Gene Knockout Protocols

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出版者:Humana Pr Inc
作者:Tymms, M.J. 编
出品人:
页数:448
译者:
出版时间:2001-1
价格:$ 190.97
装帧:HRD
isbn号码:9780896035720
丛书系列:
图书标签:
  • 基因敲除
  • 基因编辑
  • 分子生物学
  • 实验方案
  • 生物技术
  • 细胞生物学
  • 遗传学
  • 实验室技术
  • 研究方法
  • 生物医学
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具体描述

Highly skilled investigators with extensive experience in gene targeting and mouse genetics describe their best techniques for the design of targeting constructs and for the analysis of the mouse phenotype. These include embryo transplantation, in vitro embryonic stem cell differentiation, creation of aggregation chimeras, mouse pathology, embryo cryopreservation, and transplantation. State-of-the-art and highly practical, Gene Knockout Protocols not only constitutes an invaluable source of readily reproducible techniques for those just entering the field of gene targeting, but also a key reference for all genetic researchers today.

深入探索分子生物学的尖端技术:非基因敲除技术在现代生物学研究中的应用 图书名称: 分子工具箱:非基因敲除策略在基因功能解析与疾病模型构建中的前沿应用 作者: (此处虚构一位资深研究人员的姓名,例如:张 伟 教授;李 明 博士) 出版社: (此处虚构一家权威学术出版社,例如:生命科学前沿出版社) --- 内容概述:摆脱传统桎梏,迎接精准调控的时代 本书《分子工具箱:非基因敲除策略在基因功能解析与疾病模型构建中的前沿应用》聚焦于当代分子生物学研究中,替代传统“一刀切”的基因敲除(Gene Knockout)方法所涌现出的、更为精细、可逆且高效的基因功能研究工具。随着对生命复杂性认识的不断深化,研究人员迫切需要能够在特定时间点、特定细胞类型甚至亚细胞结构内,动态、精准地调控基因表达或功能的方法。本书系统梳理并深入剖析了近年来蓬勃发展的非基因敲除技术,旨在为生命科学、生物医学工程及药物开发领域的科研工作者提供一套全面的、可操作的先进技术指南。 第一部分:非基因敲除技术的核心原理与分类 本部分奠定了理解现代基因功能研究的基础,强调了从永久性缺失到瞬时、可控调控范式的转变。 第一章:从敲除到调控——范式转移的必然性 传统基因敲除的局限性分析: 探讨永久性基因缺失可能导致的补偿效应、发育缺陷以及对研究时间窗的限制。 瞬时调控的优势: 阐述为何在研究复杂信号通路、探索时间依赖性功能以及建立非致死性疾病模型时,非敲除策略成为首选。 第二章:基因沉默的艺术——RNA干扰与反义寡核苷酸(ASO)的精进 siRNA与shRNA的优化递送系统: 详细介绍脂质纳米粒(LNP)、腺相关病毒(AAV)介导的siRNA递送,及其在体内(in vivo)实验中的成功案例。 ASO的设计、化学修饰与靶向特异性: 重点讨论第二代和第三代ASO(如磷酸二酯键修饰、2'-O-甲基修饰)在提高稳定性和降低脱靶效应方面的突破。 应用实例: 利用ASO技术快速验证高通量筛选靶点的体内功能。 第三章:转录本调控的新疆界——CRISPR干扰(CRISPRi)与激活(CRISPRa) dCas9系统的工程化改造: 深入讲解失活Cas9(dCas9)如何作为分子马达,通过融合转录抑制结构域(如KRAB)实现基因的特异性沉默(CRISPRi)。 增强转录的机制: 介绍如何利用激活结构域(如VP64、p65-HSF1)驱动目标基因的高效表达(CRISPRa),及其在细胞重编程中的潜力。 