临床基础检验学实验指导

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出版者:人民卫生出版社
作者:
出品人:
页数:0
译者:
出版时间:2000-10-01
价格:11.0
装帧:
isbn号码:9787117032629
丛书系列:
图书标签:
  • 临床检验
  • 检验医学
  • 医学检验
  • 实验指导
  • 基础医学
  • 医学教育
  • 本科生
  • 教学参考
  • 实验教学
  • 医学
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具体描述

《现代生物技术基础与应用》 导言:生命科学的宏伟蓝图 本书旨在为生命科学领域的学习者和研究人员提供一个全面、深入且与时俱进的视角,聚焦于支撑当代生物学研究和产业发展的前沿技术——现代生物技术。我们深知,生命现象的复杂性与精妙性,需要借助最尖端的工具和方法才能得以解析。因此,《现代生物技术基础与应用》不仅仅是一本技术手册,更是一部引导读者理解生命科学核心驱动力的知识体系。本书内容严格围绕生物技术的原理、操作规范、应用实例及其伦理考量展开,绝不涉及临床检验的特定操作流程或特定疾病的诊断标准。 第一部分:分子生物学核心技术——解码生命的基石 本部分详尽阐述了支撑几乎所有现代生物技术研究的分子生物学基础技术,这些技术是理解基因、蛋白质及其相互作用的关键钥匙。 第一章:核酸分离、纯化与定量 本章详细介绍了从不同生物样本(如植物组织、细菌、动物细胞乃至环境样本)中高效提取和纯化DNA与RNA的方法。内容涵盖了基于有机溶剂(如酚氯仿法)的经典提取技术,以及现代化的商业试剂盒纯化流程,重点讲解了影响产物质量的关键步骤,如杂蛋白和多糖的去除。此外,对核酸的定量方法进行了深入探讨,包括紫外分光光度法(A260/A280比值分析)和荧光染料法(如Qubit),强调了定量准确性在后续实验中的决定性作用。 第二章:聚合酶链式反应(PCR)及其变体 本章是分子生物学技术的核心内容之一。从Taq酶的发现和热稳定机制开始,系统阐述了标准PCR的反应体系、热循环参数的优化策略,以及常见扩增失败的原因分析与排除。随后,重点介绍了PCR技术的重大拓展: 实时荧光定量PCR (qPCR/RT-qPCR): 详细解析了荧光信号的来源(TaqMan探针、SYBR Green等)、标准曲线的建立、内参基因的选择与验证,以及绝对定量和相对定量的计算模型。本节严格限制在基因表达水平的测定,不涉及任何临床标本的病毒载量测定流程。 高保真PCR与长片段PCR: 探讨了提高扩增准确性和长度的策略,包括使用纠错酶和特殊缓冲液体系。 单细胞PCR技术概述: 简要介绍了单细胞水平基因分析的初步技术进展。 第三章:凝胶电泳与核酸分离技术 本章聚焦于根据分子大小和电荷分离核酸的技术。内容包括: 琼脂糖凝胶电泳: 详细描述了不同浓度的凝胶配制、电泳缓冲液的选择、电压的控制,以及如何通过DNA分子量标准物进行准确的片段大小判断。 非变性与变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE): 区分了两种PAGE的应用场景,特别强调了在分离短链寡核苷酸或分析DNA/RNA二级结构时的优势。 第四章:分子克隆与重组DNA技术 这是构建基因工程载体的基础。本章内容包括: 限制性内切酶的选择与酶切反应优化: 深入分析了不同酶切位点的特性、甲基化对酶切效率的影响,以及如何设计双酶切方案以确保定向插入。 