生物化学与分子生物学实验技术

生物化学与分子生物学实验技术 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:
作者:厉朝龙
出品人:
页数:250
译者:
出版时间:2000-6
价格:30.00元
装帧:
isbn号码:9787308022804
丛书系列:
图书标签:
  • 生物化学
  • 分子生物学
  • 实验技术
  • 生物技术
  • 医学
  • 生命科学
  • 科研
  • 大学教材
  • 实验指导
  • 生物学
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具体描述

历朝龙主编的《生物化学与分子生物学实验技术》以生物高分子化合物

——蛋白质、酶及核酸的分离和鉴定、代谢及其调控以及分子生物学基本技

术为重点,介绍了生物高分子化合物的提取和纯化、结构和性质的分析方法

、酶反应动力学分析、分子克隆技术、电泳法、层析法等基本研究技术,并

对实验相关的理论进行了比较系统的阐述。

《生物化学与分子生物学实验技术》内容适应高等医学院校学生的教学

需要,可作为本科生和研究生生物化学与分子生物学实验课程教材,也可供

医学生物化学及分子生物学教学和科研工作者参考。

《生物化学与分子生物学实验技术》 内容简介: 本书是一本面向生物化学与分子生物学领域研究和实践的实验技术指南。全书共分为九章,系统地介绍了现代生物化学与分子生物学研究中最常用、最核心的实验方法和技术,旨在帮助读者掌握实验操作的基本原理、步骤、注意事项以及结果的分析和解读。 第一章:生命分子的提取与纯化 详细阐述了从不同生物材料(如组织、细胞、微生物)中提取和纯化蛋白质、核酸(DNA和RNA)、脂质、碳水化合物等主要生命分子的方法。内容涵盖了细胞破碎技术(机械法、化学法、酶法)、沉淀法、层析法(包括离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析、反相层析等)、电泳技术(SDS-PAGE、Native-PAGE)在蛋白质纯化中的应用,以及不同类型的DNA和RNA提取试剂盒和纯化柱的使用。同时,也介绍了脂质的提取(如Bligh-Dyer法)和碳水化合物的分离纯化方法。 第二章:酶学实验技术 重点介绍了酶活性测定、酶动力学研究以及酶的性质分析。内容包括常见酶活性单位的定义和计算,不同类型的酶活性测定方法(如分光光度法、荧光法、放射性同位素法、电化学法),以及影响酶活性的因素(如pH、温度、底物浓度、抑制剂和激活剂)的实验设计与操作。详细讲解了Michaelis-Menten方程的含义及其在计算Km和Vmax中的应用,并介绍了非Michaelis-Menten酶的动力学分析方法。此外,还包括酶的热稳定性和pH稳定性测定,以及酶的固定化技术。 第三章:核酸实验技术 聚焦于DNA和RNA的研究,包括核酸的获取、定量、质控以及下游应用。内容涵盖了各种DNA和RNA提取方法(如酚-氯仿抽提法、硅胶柱法、磁珠法),以及核酸浓度和纯度的测定(如紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳)。详细介绍了PCR(聚合酶链式反应)技术,包括不同类型的PCR(如RT-PCR、qPCR、Touchdown PCR)的原理、设计要素、优化条件和应用;以及DNA测序技术(如Sanger测序、高通量测序)的基本原理和数据分析。此外,还包括RNA提取、cDNA合成、Northern Blot、Southern Blot以及分子杂交技术。 第四章:蛋白质组学与抗体技术 深入探讨了蛋白质的鉴定、定量、相互作用研究以及抗体的制备与应用。内容包括蛋白质的二维电泳(2-DE)及其在蛋白质表达差异分析中的作用;质谱技术(如MALDI-TOF MS、ESI-MS/MS)在蛋白质鉴定和修饰分析中的应用;蛋白质印迹(Western Blot)技术在检测特定蛋白质表达水平中的关键步骤和注意事项;以及ELISA(酶联免疫吸附测定)在定量检测蛋白质或抗体方面的原理和操作。同时,详细介绍了多克隆抗体和单克隆抗体的制备过程、抗体的标记技术(如荧光标记、酶标记)以及抗体在免疫沉淀(IP)、免疫组织化学(IHC)、免疫荧光(IF)等技术中的应用。 第五章:基因克隆与表达 涵盖了基因操作的核心技术,包括基因的获取、载体构建、转化、筛选和基因表达调控。内容包括限制性内切酶的原理和应用、DNA连接酶的功能、载体的类型(如质粒载体、病毒载体)及其选择依据;基因片段的酶切连接、PCR产物的直接克隆;以及将目的基因导入宿主细胞(如大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞)的转化方法(如热休克法、电穿孔法、脂质体转染法、病毒转导法)。还介绍了重组子的筛选方法(如蓝白斑筛选、抗性筛选)以及基因表达调控的策略,包括启动子、增强子、沉默子的选择和使用。 第六章:基因组学与转录组学 介绍了研究基因组结构、变异以及全基因组转录水平表达的技术。内容包括基因组DNA的提取与质控;DNA微阵列(Microarray)技术在检测基因表达谱方面的原理、流程和数据分析;高通量测序技术(如Illumina sequencing, PacBio sequencing)在基因组测序、基因分型、拷贝数变异检测中的应用;以及RNA-Seq技术在全基因组转录本分析、差异基因表达、剪接变异检测中的方法和数据解读。 第七章:生物信息学在实验中的应用 强调了生物信息学工具在生命科学实验数据分析中的重要性。内容涵盖了常用生物信息学数据库(如NCBI GenBank, UniProt, PDB)的检索和使用;序列比对工具(如BLAST)的应用;基因序列的预测与分析;蛋白质结构预测与模拟;以及基因组、转录组数据的可视化和统计分析方法。 第八章:细胞培养与检测技术 提供了体外培养和分析细胞的基本技术。内容包括各种细胞培养基的配制与选择;无菌操作技术的重要性;不同类型细胞(如贴壁细胞、悬浮细胞)的培养方法;细胞传代、冻存和复苏;以及细胞活力的检测(如MTT法、CCK-8法)、细胞凋亡检测(如Annexin V/PI染色、caspase活性测定)、细胞周期分析(如PI染色流式细胞术)和细胞毒性评价。 第九章:分子诊断与应用 探讨了分子生物学技术在疾病诊断、预后评估和治疗中的应用。内容包括PCR和RT-PCR在病原体检测(如病毒、细菌感染)中的应用;核酸基因分型技术(如SNP分型、STR分型)在遗传病诊断、法医学中的应用;以及基因测序技术在肿瘤基因检测、耐药性评估、个体化治疗中的作用。 本书通过详细的实验步骤、清晰的原理阐述以及丰富的案例分析,力求为读者提供一个全面、实用的实验技术学习平台,帮助科研工作者和学生高效、准确地开展生物化学与分子生物学研究。

