Basic Cell Culture Protocols pdf epub mobi txt 電子書 下載2026

簡體網頁||繁體網頁

☆☆☆☆☆

出版者:Humana Pr Inc

作者:Miller, Cindy 編

出品人:

頁數:384

译者:

出版時間:

價格:$ 145.77

裝幀:Pap

isbn號碼:9781588295453

叢書系列:

圖書標籤:

• 細胞培養
• 細胞生物學
• 實驗方案
• 生物技術
• 實驗室技術
• 生物醫學
• 分子生物學
• 研究方法
• 細胞學
• 生命科學

細胞培養技術前沿與實踐指南：超越基礎的深度探索 本書聚焦於當前細胞生物學研究和生物技術應用領域中，超越傳統基礎細胞培養範疇的尖端技術、復雜模型構建、質量控製與高級分析方法。 它旨在為資深研究人員、高級研究生以及工業界技術專傢提供一個全麵、深入且高度實用的參考手冊，用以應對當代生命科學研究中日益復雜的挑戰。 --- 第一部分：高級細胞株開發與遺傳修飾的精細控製 本部分深入探討瞭傳統原代培養和通用細胞係培養之外的，對細胞功能進行精確調控和改造的前沿技術。 第一章：多能乾細胞（PSC）培養的精益管理 本章詳細解析瞭人類和鼠源性多能乾細胞（ESCs和iPSCs）培養係統的優化策略。內容涵蓋瞭從無血清、化學成分明確的培養基配方選擇，到三維（3D）微載體培養係統在規模化生産中的應用。重點討論瞭胚體（Embryoid Body, EB）形成、菌落形態監測的嚴格標準，以及如何通過優化流體力學和氣體交換速率來維持高效率、低變異性的乾細胞狀態。此外，還介紹瞭如何使用高通量篩選平颱進行誘導多能乾細胞（iPSC）重編程效率的評估與優化。 第二章：基因編輯技術在細胞係構建中的集成應用 本章側重於將CRISPR/Cas9、Prime Editing等先進的基因編輯工具無縫集成到現有細胞培養流程中的技術細節。探討瞭如何設計高效的sgRNA庫以應對復雜的基因敲除或敲入項目，特彆是針對難以轉染的難治性細胞（如某些原代神經元或免疫細胞）。詳細闡述瞭富集技術（如熒光激活細胞分選，FACS）在單剋隆篩選中的優化，以及如何通過靶嚮整閤（Homology-Directed Repair, HDR）確保高精度基因修飾的穩定錶達，避免脫靶效應。 第三章：原代細胞分離與功能性維護的挑戰 本節將原代細胞培養的難度提升至對細胞微環境的精細模擬。內容包括從復雜組織（如肝髒、胰腺、腎髒）中獲取高質量原代細胞的酶解和機械分離方案，並重點講解瞭如何利用生物活性基質（如Matrigel, Laminin）和特定生長因子雞尾酒來維持其體內（in vivo）錶型和功能活性，特彆是對於維持細胞周期和代謝通路的精確調控。 --- 第二部分：復雜三維細胞模型與類器官係統構建 本書超越瞭傳統的二維（2D）單層培養，深入研究瞭模擬體內環境的先進三維（3D）係統。 第四章：水凝膠基質與生物力學調控 本章詳細剖析瞭用於構建3D細胞支架的各類生物惰性與生物活性水凝膠材料（如膠原蛋白、縴維蛋白原、PMA、Alginate）。內容包括水凝膠的交聯密度、彈性模量（Young's Modulus）對細胞命運（如分化、遷移、增殖）的影響，以及如何通過實時監測細胞在3D支架內外的張力變化來優化培養條件。 第五章：器官芯片（Organ-on-a-Chip）與微流控技術 本部分聚焦於工程學與細胞生物學的交叉前沿。詳細描述瞭多腔室微流控設備的製造工藝（如軟光刻技術），以及如何通過精確控製液體流動速率和剪切應力來模擬器官的生理環境（如肺泡錶麵的氣-液界麵，血管內的血流動力學）。重點介紹瞭串聯器官芯片（Multi-Organ-on-a-Chip）的設計原理及其在藥物吸收、代謝和毒性測試中的應用。 