生物化学实验技术教程

生物化学实验技术教程 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:华南理工大
作者:赵亚华
出品人:
页数:239
译者:
出版时间:2000-08-01
价格:25.00元
装帧:
isbn号码:9787562315605
丛书系列:
图书标签:
  • 生物化学
  • 实验技术
  • 教学
  • 高校教材
  • 理学
  • 化学
  • 生物
  • 实验指导
  • 分析方法
  • 科研
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具体描述

生物化学实验原理、方法和技术是生命科学等诸多学科的重要研究手段,也是生物技术、农学类本科学生必修的基础实验课程。它不仅是生物化学课程教学重要的组成部分,而且在培养学生分析和解决问题的能力、严谨的科学态度和独立工作的能力方面,有着不可替代的作用。为适应我国高等农业院校生物类教育改革和发展的需要,我们教研室根据多年来生化实验的教学经验和生化学科发展的趋势,在原有校办使用教材的基础上组织力量编写了这本教材。

本书主要内容包括四大部分①生物实验原理与方法概论,概述生化实验原理与方法的基本内容;②基础生化实验部分,汇编了31个基础生化实验,主要作为基础生化实验课的教材;③高级生化实验部分,包括蛋白质、核酸、酶等生物大分子的分离纯化、鉴定以及部分分子生物学基本实验,这一部分主要是为学习生物化学与分子生物学研究技术与方法的学生编写的;④附录部分,汇集了生化与分子生物学实验中经常遇到的各类数据资料,以备查阅。