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目录信息

读后感

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用户评价

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我迫不及待地翻开这本《生物化学与分子生物学实验技术》,心中充满对未知的好奇与探索的渴望。我希望这本书能为我揭示生命体内部那些看不见的、却又至关重要的化学反应。从最基础的“细胞”开始,我希望能了解细胞的结构组成,各种细胞器(如线粒体、叶绿体、内质网、高尔基体等)是如何分工合作,维持细胞的正常功能的。我希望书中能用清晰的图示来展示这些细胞器的形态和位置,并详细介绍它们各自的生化功能。在生物化学方面,我特别关注“能量代谢”这一主题。细胞是如何将我们摄入的食物转化为维持生命所需的能量?我希望书中能详细阐述糖酵解、三羧酸循环和氧化磷酸化这三大能量代谢途径,并解释它们之间的相互联系和调控机制。我还对“酶”这一神奇的生物催化剂的工作原理感到着迷,希望书中能详细介绍酶的活性中心、底物特异性,以及影响酶活性的各种因素。在分子生物学领域,我希望能深入理解“遗传信息的传递”。DNA是如何储存着生命的蓝图?DNA是如何进行复制,以确保遗传信息的准确传递?我希望书中能详细阐述DNA复制的分子机制,包括DNA聚合酶、DNA连接酶等关键组分的协同作用。我也希望能了解RNA的多样性及其在基因表达过程中扮演的重要角色。在实验技术方面,我期待这本书能成为我学习实验操作的得力助手。例如,如何利用PCR技术扩增特定的DNA片段?如何通过凝胶电泳技术分离和分析DNA、RNA和蛋白质?我希望书中能详细介绍这些技术的原理、实验步骤、关键注意事项,以及如何排除实验中的干扰因素。