载体构建: 详细介绍各类表达载体(质粒、病毒载体)的结构组成(启动子、选择标记、复制起点),以及连接反应(Ligation)的原理与条件优化。 转化与筛选: 阐述了大肠杆菌、酵母等宿主细胞的转化技术(热激法、电穿孔法),以及抗生素筛选、蓝白筛选等方法在鉴定阳性克隆中的应用。 第二部分:蛋白质工程与组学技术 本部分将视角从核酸转移至生命体的执行者——蛋白质,介绍如何分离、鉴定和修饰蛋白质,以及进行大规模组学分析。 第五章:蛋白质的分离、纯化与表征 本章专注于蛋白质的物理化学性质在分离中的应用: 层析技术: 全面覆盖了凝胶过滤层析(分子筛)、离子交换层析(IEX)和疏水作用层析(HIC)的原理、填料选择和洗脱梯度设计。重点讲解了高分辨率的亲和层析(Affinity Chromatography),包括His-tag/GST-tag的原理及应用。 电泳分离技术: 深入讲解了SDS-PAGE(变性电泳)用于分子量测定,以及2D-PAGE(二维电泳)在蛋白质组学初步分析中的应用。 蛋白质活性检测: 介绍了酶活性的测定方法,如底物转化率的监测,以及通过免疫学方法(如ELISA的原理框架)对特定蛋白质进行定量分析。 第六章:蛋白质组学导论 本章介绍大规模研究蛋白质群体的方法。重点在于: 质谱技术基础: 简要介绍串联质谱(MS/MS)在蛋白质鉴定中的作用原理,以及肽段的数据库检索策略。 蛋白质相互作用研究: 涵盖了酵母双杂交(Y2H)的基本原理(侧重于筛选机制而非临床应用),以及Pull-down实验的设计思路。 第三部分:先进生物技术工具与应用模型 本部分聚焦于当前生物技术领域最热门且最具颠覆性的技术平台。 第七章:基因编辑技术——CRISPR/Cas系统 本章深入剖析了革命性的CRISPR/Cas9系统: 系统结构与机制: 详细解释了Cas9核酸酶、gRNA(向导RNA)的结构与功能,以及其如何通过碱基配对实现对靶序列的特异性切割。 应用设计: 讨论了如何设计高效的gRNA序列,并侧重于介绍其在基因敲除、敲入以及功能验证中的应用流程。本章不涉及任何疾病的基因治疗方案细节。 第八章:细胞与组织培养技术 本章是无菌操作和体外系统构建的基础: 无菌操作与环境控制: 详细规范了超净工作台的使用、培养箱的温湿度控制,以及培养基的无菌配制与筛选。 细胞系的建立与维持: 区分了原代细胞、二倍体细胞系和永生化细胞系的特点,指导如何进行传代、冻存和复苏操作,强调了支原体污染的检测与预防。 转染技术(Transfection): 详细对比了化学法(脂质体)、物理法(电穿孔)在将外源DNA导入真核细胞中的优缺点和操作细节。 第九章:生物技术在工业中的应用概述 本章从宏观角度介绍生物技术如何驱动产业发展,不涉及具体药品的生产工艺细节: 生物制药基础: 概述了重组蛋白药物、单克隆抗体等生物制剂的研发流程,侧重于说明宿主细胞表达系统的选择逻辑。 生物信息学接口: 简要介绍如何利用生物信息学工具(如序列比对、系统发育分析)来辅助生物技术实验的设计和结果解读。 结语:规范、创新与伦理 本书最后强调,所有先进技术的使用必须建立在严格的实验规范和对生物伦理的深刻理解之上。我们鼓励读者在掌握技术的同时,保持批判性思维,并严格遵守科学界的标准操作程序(SOP)和职业道德要求。 本书特点总结: 1. 聚焦原理: 深入解析各类生物技术的核心生化与物理原理。 2. 强调操作: 详述关键实验步骤的优化与故障排除。 3. 体系全面: 涵盖分子生物学、蛋白质组学和基因编辑前沿技术。 4. 严格界限: 内容完全围绕基础研究方法和技术构建,与临床诊断实践保持明确距离。