探秘生命物质的精妙构建:现代分子生物学前沿技术指南 图书名称:现代分子生物学前沿技术指南 图书简介: 本书旨在为生命科学领域的研究人员、研究生以及相关技术人员提供一份详尽且深入的现代分子生物学实验技术操作手册与理论指导。在生物化学和分子生物学飞速发展的今天,掌握前沿、高效的实验技术是进行创新性研究的基石。本书聚焦于那些在当前生命科学研究中具有决定性意义的关键技术,力求实现从基础原理到复杂应用的全覆盖。 第一部分:核酸操作的精深化 本部分将系统地梳理和阐述核酸(DNA和RNA)提取、纯化及定量分析的最新技术和优化策略。我们不仅会回顾经典的酚氯仿抽提法和硅胶柱纯化技术,更会重点介绍适用于微量样本、高难度组织(如福尔马林固定石蜡包埋组织,FFPE)以及特定细胞亚群的快速、高纯度核酸制备方案。 基因组学与转录组学的基石: 高保真PCR与定量PCR(qPCR/RT-qPCR): 深入剖析不同聚合酶的特性、引物设计的理论依据与实际操作中的陷阱。特别关注数字PCR (dPCR) 的原理及其在稀有突变检测和绝对定量中的无可替代的优势。 核酸的修饰与标记: 详细介绍如何在特定位点引入荧光基团、生物素或其他功能性探针。包括使用Click Chemistry(点击化学)等新型偶联技术进行寡核苷酸标记的优化流程。 下一代测序(NGS)文库制备的挑战与应对: 详述从DNA/RNA提取到文库构建(如文库片段化、接头连接、PCR扩增)的每一个关键步骤。针对宏基因组测序、全基因组重测序(WGS)以及RNA测序(RNA-Seq)中面临的GC偏好性、低起始量等问题,提供具体的解决方案和质量控制标准。 第二部分:蛋白质组学的深度解析与功能探究 蛋白质作为生命活动的主要执行者,其结构、相互作用及翻译后修饰(PTMs)的研究是理解生命过程的核心。本书将突破传统的Western Blot的局限,聚焦于更具定量性和高通量的蛋白质分析方法。 蛋白质的制备与稳定化: 探讨不同组织匀浆缓冲液的配方设计哲学,着重于如何最大限度地保留不稳定的蛋白质(如磷酸化蛋白、泛素化蛋白)的天然状态。介绍蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的最佳组合策略。 高分辨率分离技术: 详细介绍二维电泳(2D-PAGE) 在蛋白质组学研究中的应用,及其与高分辨率液相色谱(HPLC) 联用进行复杂蛋白质组分离的技术细节。 质谱(MS)基础与肽段分析: 深入讲解质谱仪的基本原理(如ESI、MALDI),以及如何通过肽段指纹图谱技术(Peptide Mass Fingerprinting, PMF)进行蛋白质鉴定。重点阐述Tandem Mass Spectrometry (MS/MS) 在确定蛋白质序列和进行PTM位点定位中的应用流程。 蛋白质相互作用研究(PPIs): 全面介绍酵母双杂交系统(Y2H) 的优化、免疫共沉淀(Co-IP) 的严格对照设计,以及新兴的生物分子互作技术(如SPR/BLI) 的原理和数据解读。 第三部分:细胞与组织成像学的突破性进展 现代生物学研究越来越依赖于高分辨率、高灵敏度的成像技术来可视化分子事件在活细胞和体内环境中的动态过程。 荧光显微技术(Fluorescence Microscopy)的进阶: 从传统的宽场显微镜过渡到共聚焦显微镜(Confocal Microscopy) 的基本原理和数据采集优化。深入探讨超分辨显微技术(Super-resolution Microscopy),如STED、PALM/STORM,及其在解析细胞器纳米结构方面的应用。 活细胞成像(Live-Cell Imaging)的挑战: 讨论如何维持细胞在成像环境下的生理状态(温度、CO2、湿度控制),以及如何选择对细胞毒性最低的荧光探针和光敏开关分子。介绍FRET/FLIM等基于荧光动力学的方法来定量测量分子间的距离和相互作用。 组织学与免疫组化(IHC/ICC)的标准化: 详述抗体选择、组织包埋和切片的标准操作流程,强调在进行定量IHC分析时,如何避免假阳性和假阴性结果,并引入多重荧光染色(Multiplex Immunofluorescence) 技术来同时分析多个靶点。 第四部分:基因编辑与细胞重编程的精确控制 基因编辑技术是当前生命科学研究中最具革命性的工具之一。本部分专注于CRISPR/Cas系统的应用、优化及其在生物医学中的潜力。 CRISPR/Cas9系统的精确递送与编辑效率优化: 详细比较使用质粒、mRNA和RNP(核糖核蛋白复合物)三种递送方式的优劣。探讨如何通过优化gRNA设计、靶点选择和细胞类型特异性策略来提高同源重组修复(HDR)的效率,并减少脱靶效应。 新型基因编辑工具: 介绍碱基编辑器(Base Editors) 和先导编辑器(Prime Editors) 的作用机制,及其在实现无双链断裂的精确点突变编辑中的优势。 体外细胞培养与分化诱导: 针对干细胞研究,详细介绍诱导多能干细胞(iPSCs)的重编程方法(如SeV载体和非整合系统),以及如何利用化学小分子和特定的生长因子组合,高效地将细胞诱导分化为特定谱系(如神经元、心肌细胞)的技术路径。 本书特色: 本书不仅仅是操作步骤的罗列,更注重从分子层面阐释每项技术背后的物理化学原理,强调实验设计的严谨性、结果的可靠性判断(包括适当的阴性/阳性对照),以及数据处理和生物信息学分析的初步入门。通过大量的图示、流程图以及“故障排除”环节,帮助读者预见和解决实验中可能遇到的实际问题,确保研究的顺利推进。本书是面向实践、面向前沿的权威性参考资料。