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我手中这本《生物化学与分子生物学实验技术》,如同开启生命奥秘的一把钥匙,让我充满探索的欲望。我期待它能以严谨又不失趣味的方式,带领我走进生命的分子世界。在生物化学的部分,我希望能对“能量转化”这一生命最基本的需求有更深刻的理解。细胞是如何将我们摄入的食物转化为ATP等能量分子的?我希望书中能详细介绍糖酵解、三羧酸循环和氧化磷酸化等关键代谢途径,并阐述它们是如何相互关联,构成一个庞大的能量供应网络。我还对“生物大分子”的结构与功能非常感兴趣。蛋白质、核酸、多糖、脂质,它们各自的化学结构有何特点?这些结构又如何决定了它们在生命活动中的多样化功能?我希望书中能有详尽的介绍,并且配以精美的三维结构图。在分子生物学方面,我希望能深入理解“基因”是如何被读取和表达的。DNA的复制、转录和翻译这三大核心过程,是生命信息传递的基石,我希望书中能清晰地描绘出这些过程的分子机制,包括参与其中的各种酶和蛋白质。我对“基因调控”这一复杂而精妙的机制尤为好奇,细胞是如何精确地控制基因的表达,以适应不断变化的环境?我希望书中能介绍一些重要的基因调控元件和转录因子。在实验技术方面,我渴望学习那些能够直接“操作”和“观察”分子世界的方法。例如,如何通过Western Blot技术检测特定蛋白质的表达水平?如何利用ELISA技术进行定量检测?我希望书中能详细介绍这些技术的原理、实验步骤、关键注意事项,以及如何分析和解读实验结果。

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一本厚重的书籍,封面设计庄重而富有科学感,那“生物化学与分子生物学实验技术”几个字,仿佛自带一种严谨的气息,让我迫不及待想翻开一探究竟。我是一名对生命科学充满好奇的学习者,虽然接触这个领域的时间不算太长,但生物化学和分子生物学这两个概念总是萦绕在我脑海里,它们是理解生命奥秘的钥匙,而实验技术,更是将这些抽象理论转化为现实的关键。我期望这本书能够以一种系统、全面且易于理解的方式,带领我深入探索这些高深的领域。具体来说,我希望它能包含从基础的生物化学反应原理,如酶促反应的动力学、代谢途径的调控,到分子生物学的核心技术,如DNA提取、PCR、基因克隆、蛋白质表达与纯化等等。尤其是在实验技术的部分,我期待它不仅仅是罗列出各种方法,更能深入阐述每种技术的原理、操作步骤的细节、可能遇到的问题及相应的解决方案,甚至是一些优化技巧。例如,在PCR部分,我希望能详细了解不同类型的PCR(如RT-PCR、qPCR、Touchdown PCR等)的应用场景和原理差异,以及如何根据模板、引物和反应体系选择合适的条件,如何判读PCR产物,以及如何避免假阳性或假阴性结果。对于凝胶电泳,我也希望它能涵盖不同类型的凝胶(琼脂糖、聚丙烯酰胺)在分离不同大小核酸或蛋白质时的选择依据,以及如何制作凝胶、上样、电泳条件的选择、结果的判读和拍照保存等。此外,书中对于各种仪器的介绍和使用指导也非常重要,比如离心机、光谱仪、酶标仪、电泳仪、PCR仪等,了解它们的结构、功能和操作规范,是保证实验成功的基础。我还希望书中能穿插一些经典的实验案例,通过这些案例,学习者可以更直观地理解实验技术的应用,以及如何在实际研究中解决问题。当然,安全操作规程也是必不可少的,毕竟在实验室里,安全永远是第一位的。总之,这本书在我眼中,应该是一本集理论知识、操作指南、案例分析、安全提示于一体的宝典,能够帮助我从零开始,逐步掌握生物化学与分子生物学实验的核心技能,为我未来的学习和研究打下坚实的基础。

