Calcium Signaling Protocols

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出版者:Humana Pr Inc
作者:Lambert, David G. (EDT)
出品人:
页数:359
译者:
出版时间:
价格:1035.00
装帧:HRD
isbn号码:9781588294425
丛书系列:
图书标签:
  • Calcium Signaling
  • Cell Signaling
  • Molecular Biology
  • Biochemistry
  • Protocols
  • Laboratory Techniques
  • Cellular Physiology
  • Ion Channels
  • Neuroscience
  • Pharmacology
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具体描述

好的,这是一份关于一本名为《Calcium Signaling Protocols》的图书的详细简介,内容完全聚焦于该书可能涉及的主题,但会避免直接提及该书的名称,而是描述其核心内容。 --- 图书简介:细胞内钙离子动态与信号传导的精要指南 本书汇集了当前生物医学研究领域中最为前沿和关键的实验技术,旨在为研究细胞内钙离子($ ext{Ca}^{2+}$)动态及其在信号传导通路中作用的科研人员提供一套全面、详尽的操作指南。细胞内钙离子被誉为“第二信使”的典范,其浓度在细胞质($ ext{Ca}^{2+}_{ ext{cyt}}$)和细胞器(如内质网、线粒体)中的精确调控,是生命活动诸多基本过程的核心驱动力,涵盖了从基因转录、细胞增殖、分化、兴奋收缩偶联到细胞凋亡和免疫应答等几乎所有生理和病理过程。 本书的结构设计遵循了从基础原理到高级应用的逻辑脉络,确保读者能够系统地掌握整个钙信号研究的流程。 第一部分:钙信号基础与成像技术 本部分深入探讨了钙信号传导的基础分子机制,并着重介绍了监测细胞内钙离子浓度变化的关键技术。 1. 钙离子稳态的分子基础: 我们详细解析了调控细胞内钙离子浓度的主要分子元件。这包括各种类型的钙离子通道(如电压门控钙通道VGCCs、受体型钙通道CRACs、TRP通道家族等)的结构、功能及其在不同细胞类型中的表达模式。同时,对钙调控的“闸门”——内质网和线粒体的钙转运体和交换体(如SERCA泵、IP$_{3}$受体、Ryanodine受体、MCU复合物等)的工作原理进行了深入剖析。此外,对胞浆钙清除机制,特别是钠钙交换体(NCX)和质膜钙ATP酶(PMCA)的调控网络也进行了详尽的阐述。 2. 荧光显微成像技术核心: 活细胞钙成像技术是解析钙信号时空动态的金标准。本部分详细介绍了当前主流的钙指示剂(如Fura-2, Indo-1, Fluo-4, Rhod-2等)的化学性质、应用场景、优缺点,以及如何进行探针的装载与质量控制。重点讲解了基于比率测定法(Ratio Imaging)和单波长成像法的定量分析策略。 3. 高级活细胞成像: 针对需要高分辨率和高灵敏度的应用,本书提供了共聚焦显微镜和先进的光激活显微技术(如STED/PALM/STORM)在钙信号研究中的应用规范。特别是对于亚细胞器钙信号的监测,如何利用特定的靶向探针(Targeted Indicators)来实现对线粒体或内质网内钙瞬变的精确捕获,有着详细的操作步骤和图像处理流程。 第二部分:体内与离体钙信号测量方案 本部分侧重于将理论知识转化为可行的实验方案,涵盖了从细胞悬液到整个组织器官的多种测量范式。 1. 离体细胞与膜片钳技术: 对于研究单个离子通道或特定细胞群体的钙内流机制,膜片钳技术是不可或缺的工具。本书提供了全细胞记录(Whole-cell recording)和内嵌式记录(On-cell recording)中钙电流的精确捕获方案。详细说明了如何配置内/外浴流,以及如何利用电压阶跃和药理学阻断剂来解析不同钙通道的激活特性。 2. 组织与器官水平的钙测量: 在研究心肌、平滑肌或神经元群体信号时,需要更高层次的分析。本书收录了针对新鲜组织切片(如脑片、心肌片)的钙成像技术,确保在保持组织生理活性前提下的信号采集。对于器官水平的研究,提供了钙荧光染料灌注技术在离体器官灌流系统中的应用指南。 3. 钙瞬变的时间动力学分析: 钙信号的动态特性(频率、振幅、空间分布)决定了细胞的响应。本部分提供了图像采集后如何进行可靠的数据提取和分析,包括信号去噪、基线漂移校正、钙瞬变峰值与衰减速率的量化标准。 第三部分:钙信号的调控与功能解析 本部分聚焦于如何利用实验手段去干预和解析钙信号在特定生理功能中的角色。 1. 基因工程与分子工具: 现代钙信号研究高度依赖于遗传学工具。本书详细介绍了如何使用慢病毒或腺病毒载体实现钙传感器(如GCaMP系列)或钙操纵工具(如Optogenetics中的Channelrhodopsin-2, ChR2)在目标细胞中的高效表达。此外,对于涉及钙调控蛋白(如钙调蛋白、钙依赖性激酶CaMKII)的研究,提供了其功能获得(Overexpression)和功能缺失(Knockdown/Out)的分子生物学策略。 2. 药理学干预与特异性阻断: 掌握特异性药理学试剂是解析信号通路的基石。本部分汇编了用于靶向不同钙通道、受体和转运体的药物库(包括IP$_{3}$、DAG类似物,特异性拮抗剂和激动剂)。重点在于如何设计剂量反应曲线实验,以及如何排除药物对荧光探针本身或细胞活力的非特异性影响。 3. 与其他信号通路的交叉对话: 钙信号很少单独运作,它常常与其他信号分子(如cAMP/PKA, MAPK, 磷脂酶C等)相互作用。本书提供了双荧光报告系统(FRET/BRET)用于同时监测钙信号与其它关键事件(如ATP消耗或激酶活化)的联合实验方案,揭示钙信号在复杂网络调控中的枢纽地位。 目标读者: 本书面向分子生物学、细胞生物学、神经科学、心血管生理学、免疫学以及药理学等领域的高级研究生、博士后研究人员和资深实验室技术人员。它不仅是实验室操作手册,更是理解和设计复杂钙信号实验的理论参考。通过对这些协议的严格遵循,研究人员能够以前所未有的精度和深度,揭示细胞内钙离子这一普适信使的奥秘。

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