Modern Size-Exclusion Liquid Chromatography pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

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出版者:

作者:Yau, W. W./ Kirkland, Joseph J./ Bly, D. D./ Gillespie, David

出品人:

页数:494

译者:

出版时间:2009-6

价格:1239.00元

装帧:

isbn号码:9780471201724

丛书系列:

图书标签:

• VPO
• GPC
• Size Exclusion Chromatography
• SEC
• Liquid Chromatography
• Polymer Analysis
• Biomolecule Separation
• GPC
• Molecular Weight
• Chromatography Techniques
• Analytical Chemistry
• Biochemistry

探索物质世界的精密工具：色谱分析的奥秘 本书将带您踏上一段深度探索色谱分析原理、技术及其在各个科学领域应用的旅程。我们将从色谱法的基本概念出发，层层剖析其背后的物理化学机制，并系统介绍各种主流色谱技术的理论基础、仪器构造、操作要领以及数据解读方法。本书旨在为化学、生物学、药学、环境科学、食品科学等领域的科研人员、研究生以及相关技术人员提供全面而深入的指导，帮助您掌握运用色谱技术解决实际问题的能力。 第一章：色谱法的基本原理与分类 本章将为您构建对色谱法的宏观认识。我们将从“分离”这一核心概念出发，深入浅出地阐述色谱法如何利用物质在两相（固定相和流动相）之间分配系数的差异来实现复杂混合物的有效分离。我们将详细讨论色谱分离的四大驱动力：吸附、分配、离子交换和尺寸排阻，并解释它们在不同色谱模式下的作用机制。 接着，我们将对色谱法的常见分类进行系统梳理。根据固定相的状态，我们将区分液相色谱（LC）和气相色谱（GC）。在此基础上，根据流动相的性质，我们将进一步细分液相色谱，重点介绍高效液相色谱（HPLC），这是当前最为广泛应用和最具发展潜力的液相色谱技术。同时，我们也会简要提及薄层色谱（TLC）等其他液相色谱技术，阐述其特点和应用场景。 此外，本章还将探讨影响色谱分离效率的几个关键因素，包括：理论塔板数（N）、峰容量（Vs）、分离度（Rs）以及选择性因子（α）。我们将深入分析这些参数与色谱条件（如流动相组成、固定相性质、流速、温度等）之间的关系，为后续章节优化分离条件奠定理论基础。 第二章：高效液相色谱（HPLC）的核心组件与工作流程 本章将聚焦于高效液相色谱（HPLC）这一核心技术，详细解析其仪器组成、工作原理以及标准操作流程。我们将逐一介绍HPLC系统的各个关键组件： 溶剂输送系统（泵）：我们将深入探讨不同类型的HPLC泵（如恒流泵、恒压泵）的工作原理、性能指标（如脉动、流量稳定性、压力范围）以及它们对分离结果的影响。特别会强调多溶剂梯度洗脱的实现机制及其在复杂样品分离中的重要性。 进样系统：我们将介绍手动进样阀和自动进样器的工作原理、样品引入方式（如全循环进样、分流进样）以及它们在保证进样重现性和准确性方面的作用。 色谱柱：这是HPLC的核心分离单元。我们将详细讲解不同类型的色谱柱（如反相柱、正相柱、离子交换柱、尺寸排阻柱、手性柱）的填料类型（如硅胶基质、聚合物基质）、键合相化学（如C18、C8、苯基、氨基、氰基）以及它们对分离机制的选择性影响。我们还会讨论柱效、柱长、内径和颗粒尺寸等参数对分离度和分析时间的影响。 检测器：我们将系统介绍各种常用的HPLC检测器，包括： 紫外-可见吸收检测器（UV-Vis Detector）：阐述其检测原理、波长选择策略、光程长度以及对不同发色团的灵敏度。我们将重点介绍单波长检测器、可变波长检测器（VWD）和二极管阵列检测器（DAD）的特点和应用。 示差折光检测器（RI Detector）：讲解其工作原理、适用于无法进行紫外吸收检测的化合物，并讨论其对温度和流动相变化的敏感性。 荧光检测器（Fluorescence Detector）：阐述其高灵敏度、高选择性的特点，以及激发波长和发射波长的选择。 蒸发光散射检测器（ELSD）：介绍其对非挥发性、低紫外吸收化合物的普适性检测能力。 质谱联用技术（LC-MS）：我们将简要介绍LC-MS作为一种强大的联用技术，如何通过将HPLC的良好分离能力与质谱的高灵敏度和特异性相结合，实现复杂样品的定性和定量分析。 数据采集与处理系统：介绍色谱工作站的功能，包括信号采集、峰积分、定性（保留时间比对）、定量（外标法、内标法、归一化法）以及谱图分析。 本章还将详细阐述HPLC的标准工作流程，从流动相的准备、系统的平衡、样品的溶解与过滤，到色谱柱的保护、系统的维护以及数据的备份与归档，力求做到条理清晰，易于实践。 第三章：高效液相色谱（HPLC）的分离模式与方法开发 本章将深入探讨HPLC中主要的色谱模式及其在方法开发中的应用。 反相色谱（Reversed-Phase Chromatography, RPC）：这是HPLC中最常用的分离模式。我们将详细讲解其原理，即固定相是非极性（疏水性），流动相是极性（亲水性）。