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我拿到这本《生物化学与分子生物学实验技术》时,内心充满了期待,仿佛一位初探未知领域的勇士,即将踏上科学的征程。我希望这本书能为我揭示生命活动的微观世界,从最基本的原子、分子层面,去理解细胞的构成、功能以及生命过程的本质。在生物化学领域,我特别渴望了解构成生命体的基本分子,如碳水化合物、脂质、蛋白质和核酸,它们各自的化学结构、物理化学性质以及在生命活动中所扮演的重要角色。我希望书中能详细介绍这些大分子的合成与分解代谢途径,比如糖类和脂肪是如何被分解产生能量,蛋白质是如何被合成和降解的。我还想深入了解“信号转导”的概念,细胞是如何感知外界环境的变化,并通过一系列复杂的信号分子传递,最终作出相应的反应?我希望书中能清晰地阐述这些信号通路的关键组成部分和相互作用。在分子生物学部分,我更是期待能够深入理解“基因”的奥秘。基因不仅仅是一串DNA序列,更是生命蓝图的载体,我希望书中能详细介绍DNA的复制、转录和翻译这三大核心过程,以及它们是如何保证遗传信息的准确传递和蛋白质的合成。我对“基因调控”尤其感兴趣,细胞如何精确地控制哪些基因在何时何地表达,又是如何根据环境变化而动态调整基因表达的?我希望书中能介绍一些重要的基因调控机制,比如转录因子、启动子、增强子等。在实验技术方面,我希望这本书能像一位技艺精湛的工匠,教我如何使用各种工具来探索和 Manipulate 这些分子。例如,如何使用酶切位点来切割DNA,如何将不同的DNA片段连接起来构建重组DNA分子?如何利用质粒作为载体将外源基因导入细菌进行表达?我希望书中能详细介绍这些分子克隆技术的操作步骤、原理以及在实际研究中的应用。

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翻开这本《生物化学与分子生物学实验技术》,我仿佛进入了一个充满生机与活力的微观世界,准备与生命的奥秘进行一场深度对话。我希望书中能从最基础的层面,如原子、分子,开始讲解生命体的构成。特别是对于“水”这一生命之源,它在细胞内扮演着怎样的角色,其特殊的物理化学性质如何支持着生命活动的发生?我希望对此有更细致的理解。接着,我希望能系统地学习构成生命体的四大基本有机物:碳水化合物、脂质、蛋白质和核酸。它们各自的单体结构、聚合方式以及在生命体内的重要功能,我希望书中能提供详尽的阐述,并且配以清晰的化学结构图。我对“酶”作为生物催化剂的工作原理非常着迷,希望书中能详细介绍酶的活性中心、底物特异性,以及影响酶活性的各种因素,例如pH、温度和抑制剂。在分子生物学领域,我希望能深入探索“遗传信息”的载体——DNA。DNA的结构是如何编码着庞大的遗传信息?DNA是如何进行精确的复制,以保证遗传信息的代代相传?我希望书中能详细介绍DNA复制的分子机制,包括DNA聚合酶、DNA连接酶等关键组分的协同作用。我还希望能了解RNA的多样性及其在基因表达过程中的重要作用。在实验技术方面,我期待这本书能成为我探索分子世界的指南。比如,如何利用凝胶电泳技术分离和分析DNA、RNA和蛋白质?如何通过PCR技术实现DNA的指数级扩增?我希望书中能详细介绍这些技术的原理、实验流程、关键步骤,以及如何排除实验中的干扰因素。