优缺点对比: 详细对比CRISPRi/a与传统siRNA在转录水平调控上的效率、可逆性和脱靶风险。 第二部分:翻译后水平的动态精修与蛋白质功能阻断 本部分关注如何绕过核酸水平的干预,直接在蛋白质表达、定位或活性层面进行精确调控。 第四章:蛋白质降解的新范式——靶向蛋白降解(TPD)技术 PROTACs的分子设计与机制: 全面解析小分子诱导嵌合剂(PROTACs)的双头结构(配体、E3连接酶配体与连接子),及其通过招募泛素化系统降解靶蛋白的原理。 LYTACs与AUTOTACs的拓展: 介绍靶向膜蛋白和细胞内自噬途径的降解技术,拓宽了TPD的应用范围。 优势与挑战: 探讨TPD在克服“不可成药”靶点方面的巨大潜力,以及如何优化其药代动力学特性。 第五章:化学诱导的基因功能“开关”:可逆性调控系统 Tet-On/Off系统在高阶研究中的应用: 详述四环素(或其类似物)诱导系统在调控外源或内源基因表达时间点上的精确控制能力。 光遗传学与化学遗传学(DREADDs): 介绍利用光敏蛋白或特定药物受体(如CNO)实现神经元或特定细胞群功能活动的瞬时激活或抑制,是研究体内动态行为的利器。 第六章:蛋白质互作的干扰与修饰 小分子抑制剂与抗体在通路阻断中的作用: 综述新一代高选择性小分子抑制剂的研发进展,如何精确定位激酶、磷酸酶或转录因子活性位点。 单链可变片段(scFv)与结构域拮抗剂: 利用重组蛋白片段特异性地阻断蛋白质-蛋白质相互作用(PPIs),探索PPIs在信号传导中的核心地位。 第三部分:非基因敲除技术在疾病模型与治疗策略中的转化应用 本部分着眼于如何将这些先进的分子工具转化为具有临床转化潜力的研究手段和治疗方案。 第七章:体外与体内模型的优化——精准建模的基石 类器官(Organoids)与类器官芯片(Organ-on-a-Chip)中的动态调控: 阐述如何利用AAV或CRISPRi系统在三维培养系统中实现对肿瘤微环境或器官发育过程的实时干预。 可诱导性疾病模型的构建: 展示如何利用Tet系统在成年动物中激活或抑制致病基因,以更真实地模拟人类疾病的发生和发展过程,规避胚胎致死性问题。 第八章:基因治疗的未来方向——递送系统的革新 病毒载体的靶向化改造: 深入研究AAV血清型的组织嗜性,以及如何通过表面修饰实现对特定细胞群的精准感染(如中枢神经系统、特定癌细胞)。 非病毒载体的突破: 聚焦于新型聚合物、脂质体在递送siRNA、ASO和CRISPR元件时的安全性和效率提升。 第九章:从工具到疗法——临床转化的挑战与前景 安全性评估: 详细讨论非基因敲除技术(尤其是RNAi和TPD)在长期使用中可能面临的脱靶效应、免疫原性和脱靶降解风险的评估标准。 联合治疗策略: 探讨如何将动态基因调控技术与化疗、免疫疗法相结合,实现对耐药性肿瘤的有效克服。 结语:展望精准生物学的新十年 本书总结了当前非基因敲除技术在分子生物学研究中取得的里程碑式进展,并展望了未来在单细胞分辨率动态分析、活体成像反馈控制系统,以及个性化医疗中的广阔前景。本书不仅仅是一本技术手册,更是一份面向未来的研究蓝图,旨在激发读者利用这些强大的分子工具,解决生命科学领域中最具挑战性的难题。 --- 本书特色: 深度与广度兼备: 覆盖从基础分子机制到复杂疾病模型的完整技术谱系。 实践导向: 包含大量实验设计考量、常见技术难题的解决方案及优化建议。 前沿视角: 重点介绍PROTACs、CRISPRi/a等近五年内快速发展的颠覆性技术。 面向未来: 强调可逆性、精确性和体内应用的转化潜力。

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读后感

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用户评价

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我一直认为,一本真正的好书,即使在读者不具备相关背景知识的情况下,也能激发出强烈的共鸣。这本书就是如此。它以一种近乎诗意的语言,描绘了基因敲除这一科学领域令人着迷的图景。我被作者对分子世界的描绘所折服,那些微小的、看不见的DNA链条,在作者的笔下仿佛拥有了生命,它们在细胞中舞蹈,在生命的蓝图中谱写着属于自己的篇章。我尤其欣赏书中所传达的一种“工匠精神”,它不仅仅是简单的技术堆砌,更是一种对精确、对细节的极致追求。我能够感受到作者对每一个实验步骤都经过深思熟虑,对每一个可能出现的意外都做好了充分的准备。虽然我无法亲手操作书中提到的那些复杂仪器,也无法理解那些晦涩的术语,但这本书让我对生命科学的奥秘有了更深层次的理解。它让我意识到,科学的进步,往往就隐藏在那些不为人知的、细致入微的实验操作之中。这本书就像一个引人入胜的故事,即使我不是故事中的主角,也能被其中蕴含的智慧和力量所打动。

