基因工程与分子生物学实验教程

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出版者:
作者:严海燕 编
出品人:
页数:144
译者:
出版时间:2009-8
价格:16.00元
装帧:
isbn号码:9787307072466
丛书系列:
图书标签:
  • 基因工程
  • 分子生物学
  • 实验教程
  • 生物技术
  • 生物科学
  • 高等教育
  • 教学参考
  • 科研
  • 实践
  • 实验室
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具体描述

《基因工程与分子生物学实验教程》在原理部分详细叙述了相应实验技术的理论知识,使操作人员能理解操作过程,从而能灵活而准确地进行实验操作,有助于学生理解实验原理,并根据各实验室所具有的仪器设备、材料等因地制宜进行实验。

《基因工程与分子生物学实验教程》分三个部分,第一部分为基础实验,共十四个独立的实验技术,前十个实验在动物DNA、植物DNA和质粒DNA提取的基础上,进行酶切,将酶切后的基因组DNA与从琼脂糖凝胶中纯化后的载体片段进行连接,同时PCR扩增目的片段,将目的片段从琼脂糖凝胶中纯化后与T载体进行连接。后面四个实验分别提供了从RNA水平和蛋白质水平检测基因表达的方法。

《生物技术与应用:原理与实践》 本书简介 本书旨在为生物技术领域的学习者和研究人员提供一个全面且深入的参考,内容涵盖现代生物技术的核心理论、关键技术以及实际应用。我们力求构建一座连接基础生命科学知识与前沿生物工程实践的桥梁,帮助读者系统地理解和掌握生物技术从分子层面到系统层面的运作机制。 全书结构紧凑,逻辑清晰,覆盖了生物技术领域最受关注和发展最快的几个核心模块。 第一部分:生物技术基础与工具 本部分首先回顾了构建现代生物技术的基石——分子生物学和细胞生物学的基本原理。我们详细阐述了基因组、转录组和蛋白质组学的基本概念,强调了核酸和蛋白质作为生命信息载体的核心作用。 随后,我们将重点放在了生物技术赖以实现的各种核心“工具箱”上。这包括: 1. 核酸操作技术: 详细介绍了限制性内切酶、DNA连接酶的生化特性和应用,着重讲解了聚合酶链式反应(PCR)及其各种衍生技术(如实时定量PCR, qPCR;反转录PCR, RT-PCR)的原理、优化和误差控制。对于分子克隆技术,我们深入探讨了载体设计(质粒、噬菌体、人工染色体)的策略,以及高效的转化、转染方法,包括化学诱导、电穿孔和病毒载体介导的递送。 2. 蛋白质工程基础: 阐述了蛋白质表达系统的选择与优化,涵盖原核(大肠杆菌)、真核(酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞)系统的优缺点及适用场景。蛋白质的分离纯化技术是本节的重点,详细对比了亲和层析、离子交换层析、尺寸排阻层析的理论基础、介质选择和操作流程的优化,并介绍了高效液相色谱(HPLC)在分析纯度验证中的应用。 第二部分:基因组编辑与改造技术 基因组编辑是当前生物技术领域最具革命性的技术之一。本部分将深入探讨其演进历程和最新进展。 1. 经典与新型基因编辑系统: 从早期的ZFNs(锌指核酸酶)和TALENs(转录激活因子样效应物核酸酶)入手,系统分析了CRISPR-Cas系统的发现、工作机制及其结构组成。我们详细剖析了Cas9、Cas12、Cas13等不同酶系的特异性、脱靶效应的评估与管理。 2. 高精度编辑策略: 重点介绍Prime Editing和Base Editing等“无切割”编辑技术,分析它们如何在不引入双链断裂的情况下实现点突变、小片段插入或删除,极大地提高了基因编辑的安全性与精确性。 3. 基因功能分析: 探讨如何利用基因敲除(Knockout)、敲入(Knock-in)或过表达(Overexpression)来解析特定基因在细胞和生物体内的生理功能,涉及体内(in vivo)和体外(in vitro)的验证方法。 第三部分:生物制药与产业化应用 本部分将视野从实验室拓展到生物制药和生物材料的工业化生产,聚焦于技术如何转化为具有实际价值的产品。 1. 重组蛋白药物开发: 详细讲解了单克隆抗体(mAb)的设计、生产工艺(包括细胞株的构建与优化、大规模生物反应器的操作参数控制)以及下游的纯化挑战。内容覆盖了双特异性抗体和抗体药物偶联物(ADC)等新型生物制剂的工程学原理。 2. 疫苗技术的新发展: 对比了传统灭活/减毒疫苗、亚单位疫苗与新型核酸疫苗(mRNA、DNA)的构建策略和免疫学优势。特别是对mRNA疫苗的脂质纳米粒(LNP)递送系统进行了深入分析。 3. 生物信息学在技术中的整合: 强调了生物信息学工具在数据分析、序列比对、蛋白质结构预测和生物工艺优化中的不可替代性。内容涉及高通量测序数据的初步处理和功能注释流程。 第四部分:合成生物学与前沿交叉领域 合成生物学代表了生物技术的未来方向,旨在像工程师一样设计和构建新的生物系统。 1. 设计-构建-测试-学习(DBTL)循环: 介绍了标准生物元件(BioBricks)的概念,以及如何利用模块化设计原理来构建复杂的细胞工厂。重点讨论了代谢通路工程在提高目标产物(如生物燃料、高价值化学品)合成效率中的应用。 2. 细胞疗法与组织工程: 涵盖了免疫细胞疗法(如CAR-T细胞的工程化与临床转化)、干细胞的体外定向分化技术。在组织工程方面,讨论了生物支架材料的选择、细胞铺装技术以及3D生物打印在构建功能性组织模型中的前景。 3. 生物传感与诊断: 介绍如何利用基因线路、荧光报告蛋白或CRISPR系统构建高灵敏度、高特异性的生物传感器,用于环境监测或疾病的快速诊断。 本书特色 本书的编写严格遵循“原理先行,技术为辅,应用驱动”的原则。我们不仅提供了详尽的技术操作步骤描述,更侧重于解释每项技术背后的生化逻辑和工程挑战,以培养读者独立解决复杂生物技术问题的能力。文中穿插了大量的案例分析和“深入探讨”模块,以展示这些技术在实际科学研究和工业生产中的具体表现。本书是高等院校相关专业学生、生物技术行业工程师和科研人员进行系统学习和深入研究的理想参考用书。