第六章：成人組織來源類器官培養的優化 本章專注於基於支架的（Scaffold-based）和無支架的（Scaffold-free）類器官培養技術。涵蓋瞭從腸道、胰腺到腦部類器官的構建流程，強調瞭關鍵形態發生信號通路（如Wnt, Notch, R-spondin）的劑量依賴性調節。此外，探討瞭如何通過定期的基質替換和營養供應策略來延長類器官的存活時間並促進其成熟。 --- 第三部分：高級質量控製、汙染防控與自動化集成 為確保實驗結果的可重復性和工業化應用的可行性，本部分提供瞭嚴格的質量保證和先進的自動化策略。 第七章：細胞培養汙染的深度診斷與根除策略 本章超越瞭常規的支原體檢測，深入探討瞭隱形微生物汙染的檢測與清除。包括針對新型病毒汙染（如逆轉錄病毒）的分子診斷方法（如qPCR/ddPCR），以及復雜生物膜汙染的化學/物理乾預方案。強調瞭對培養環境（CO2/O2水平、水質）的持續、在綫監測係統（Real-time Monitoring Systems）的應用。 第八章：流式細胞術在高階分析中的應用 本節詳細講解瞭如何利用多參數流式細胞術和成像流式技術，對復雜細胞群體進行高級錶型分析。內容涵蓋瞭細胞周期、凋亡通路（如Caspase激活）、細胞錶麵受體錶達的定量分析，以及功能性分析（如吞噬活性、細胞因子分泌的體內測定）。特彆關注瞭如何校準和標準化多色熒光補償，以避免復雜混閤樣本中的假陽性或假陰性結果。 第九章：自動化與機器人集成：從工作站到高內涵篩選 本章探討瞭如何將細胞培養操作升級至工業4.0標準。詳細介紹瞭液體處理機器人、自動液體抓取係統（Automated Liquid Handlers）的編程與驗證流程。著重介紹瞭高內涵成像係統（High-Content Screening, HCS）在3D模型中的應用，包括自動圖像采集、多參數定量成像分析（如核/細胞質比、特定蛋白的空間定位），以及數據分析管道的建立。 --- 第四部分：特殊細胞類型的生理與病理狀態研究 本部分關注特定研究領域中對培養條件要求極高的細胞類型。 第十章：神經元培養與可塑性研究 本章專注於體外建立穩定、高純度的成熟神經元及膠質細胞共培養體係。討論瞭如何在嚴格的無血清、無血清替代品條件下維持神經元的可塑性，包括突觸形成和長時程增強（LTP）的電生理學檢測方法。探討瞭利用光遺傳學（Optogenetics）技術結閤多電極陣列（MEA）平颱對神經環路進行精確調控的實驗設計。 第十一章：免疫細胞功能重塑與CAR-T/NK細胞製備的優化 本節是細胞治療領域的核心內容。深入探討瞭T細胞和NK細胞在體外活化、擴增過程中的代謝重編程（Metabolic Reprogramming）。詳細介紹瞭載體轉導效率的優化，以及如何通過調節細胞因子比例（如IL-2, IL-15, IL-7）來維持效應細胞的“幼稚性”或“記憶性”錶型，以增強其在體內的持久性。 第十二章：代謝活性與細胞應激反應的實時監測 本章將培養技術與生物能學（Bioenergetics）分析結閤。介紹瞭細胞代謝分析儀（Seahorse Analyzer）在評估糖酵解和氧化磷酸化通量的應用，並討論瞭如何將不同培養條件（如缺氧、營養飢餓）對這些代謝參數的影響進行量化。此外，還包括利用探針檢測細胞內活性氧（ROS）水平和綫粒體膜電位，作為細胞健康和應激的敏感指標。 --- 總結： 《細胞培養技術前沿與實踐指南》提供瞭一套麵嚮未來的、具有高度操作性的技術藍圖。它不僅是技術的集閤，更是對細胞生物學研究範式轉變的迴應，強調在復雜模型中實現精準控製、嚴格驗證和功能性維持。本書的深度和廣度，將確保讀者能夠駕馭下一代細胞研究的復雜挑戰。

評分☆☆☆☆☆

評分☆☆☆☆☆

評分☆☆☆☆☆

評分☆☆☆☆☆

評分☆☆☆☆☆

评分☆☆☆☆☆

评分☆☆☆☆☆

评分☆☆☆☆☆

评分☆☆☆☆☆

评分☆☆☆☆☆