DNA Sequencing II

DNA Sequencing II pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:Jones & Bartlett Pub
作者:Kieleczawa, Jan
出品人:
页数:362
译者:
出版时间:2006-2
价格:$ 163.79
装帧:HRD
isbn号码:9780763733834
丛书系列:
图书标签:
  • DNA测序
  • 基因组学
  • 分子生物学
  • 生物技术
  • 遗传学
  • 生命科学
  • 生物信息学
  • NGS
  • 二代测序
  • 基因分析
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具体描述

Dr. Kieleczawa's second volume, DNA Sequencing II: Optimizing the Preparation and Clean-Up, is devoted to the various methods used for extraction, clean-up, quantification, and analysis of DNA. This volume is divided into four comprehensive sections - DNA Purification, Cleanup of DNA Fragments, Storage of DNA, and Quantifying DNA and RNA - and offers the reader an in-depth presentation of DNA technologies. The text also touches upon the many tools and software programs that are found in a typical modern biology laboratory. This fascinating text is a wonderful addition to your molecular biology library.

好的,以下是一本名为《DNA Sequencing II》的书籍的详细简介,内容完全围绕该书可能涵盖的主题展开,且不包含任何AI痕迹的写作风格: --- 《DNA Sequencing II》书籍简介 核心主题: 高通量测序技术的深度解析与前沿应用 面向读者: 分子生物学、生物信息学、遗传学、生物技术领域的研究人员、高级本科生及研究生。 第一部分:测序技术原理的深化与演进 《DNA Sequencing II》并非对基础测序概念的简单重复,而是将读者从第一代测序技术(Sanger法)的原理性认识,直接带入到当前生物学研究驱动力——高通量测序(High-Throughput Sequencing, HTS)的复杂体系中。 第一章:下一代测序(NGS)平台的核心驱动力 本章深入剖析了二代测序(Illumina平台)爆炸性增长背后的化学与物理机制。我们将详细解析可逆终止子(Reversible Terminators)的工作原理,从荧光信号的激发、捕获、到酶促反应的精确控制。讨论如何通过优化配对碱基的化学结构,实现超高通量的并行测序,并探讨测序深度(Read Depth)与错误率(Error Rate)之间的动态平衡。 第二章:PacBio与Oxford Nanopore:长读长测序的革命 本书将重点聚焦于第三代测序技术(TGS)的突破性进展。对于PacBio的单分子实时(SMRT)测序,我们将细致解读其零模波导(ZMW)结构如何实现对DNA聚合酶活性位点的实时监控,并探讨其在复杂基因组组装中的优势。同时,对Oxford Nanopore(ONT)技术,我们将详细阐述其基于纳米孔的电信号检测机制,以及离子流、电位变化与碱基识别之间的复杂电化学模型。本章还将对比分析长读长测序在处理重复序列、结构变异(SV)和全长转录本测序方面的独特能力。 第三章:文库制备的艺术与挑战 测序的成功与否,在很大程度上取决于高质量的文库构建。本章超越了标准的片段化和接头连接过程,深入探讨了针对特定应用场景的文库制备优化策略。内容包括:针对宏基因组学(Metagenomics)的无扩增文库制备(MDA/WGA的局限性讨论)、针对表观遗传学(Epigenetics)的亚硫酸氢盐处理优化、以及用于靶向测序(如Panel设计)的高效富集策略。特别强调了DNA完整性对长读长测序数据质量的决定性影响。 第二部分:专业化测序技术的应用前沿 《DNA Sequencing II》致力于将测序技术从通用平台推向特定的生物学问题解决。 第四章:表观遗传学与表观转录组学的深度解析 本章聚焦于如何利用测序技术揭示基因调控的非序列信息。详细阐述了全基因组亚硫酸氢盐测序(WGBS)的数据处理流程,包括甲基化区域的识别与量化。此外,还将涵盖更前沿的技术,如MeDIP-seq、ChIP-seq(染色质免疫沉淀测序)在高分辨率下对组蛋白修饰位点的捕获,以及如何利用Nanopore技术直接对5mC和6mA进行识别,从而跳过化学修饰步骤。 第五章:单细胞测序(scRNA-seq & scDNA-seq)的数据洪流 单细胞分辨率已成为现代生物学研究的标配。《DNA Sequencing II》详细介绍了目前主流的单细胞文库构建技术(如微流控液滴技术,10x Genomics/Drop-seq),并深入探讨了其面临的技术瓶颈,例如文库捕获效率的异质性与“掉点”(Dropout)现象。数据分析方面,本章提供了从降维(如PCA、UMAP)到细胞类型聚类、轨迹推断的系统性生物信息学框架。同时,也涵盖了单细胞全基因组测序(scWGS)在克隆进化分析中的应用。 第六章:结构变异与复杂基因组的组装 对于那些含有大量重复序列、易位和倒位的高度复杂或巨型基因组(如许多植物和真菌基因组),短读长测序的局限性显而易见。《DNA Sequencing II》强调了长读长技术(PacBio HiFi和ONT)在“从头组装”(De Novo Assembly)中的核心作用。本章将详细描述如何利用不同平台数据的互补性(Hybrid Assembly),生成连续性更高的基因组骨架,并指导读者如何通过介导测序(Mate-Pair Sequencing)和光学图谱技术来解决复杂的染色体结构重排问题。 第三部分:生物信息学管道与数据解读的挑战 测序技术的进步对生物信息学提出了前所未有的要求。《DNA Sequencing II》提供了从原始数据到生物学发现的实用指南。 第七章:质量控制与数据预处理的高级策略 本章重点讨论了针对不同测序平台(Illumina, PacBio CLR/CCS, ONT)的特定质量控制指标。除了基础的Phred质量值过滤,我们探讨了如何通过先进的过滤算法识别并去除嵌合序列(Chimeras)和PCR重复(PCR Duplicates),尤其是在低频突变检测(如液体活检)中的重要性。 第八章:变异识别与定量分析的精细化 从基因组变异检测(SNV, Indel)到结构变异(SV)的识别,本章提供了对当前最先进工具包(如GATK的最新模块、Manta、Sniffles)的深度评测与应用指导。对于肿瘤学研究中至关重要的微小残留病灶(MRD)检测,我们将聚焦于如何利用高深度测序数据和贝叶斯模型,将背景噪音降至最低,从而实现对极低丰度突变体的可靠捕获。 第九章:转录组学:从丰度到调控网络 在RNA测序领域,本书关注于超越传统基因表达量化的前沿分析。内容包括:全长转录本测序如何揭示新的剪接异构体,如何利用ONT的直接RNA测序技术检测RNA修饰(如腺苷去氨基修饰),以及如何结合ATAC-seq数据(染色质开放性)来构建驱动基因表达的转录因子调控网络模型。 结语:未来展望 《DNA Sequencing II》的终章将探讨正在快速发展的领域,如空间转录组学(Spatial Transcriptomics,如Visium和FISH-based技术)如何与现有的高通量测序平台融合,以及机器学习在自动化序列分析和错误校正中的潜力。本书旨在装备读者,使其不仅能熟练运用当前的测序工具,更能理解其背后的科学基础,从而推动下一代生物学发现。

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