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读后感

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用户评价

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这本书的排版布局虽然不属于最现代化的那种,但却非常注重可读性和功能性。章节之间的逻辑衔接极其自然流畅,从基础的分子克隆到复杂的细胞转染技术,层层递进,几乎没有跳跃感。我特别欣赏它在关键概念介绍时所采用的图文并茂的方式。那些手绘的反应机制图,虽然线条简单,但对复杂过程的诠释却比那些高精度的计算机渲染图更为直观和深刻。例如,在描述限制性内切酶的粘性末端形成时,那个示意图几乎是瞬间就点亮了我脑中的疑惑。这种对教学媒介的精准把握,显示了作者对受众学习心理的深刻理解。对于需要长时间面对实验台的科研人员来说,清晰的结构和易于查阅的索引比华丽的装帧重要得多,而这本书在这方面做得非常出色,它更像是一本你可以随时丢在实验台上,毫不担心弄脏或者损坏的“战友”。

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从一名对实验设计有较高要求的进阶学习者的角度来看,这本书最宝贵的价值在于它对实验设计逻辑的剖析。它不仅仅是告诉我们“如何做实验”,更关键的是教会我们“如何设计一个科学有效的实验”。在讨论每个技术时,作者总是会提出一系列反思性的问题:你的对照组设置是否合理?你的样本量是否具有统计学意义?你的实验结果如何才能最大程度地排除非特异性干扰?这种批判性思维的引导,是很多操作指南所缺失的。这本书真正培养的是研究者的独立思考能力,而不是单纯的“操作员”思维。阅读过程中,我时常会停下来,重新审视自己过去实验设计中的一些小疏漏,并立刻有了改进的思路。它像是一套系统的思维训练课程,将分子生物学的严谨性渗透到了每一个实验步骤的考量之中。

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这本书的封面设计得非常朴实,甚至有些陈旧,但正是这种不张扬的风格,让我对内容充满了期待。我原以为这会是一本枯燥的理论教材,毕竟“基因工程”和“分子生物学”听起来就足够硬核。然而,翻开第一页,那种扑面而来的实验细节的详尽程度,简直让人醍醐灌顶。它不像其他教材那样只是罗列步骤,而是深入到每一步操作背后的生物学原理,为什么这个缓冲液的pH值要精确到小数点后一位,为什么这个酶的活性对温度如此敏感。作者似乎将自己多年的手把手教学经验全部倾注其中,使得即便是初次接触实验的本科生,也能通过文字构建起清晰的实验流程图。尤其是关于核酸提取和PCR优化的章节,那简直是教科书级别的范例,每一个陷阱和可能出错的地方都提前预警,并给出了成熟的解决方案。这本书的价值不在于告诉你“怎么做”,更在于教会你“为什么这么做”,这才是真正的科学思维的培养。我强烈推荐给所有希望真正掌握实验室技术的学习者,它不仅仅是一本手册,更像是一位经验丰富的老教授在你耳边细语指导。

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与其他侧重于介绍前沿热点、不断更新的“时髦”技术书籍不同,这本书显得格外沉稳和经典。它将精力放在了那些经过时间检验、至今仍是所有分子生物学研究基石的核心技术上,比如DNA/RNA的制备、PCR/RT-PCR的各个变体、以及最基础的质粒构建。它没有过多地追逐当下最热门的CRISPR/Cas9等高新技术,而是将这些新技术置于一个坚实的传统技术框架下进行阐释。这种“厚今薄古”的处理方式,让读者首先建立了稳固的知识基础,而不是一上来就被大量复杂的概念淹没。在我看来,只有真正理解了基础技术的内在逻辑,才能更高效地掌握和创新那些新兴工具。因此,我把它视为一份永不过时的工具书,无论实验室的技术如何迭代,这些核心能力永远是科研人员的核心竞争力。

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当我翻阅到关于蛋白质纯化和分析的部分时,我简直要为作者的细致入微所折服。试想一下,在浩如烟海的生物技术文献中,如何选择最合适的层析柱介质?这本书没有给出标准答案,而是系统地梳理了各种分离技术的原理、优缺点及其适用范围,并辅以大量的案例分析来佐证其观点。更让我印象深刻的是,它没有回避实验中常见的“失败”——比如电泳条带拖尾、Western Blot信号微弱等问题,而是用专门的章节来讨论如何诊断这些“疑难杂症”并进行调试。这种坦诚和务实的态度,在很多学术著作中是极其罕见的。它承认了实验的复杂性和随机性,但同时又提供了系统性的排查思路,这种“授人以渔”的教学方法,极大地增强了读者在面对实际操作时的信心和应变能力。它真正做到了将理论深度与实践广度完美融合,让读者从容应对从基础研究到应用开发中的各种技术挑战。

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太简单了

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