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拿到这本《生物化学与分子生物学实验技术》,我感觉自己仿佛置身于一个充满活力的实验室,准备开始一段精彩的探索之旅。作为一名对生命科学充满热情的初学者,我渴望这本书能像一位经验丰富的向导,带领我穿越复杂而迷人的生化与分子世界。我希望书中能系统地介绍生命活动的“能量工厂”——细胞。细胞是如何运作的?各种细胞器,如线粒体、叶绿体、核糖体、内质网等,各自承担着怎样的生理功能?我希望书中能从宏观到微观,逐一剖析这些细胞的“零件”是如何协同工作,维持生命体的运转。在生物化学方面,我最感兴趣的是“代谢”这一概念。生命体是如何摄取外界的物质,通过一系列复杂的化学反应,将其转化为自身生长、发育和维持生命所需的能量和物质?我希望书中能详细介绍主要的代谢途径,如糖代谢、脂质代谢、蛋白质代谢,并解释它们之间的相互关联和调控。我对“酶”这个神奇的生物催化剂也充满好奇,它们是如何加速化学反应的?不同种类的酶又有怎样的特异性?我希望书中能对此有深入的讲解。在分子生物学领域,我希望能了解“遗传物质”——DNA的奥秘。DNA的结构是如何携带遗传信息的?DNA是如何进行复制,以保证生命的延续?我希望书中能清晰地阐述DNA复制的分子机制,包括DNA聚合酶、引解酶等关键蛋白质的作用。我也希望了解RNA的作用,以及它在基因表达过程中的重要性。在实验技术方面,我希望这本书能教会我如何“看得见”和“捉得住”这些微小的分子。比如,如何利用离心技术将细胞不同组分分离?如何通过光谱分析技术来定量检测某些生化物质的含量?我希望书中能详细介绍这些仪器的原理、操作步骤和应用范围。

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翻开这本书,首先映入眼帘的是其丰富的内涵,仿佛一座知识的宝库等待我去挖掘。我对其中的“生物化学”部分尤其感兴趣,希望能了解到生命体中那些看不见的奇妙化学反应是如何运作的。比如说,我想深入了解糖酵解、三羧酸循环以及电子传递链这些核心的能量代谢过程,它们是如何在细胞内高效地进行,并将食物转化为维持生命活动的能量。书中是否能清晰地描绘出这些复杂代谢途径中的关键酶、底物和产物,并解释它们的调控机制?我希望不仅仅是看到图谱,更能理解背后的分子机制。另外,蛋白质的结构与功能也是我非常关注的重点。蛋白质是生命活动的执行者,它们的折叠方式、三维结构如何决定其特定的功能,比如催化反应的酶、传递信号的受体,还是构成细胞结构的骨架?我希望能看到关于蛋白质一级、二级、三级和四级结构的详细介绍,以及影响蛋白质稳定性和功能的因素。在“分子生物学”方面,我期待书中能系统地介绍基因的结构、表达与调控。DNA是如何复制的?RNA又是如何转录自DNA的?蛋白质合成(翻译)的过程又是怎样的?书中能否用图文并茂的方式,将这些生命的基本过程展示得一清二楚?我特别想了解基因表达调控的复杂性,比如转录因子是如何与DNA结合,从而开启或关闭基因的表达,以及表观遗传学在其中的作用。在实验技术方面,我渴望学习那些能够让我们“看见”和“操作”这些分子过程的方法。例如,DNA测序技术的发展,从桑格法到高通量测序,它们是如何实现的?又如何帮助我们解读基因组的信息?PCR技术,虽然听起来简单,但其应用之广泛,从基因诊断到法医鉴定,我希望书中能深入探讨其原理和各种变体。 Western Blot 技术,又是如何用来检测特定蛋白质的表达水平和相对含量?我希望能学习到如何设计实验,如何选择合适的抗体,如何进行结果的分析和解读。