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说实话,我拿到这本《临床基础检验学实验指导》的时候,并没有抱太高的期望,毕竟作为一本实验指导,我以为它最多就是一本操作手册,枯燥乏味,充其量能让我在实验课上不至于“抓瞎”。但出乎意料的是,这本书的编写风格非常贴近实际操作,语言精炼,重点突出,而且每一个实验项目都配备了详细的图解,从试剂的准备,到仪器的使用,再到结果的判读,都讲得非常透彻。我尤其欣赏的是,书中对实验过程中可能遇到的问题和注意事项都进行了预判和说明,这对于新手来说实在是太宝贵了。我记得有一次在做血凝试验时,我差点因为操作不当而导致结果不准确,幸好及时翻到书里关于“常见误差分析”的部分,才及时纠正了问题。这种前瞻性的指导,让我觉得这本书不仅仅是在“教”我怎么做实验,更是在“帮”我避免犯错,让我能更高效、更准确地完成实验任务,这对于培养严谨的科学态度和扎实的实验技能非常有帮助。

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我是一名刚刚步入临床检验领域的初学者,这本书《临床基础检验学实验指导》就像一位循循善诱的老师,为我打开了通往检验世界的大门。我喜欢书中条理清晰的编排方式,每个实验项目都从目的、原理、试剂、仪器、操作步骤、结果判读以及注意事项等几个方面进行了详细的阐述,让我能够有条不紊地进行学习和操作。书中的插图和表格更是极大地降低了理解难度,很多抽象的概念通过直观的图像得以呈现。最让我受益的是,书中在讲解每一个实验操作时,都会强调其临床意义,让我明白每一个检验项目背后都承载着重要的诊断信息,这极大地提升了我学习的积极性和责任感。以前觉得检验工作就是枯燥地重复,现在我才意识到,每一滴血、每一份样本都可能是一个关乎生命健康的重要线索,这本书让我看到了检验医学的价值和魅力。

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作为一名已经工作多年的检验技师,偶尔翻阅一下《临床基础检验学实验指导》也算是一种“温故而知新”。我不得不说,这本书在很多细节上的处理都非常到位,尤其是那些对于初学者容易忽略但又至关重要的环节。比如,在讲解离心机的操作时,它不仅说明了转速和时间的重要性,还强调了平衡问题,以及不同类型样本的离心要求,这些都是在实际工作中需要反复强调和注意的。此外,书中的“质量控制”部分也写得相当好,它没有简单地罗列QC的指标,而是深入浅出地解释了QC的原理和意义,以及如何通过QC来保证检验结果的准确性,这对于提升检验人员的质量意识非常有帮助。虽然我早已熟练掌握了这些基本操作,但通过阅读这本书,我还是能够从中获得一些新的启发,并且重新审视自己的操作规范,可以说是“常看常新”的一本好书。

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这本《临床基础检验学实验指导》真的是一本意外的惊喜。我之前对检验医学的印象仅仅停留在抽血化验单上的各种指标,觉得离自己很遥远,也有些枯燥。但翻开这本书,我才发现,原来这么多看似复杂的实验背后,有着如此清晰、严谨的操作流程和原理。书中的图示非常直观,即使是初次接触实验的学生,也能迅速把握关键步骤,避免了手忙脚乱。更让我印象深刻的是,它并没有停留在“怎么做”,而是深入浅出地讲解了“为什么这么做”。比如,在讲解血液形态学检验时,作者不仅详细描述了血涂片的制备和染色技巧,还细致地解释了不同血细胞的形态特征与生理功能之间的联系,以及在哪些病理情况下会出现哪些异常。这种“知其然,更知其所以然”的教学方式,极大地激发了我学习的兴趣,也让我对临床检验这门学科有了更深刻的认识,觉得它不仅仅是一门技术,更是一门需要细致观察、严谨分析的科学。

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坦白说,我以前对实验操作总是有种畏难情绪,总觉得各种试剂、仪器、步骤繁琐得不行,《临床基础检验学实验指导》的出现,彻底改变了我的看法。这本书的书写风格非常独特,它没有使用那种冷冰冰、教科书式的语言,而是更像一位经验丰富的老师在耳边细语,手把手地教你。我特别喜欢书里那种“化繁为简”的处理方式,把复杂的原理用通俗易懂的语言解释清楚,把繁琐的操作分解成一个个小步骤,并且每一步都有相应的配图,让人一看就懂,一学就会。而且,这本书的重点非常明确,它不会让你迷失在大量的细节中,而是让你抓住最核心、最关键的部分。我记得有一次在做微生物培养时,我一直不确定如何正确接种,翻开这本书,里面关于“无菌操作”的步骤讲解得极其细致,并且还附带了视频链接,这让我信心倍增,也大大提高了我的实验成功率。

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