重点介绍C18、C8等键合相的应用，以及流动相组成（水/有机溶剂比例，如水/乙腈、水/甲醇）、pH值、添加剂（如离子对试剂）和温度对保留和选择性的影响。本节将提供大量的实际案例，指导读者如何根据化合物的极性、疏水性等性质来开发反相HPLC方法。 正相色谱（Normal-Phase Chromatography, NPC）：我们将介绍其原理，即固定相是极性（如硅胶、氧化铝），流动相是非极性。主要适用于分离极性较弱或具有特殊官能团的化合物。我们将讨论非极性流动相的组成（如正己烷/乙酸乙酯、正己烷/异丙醇）对分离的影响。 离子交换色谱（Ion-Exchange Chromatography, IEC）：我们将阐述其分离原理，即利用固定相上的离子基团和样品中离子的静电作用进行分离。重点介绍阳离子交换和阴离子交换树脂，以及流动相的pH值和盐浓度对洗脱强度的影响。本节将重点介绍其在分离氨基酸、蛋白质、核酸等带电生物分子中的应用。 尺寸排阻色谱（Size-Exclusion Chromatography, SEC）：又称凝胶过滤色谱（GFC）或凝胶渗透色谱（GPC）。我们将讲解其分离原理，即根据分子大小进行分离，大分子优先通过柱外空间，而小分子则进入固定相的孔隙中，导致分离顺序为大分子先出，小分子后出。我们将讨论不同孔径的填料如何实现对不同分子量范围的物质进行分离，并重点介绍其在聚合物分子量测定、蛋白质纯化和分离中的应用。 手性色谱（Chiral Chromatography）：对于具有立体异构体的化合物，手性色谱是实现对映异构体分离的关键技术。我们将介绍手性固定相的类型（如多糖衍生物、大环化合物）、手性识别机理以及手性流动相或添加剂的应用。 在方法开发部分，我们将系统性地介绍一套行之有效的HPLC方法开发策略。这包括：初步了解样品特性（如溶解度、极性、分子量、是否存在发色团等），选择合适的色谱模式和色谱柱，初步优化流动相组成和pH值，然后通过梯度优化、流速和温度的调整来进一步提高分离度，缩短分析时间，并最终实现方法的稳健性和重现性。 第四章：色谱分析的数据处理与定量方法 本章将聚焦于色谱谱图的解读和定量分析。 色谱峰的识别与定性：我们将详细讲解如何通过保留时间来初步识别化合物。同时，强调通过与标准品进行比对、利用多检测器（如DAD、MS）提供的额外信息，以及化学知识来确证化合物的身份。 色谱峰的积分与面积计算：我们将介绍不同积分算法（如峰高积分、峰面积积分）的原理和优缺点，以及如何设置积分参数来准确地量化色谱峰。 定量分析方法：我们将系统介绍几种主要的定量方法： 外标法（External Standard Method）：详细阐述其原理、标准曲线的绘制、样品的测定以及误差来源。 内标法（Internal Standard Method）：解释其如何通过引入已知量的内标物来校正样品引入量和仪器响应的变化，从而提高定量准确性。 归一化法（Normalization Method）：介绍其适用于样品中所有组分都能被检测到的情况，通过各组分峰面积（或含量）占总峰面积（或总量）的比例来计算其相对含量。 质量控制与验证：我们将强调在色谱分析中进行质量控制的重要性，包括空白样品、对照样品、加标回收率等，以及方法验证的基本原则和要求（如准确度、精密度、线性、范围、选择性、检测限、定量限等）。 第五章：色谱技术在各领域的应用实例 本章将通过大量的实际应用案例，展示色谱技术在不同科学研究和工业生产中的重要作用。 制药工业：药物的研发（活性成分的发现与合成）、质量控制（原料药和制剂的含量测定、杂质分析、手性药物分离）、药物代谢动力学研究。 环境监测：饮用水、地表水、土壤、空气中的污染物（如农药残留、多环芳烃、挥发性有机化合物、重金属）的检测与分析。 食品安全与营养分析：食品中的添加剂、农药残留、兽药残留、污染物（如黄曲霉毒素）、维生素、氨基酸、脂肪酸、糖类等的检测与定量。 生物化学与分子生物学：蛋白质、多肽、核酸、糖类、脂质、代谢产物等生物分子的分离、纯化与定量。 临床诊断与法医鉴定：体液（血液、尿液）中药物、毒物、激素、代谢物的分析，以及法医鉴定中的物质鉴定。 材料科学：聚合物的分子量分布测定、单体分析、添加剂的检测。 每个应用案例都将深入剖析其具体的分析目标、选择的色谱技术、关键的色谱条件以及最终的分析结果解读，帮助读者理解色谱技术如何为解决实际问题提供有力的支持。 第六章：色谱技术的前沿发展与未来展望 本章将对色谱技术的发展趋势进行探讨。 超高分辨液相色谱（UHPLC）：介绍UHPLC如何通过使用更小的颗粒填料、更高的操作压力来实现更快的分析速度和更高的分离效率。 二维液相色谱（2D-LC）：阐述二维色谱如何通过两次不同原理的分离，显著提高分离度和样品容量，特别适用于分析极其复杂的样品。 固相萃取（SPE）与色谱联用：介绍固相萃取作为一种样品前处理技术，如何与HPLC联用，实现对低浓度目标物的富集和基质干扰的去除。 自动化与智能化色谱系统：探讨自动化进样、方法开发、数据处理以及人工智能在色谱分析中的应用潜力。 绿色色谱：关注开发环境友好的色谱技术，如使用更少量的有机溶剂、开发可生物降解的填料等。 本书的编写宗旨是力求全面、深入、实用。我们相信，通过对本书内容的学习和实践，您将能够深刻理解色谱分析的精髓，并熟练掌握运用这项强大工具解决科学难题的能力。

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