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这本书的封面设计简洁大气,但字里行间却透露着深厚的学术底蕴。作为一名对生命奥秘充满好奇的普通读者,我特别希望这本书能从最基础的概念讲起,循序渐进地引领我进入生物化学与分子生物学的奇妙世界。我希望它能清晰地解释“生物化学”究竟是什么,它研究的对象是什么,以及它与我们日常生活中的哪些现象息息相关。例如,我们吃的食物是如何在体内被消化吸收,转化为能量和生命所需的各种物质?书中是否能用通俗易懂的语言,结合生动的图例,来阐述这些复杂的过程?我特别期待了解“酶”的作用,它们是生命反应的催化剂,我希望书中能详细介绍不同种类酶的结构特点、作用机制,以及影响酶活性的因素。对于“分子生物学”,我希望能从DNA这个生命的密码本开始,了解它的基本结构,即双螺旋的构成,核苷酸的排列顺序如何编码着生命信息。然后,我希望能学习DNA是如何进行自我复制,以保证遗传信息的准确传递,以及RNA是如何从DNA转录而来的,在细胞内扮演着怎样的角色。我希望书中能详细介绍“基因”的概念,它不仅仅是一段DNA序列,更是控制着特定性状的遗传单位,以及基因表达的调控是如何实现,使得细胞能够根据不同的环境和需求,精准地合成所需的蛋白质。在实验技术方面,我希望这本书能像一位经验丰富的导师,手把手地教我如何进行一些基础的实验操作。比如,如何安全有效地提取细胞或组织中的DNA和RNA?如何利用PCR技术扩增特定的DNA片段?如何通过电泳技术分离和检测DNA、RNA和蛋白质?我希望书中能详细介绍每种技术的原理、实验步骤、关键注意事项,以及可能出现的常见问题和解决方案。

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我怀揣着对生命科学的浓厚兴趣,捧起了这本《生物化学与分子生物学实验技术》,期待它能为我打开一扇通往生命奥秘的大门。我希望书中能清晰地阐述“生物化学”的核心概念,它研究的是生命体内的化学过程,从物质代谢到能量转化,再到信息传递,无不包含着精妙的化学原理。我特别想了解“代谢”这一过程,细胞是如何将摄入的营养物质转化为维持生命活动所需的能量和构建物质的?我希望书中能详细介绍主要的代谢途径,如糖代谢、脂代谢和氨基酸代谢,并解释它们之间的相互联系和调控。我还对“信号转导”机制非常好奇,细胞是如何感知外界环境的变化,并通过一系列的信号分子传递,最终作出精确的反应?我希望书中能提供清晰的信号通路示意图和对关键信号分子的介绍。在分子生物学方面,我希望能理解“基因”这一生命的“蓝图”是如何工作的。DNA的复制、转录和翻译这三大核心过程,是生命信息传递的关键环节,我希望书中能用通俗易懂的语言,结合生动的插图,将这些过程一一呈现。我对“基因调控”这一精妙的设计尤为着迷,细胞如何精确地控制基因的表达,以适应不同的生长发育阶段和环境变化?我希望书中能介绍一些经典的基因调控模型。在实验技术方面,我渴望学习那些能够让我们“看见”和“操作”微观世界的工具。例如,如何利用酶促反应来修饰DNA?如何通过基因工程技术构建重组DNA分子?我希望书中能详细介绍这些技术的原理、操作步骤,以及在生物技术领域的广泛应用。

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这本《生物化学与分子生物学实验技术》在我手中,仿佛是一本珍贵的地图,指引我探索生命科学的复杂而迷人的领域。我希望它能从宏观入手,逐步深入到微观层面,帮助我理解生命的本质。在生物化学领域,我期待能了解构成生命体的基本要素,如水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质和核酸。它们各自的化学结构、物理化学性质以及在生命活动中扮演的角色,我希望书中能给予详尽的介绍,并配以清晰的图示。我尤其对“蛋白质”这一生命活动的主要承担者充满好奇。它们的结构是如何与其功能紧密相关的?从简单的线性氨基酸链,到复杂的三维折叠,这个过程是如何实现的?我希望书中能介绍蛋白质一级、二级、三级和四级结构的形成机制,以及蛋白质变性与复性的原理。在分子生物学方面,我希望能深入理解“遗传信息的流动”。DNA是如何储存遗传信息?RNA又是如何作为信使,将遗传信息传递到核糖体,指导蛋白质的合成?我希望书中能清晰地阐述DNA复制、转录和翻译这三大过程的分子机制。我对“基因突变”及其对生命的影响也充满兴趣,基因突变是如何发生的?它会带来怎样的后果?我希望书中能介绍一些常见的基因突变类型及其在疾病发生中的作用。在实验技术方面,我希望能学习那些能够让我们“测量”和“分析”生命分子状态的方法。例如,如何利用分光光度法定量检测核酸或蛋白质的浓度?如何通过质谱技术来鉴定蛋白质的结构和修饰?我希望书中能详细介绍这些技术的原理、操作步骤,以及数据分析方法。

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