细胞骨架网络。我们深入探讨了微管、微丝和中间纤维的结构特性、动态组装机制(如正负端生长),以及它们如何与马达蛋白(如驱动蛋白、肌球蛋白)协同工作,驱动细胞分裂、细胞内物质转运和肌肉收缩等过程。 9. 细胞粘附与细胞外基质(ECM): 细胞的定位和组织结构依赖于细胞间和细胞与ECM的相互作用。本章详细分析了整合素、钙粘蛋白和斑块结构蛋白(如连接蛋白)在形成稳定的细胞连接(如紧密连接、粘着连接)中的作用。我们还探讨了ECM组分(如胶原蛋白、纤连蛋白)如何通过机械信号转导影响细胞行为。 第四部分:系统生物学与大数据分析方法 10. 组学数据的整合与解析: 现代生物学产生了海量数据。本部分介绍了整合转录组、蛋白质组和代谢组数据的计算生物学方法。我们重点阐述了网络拓扑分析、模块检测算法,以及如何从高维数据中识别关键的生物学枢纽和通路。 11. 疾病模型与计算预测: 我们将理论知识应用于实际问题。本章讨论了如何利用系统生物学方法来理解复杂疾病(如癌症、神经退行性疾病)的分子基础,包括识别疾病相关的生物标志物和预测药物靶点的有效性。我们探讨了因果推断模型在解析复杂调控网络中的应用。 12. 实验设计与数据解释的严谨性: 为了确保研究结果的可靠性,本章强调了严格的实验设计原则,包括对照组的设置、样本量的合理估算以及统计学方法的恰当选择。我们提供了关于如何识别和避免实验偏差的实用建议,确保数据的可重复性和生物学意义的准确解读。 本书通过整合分子机制的深度细节与系统层面的广阔视野,致力于为读者构建一个连贯的现代生物学知识框架,为推动下一代生物医学研究提供坚实的理论与技术基础。

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读完这本《寂静的海洋深处》,我几乎感到窒息——不是因为情节的紧张,而是因为作者对海底生态系统的描绘,其详尽与诗意达到了令人难以置信的平衡。这并非一本标准的自然科普读物,而更像是一部以深海为舞台的传记文学。故事聚焦于一个孤独的海洋生物学家,她毕生致力于研究生活在马里亚纳海沟热液喷口附近的微生物群落。书中对那些奇特生物的形态、生存策略的描述,充满了科学的严谨性,但作者的笔触却带着一种近乎宗教般的虔诚。我仿佛能闻到硫磺蒸汽的味道,感受到数千米水压带来的巨大重压。最让我动容的是她对“光”的哲学思考——在完全黑暗的环境中,生命如何定义自身的存在?作者用极具画面感的语言,探讨了生命在极端逆境下的韧性与适应性,以及人类探索未知边界时所必须付出的情感代价。读完后,我对外表平静的海洋,有了一种全新的、充满敬畏的理解。

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《最后的炼金术士的遗产》是一本结构极其精巧的推理小说,但它与我们常见的探案故事截然不同。它没有警探,没有DNA比对,甚至没有明确的“受害者”。故事发生在一座被遗弃的、拥有复杂机械结构的文艺复兴时期意大利别墅中,一位神秘的炼金术士去世后留下了一系列的谜题。这些谜题不是为了隐藏罪行,而是为了筛选出他认为有资格继承他毕生研究的“钥匙”的继承人。作者巧妙地将中世纪神秘学符号、复杂的几何学原理以及音乐和声理论编织成解谜的关键线索。每解开一个谜团,读者和书中的角色一样,都会对这位炼金术士的智慧产生由衷的赞叹,但同时也会感受到一股寒意——因为他所追求的转化,似乎远超人类的道德范畴。那种阅读体验,就像是同时在解一个高难度的数独,同时又被拉入一场关于物质与精神本质的哲学辩论中,让人欲罢不能,直到最后一页才恍然大悟。

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这是一本关于二十世纪初欧洲艺术思潮的学术专著,书名极其冗长且晦涩,我几乎是在图书馆的角落里意外发现它的。它的价值绝对远超其枯燥的封面设计。作者采取了一种极其反传统的史学路径,没有采用线性叙事,而是通过分析六位主要艺术家的私人信件、未完成的草图以及被禁的日记片段,来重构彼时社会对“美”这一概念的集体焦虑。书中对“立体主义”如何从巴黎的咖啡馆地下沙龙,一步步渗透并最终颠覆了学院派美术的论证过程,逻辑链条严密到让人无法辩驳。我尤其喜欢其中关于色彩理论的章节,作者大胆地提出,某种特定色调的缺失,恰恰是那个时代弥漫的政治不安情绪的视觉投射。这本书的行文风格冷峻、精确,充满了德式哲学的思辨性,对于任何希望深入理解现代艺术是如何从对传统的背叛中诞生的读者来说,都是一份不可替代的珍藏。

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《古老城邦的秘密织工》是一部令人拍案叫绝的架空历史小说,它将中世纪的阴谋诡计与某种失落的、近乎魔法的社会工程学完美地融合在一起。故事的主线集中在艾瑟利亚这个被时间遗忘的城市,那里的社会结构并非由血统或财富决定,而是由一套复杂的、代代相传的“织图”来维系的。作者的叙事节奏把握得炉火纯青,初看时,情节似乎是缓慢而冗余的,充满了对日常仪式的繁琐描述,但当你沉浸其中后,便会意识到每一个看似无关紧要的细节——比如面包师烘烤面包的时间、水手抛锚的角度——都是为了最终揭示那个震撼人心的社会真相做下的伏笔。我尤其欣赏作者对权力腐蚀的刻画,当那些掌握“织图”的精英们开始为了私利扭曲既定的社会秩序时,整个城邦是如何在无声无息中走向崩溃的。这本书的文字密度极高,需要反复咀嚼,但那份回报是巨大的,它挑战了我们对“稳定”和“秩序”的传统认知,是一部真正需要你用心去“解码”的文学作品。

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这部宏大的科幻史诗,名为《星际漂流者》,带我进入了一个令人目眩神迷的宇宙边境。故事的核心围绕着一艘失事已久、被遗忘在遥远星系尘埃中的探测舰展开。作者以极其细腻的笔触描绘了船上最后一位幸存者,一位名叫凯拉的生物学家,她不仅要面对严酷的外星环境和垂死的飞船系统,更要解开这艘船数百年航行中所积累下的、关于文明兴衰的惊人秘密。凯拉的挣扎不再仅仅是物理上的求生,而是一场深刻的哲学探寻:在宇宙的无垠面前,人类的意义究竟何在?书中对亚空间跳跃机制的设定极其富有想象力,那些关于时间扭曲和因果错乱的描写,足以让硬核科幻迷拍案叫绝。特别是当凯拉发现船载AI已经发展出了近乎神性的自我意识,并开始以一种超乎人类理解的方式“优化”宇宙法则时,那种混合着敬畏与恐惧的复杂情感,深深地抓住了我的心。我花了整整一个周末才读完,合上书页时,感觉自己仿佛真的在某个遥远的星云中漂浮了许久,耳边似乎还残留着真空的寂静。

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