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这本书带给我的,是一种前所未有的震撼。我从未想过,在如此微观的生命层面,竟然可以进行如此精密的“编辑”。我被作者对基因功能的研究,以及对生命本质的探究所深深吸引。即使我不是生物学领域的专家,也能从中感受到一种强大的科学力量。作者的叙述方式非常独特,他将复杂的科学概念,用一种相对易懂的方式呈现出来,让我能够窥探到基因世界的神奇之处。我尤其喜欢书中对于实验过程的描述,那种对每一个细节的关注,对每一个可能性的考量,都让我感受到了科学研究的严谨和审慎。我虽然无法完全理解其中的科学原理,但这本书已经在我心中种下了一颗好奇的种子,让我对生命科学的未来充满了期待。它让我意识到,科学的进步,离不开一代代科学家们的默默付出和不懈努力。这本书就像一本打开了潘多拉魔盒的钥匙,让我得以一窥科学的神秘领域。

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不得不说,这本书为我打开了一扇全新的窗口,让我得以窥见生命科学领域那些令人惊叹的进展。作者以一种非常引人入胜的方式,描绘了基因敲除技术如何成为揭示生命奥秘的强大工具。虽然我并非专业研究人员,但字里行间所流露出的那种对科学探索的热情和严谨态度,深深地打动了我。我被书中对于各种疾病模型的研究,以及对潜在治疗方法的探索所吸引。即使我无法完全理解其中的技术细节,也能感受到科学家们为了攻克难题而付出的巨大努力。我尤其欣赏作者在阐述复杂概念时所展现出的清晰逻辑和洞察力。仿佛在我面前铺展开了一幅宏大的科学画卷,让我得以一窥生命科学的无限可能。这本书让我意识到,科学研究并非遥不可及,而是无数个精细的实验步骤和严谨的逻辑推理所构成的。它激发了我对生命科学的浓厚兴趣,让我开始思考,未来我们还能在基因层面实现哪些突破。

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这本书绝对是我近期阅读体验中最具启发性的一本,尽管我对书中所述的具体实验操作知之甚少。我被作者那种对科学探索的严谨态度深深吸引,仿佛每一页都充满了研究者们数月甚至数年的心血。读这本书的时候,我脑海中常常浮现出那些在实验室里埋头苦干的身影,他们面对着无数的挑战,但依然怀揣着对未知的好奇和对真理的追求。书中的一些章节,虽然我无法理解其技术细节,但却让我对基因编辑的潜力和它可能为人类健康带来的改变产生了无比的憧憬。我尤其喜欢作者在描述某些复杂过程时所流露出的那种冷静而富有条理的叙述方式,即使我无法跟随每一个步骤,也能感受到其中蕴含的智慧和力量。它让我意识到,科学研究并非一蹴而就,而是无数微小而精确的步骤累积而成。这本书就像一本通往科学殿堂的地图,虽然我可能还没有完全理解每一个标记的意义,但它已经为我指明了方向,让我对未来的探索充满了期待。这种对未知领域的好奇心,以及对科研精神的敬意,在这本书中得到了极大的满足。

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我必须承认,当拿到这本书的时候,我对其内容了解甚少,而最终的阅读体验也超出了我的预期,甚至可以说,它完全改变了我对某些科学领域的看法。作者以一种非常宏大而又细腻的视角,展现了基因敲除技术在生命科学研究中的重要作用。我被书中所描绘的那些对疾病机理的探索,以及对治疗方案的研发所深深吸引。即使我无法理解其中的技术细节,也能感受到作者在字里行间流露出的对科学研究的热情和执着。我尤其喜欢作者在描述某些实验设计时所表现出的那种逻辑严谨和思路清晰。仿佛在我面前展开了一幅精密的科学画卷,每一笔都充满了智慧和创造力。这本书让我意识到,科学研究并非枯燥乏味的理论堆砌,而是充满着挑战和惊喜的探索过程。它让我对人类探索未知世界的勇气和智慧有了更深的敬意。读这本书,就像是在与一群顶尖的科学家进行思想的交流,虽然我可能无法完全理解他们的话语,但却能感受到他们身上散发出的那种智慧的光芒。

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