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读后感

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用户评价

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这本《生物化学实验技术教程》真是一本宝藏!从拿到书的那一刻起,我就被它严谨又不失生动的排版所吸引。第一眼看去,那些清晰的插图和标注,瞬间就点燃了我对生物化学实验的热情。我一直觉得生物化学实验是那些枯燥无味、充满试剂瓶和仪器的冰冷世界,但这本书却彻底改变了我的看法。它不仅仅是教我如何操作,更是让我理解了每一个实验背后的科学原理。比如说,在讲到蛋白质提取和纯化时,作者并没有直接给出步骤,而是先详细阐述了蛋白质的理化性质,比如等电点、疏水性、分子大小等,然后才引出不同的纯化方法,比如沉淀法、离子交换层析、凝胶过滤层析等等。这种循序渐进的讲解方式,让我能够融会贯通,而不是死记硬背。而且,书中对常用仪器的介绍也非常到位,从显微镜的使用方法,到离心机的原理和操作注意事项,都写得非常详尽。我印象最深刻的是关于酶活性测定的章节,它不仅介绍了底物、产物的检测方法,还详细解释了如何计算酶的活性单位,以及影响酶活性的各种因素,比如pH、温度、底物浓度等,并且通过实验设计来探讨这些因素的影响。这本书的每一个实验都配有详细的步骤说明,甚至细致到试剂的配制比例、反应时间、孵育温度等关键参数。更重要的是,它还提供了实验结果的分析方法和图表绘制指导,这对于初学者来说简直是福音。很多时候,我们做完实验,却不知道如何解读那些“看不懂”的数据,这本书正好解决了我的这个痛点。它教会我如何通过图表来直观地展示实验结果,如何运用统计学方法来分析数据的显著性,如何根据实验数据来推断结论。这本书让我真正体会到了生物化学实验的魅力,它不仅仅是理论知识的实践,更是一种科学探究的过程,是一种解决问题的思维方式。

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《生物化学实验技术教程》这本书,真的是我近期读过最实用、最有价值的一本学术著作了。它给我最大的感受就是“细节决定成败”。在生物化学实验中,任何一个微小的失误都可能导致整个实验的失败,而这本书恰恰就抓住了这一点,将每一个实验环节都进行了极致的细化和解析。我印象最深刻的是在讲“层析技术”这一章时,它不仅仅列出了各种层析方法,比如凝胶过滤、离子交换、亲和层析等,还详细讲解了每种层析的原理、填料的选择、流动相的配置,甚至是如何优化上样量和洗脱梯度。它还特别强调了如何处理在层析过程中可能出现的各种问题,比如“穿峰”、“拖尾”等,并提供了相应的解决方案。这对于在实际操作中经常遇到这类问题的我来说,无疑是雪中送炭。书中对“光谱分析”的讲解也十分到位,从紫外-可见分光光度计的使用,到荧光分光光度计的原理和应用,都进行了详尽的介绍。它还教我如何根据不同物质的吸收或发射光谱来定量分析,如何通过建立标准曲线来测定未知样品的浓度。而且,书中对“分子生物学常用技术”的讲解也非常实用,比如DNA的提取、PCR扩增、凝胶电泳分离DNA片段等等,这些技术在现代生物化学研究中几乎是必不可少的。它不仅教我怎么做,更让我理解了为什么这样做,每个步骤背后的生化反应是什么。这本书的图文并茂,尤其是那些精美的实验流程图和仪器结构图,让我能够更直观地理解复杂的概念。读完这本书,我感觉自己对生物化学实验的理解上升了一个新的高度,从“知其然”到“知其所以然”。

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《生物化学实验技术教程》这本书,在我看来,是一本真正站在读者角度思考的教科书。它没有那些晦涩难懂的理论堆砌,而是将复杂的实验技术,以一种清晰、系统、循序渐进的方式呈现出来。我特别欣赏它在介绍“分子标记技术”时,对各种标记方法的原理和应用进行了详细的阐述,比如荧光标记、生物素标记、放射性同位素标记等,并且还提到了如何根据实验目的来选择合适的标记方法。它还讲解了标记物的检测和定量方法,这让我对分子标记技术在免疫分析、核酸杂交等领域的应用有了更清晰的认识。书中在讲解“细胞信号转导”相关的实验技术时,它不仅介绍了如何通过Western Blotting来检测信号通路中的关键蛋白磷酸化水平,还提到了如何利用激酶抑制剂或激活剂来探究信号通路的调控机制。它还包含了“细胞凋亡检测”等内容,比如Annexin V/PI染色、caspase活性检测等,这些技术对于理解细胞的生死过程至关重要。这本书的每一个章节都设计得非常合理,既有理论讲解,又有操作指导,还有结果分析和疑难解答,让我觉得这本书不仅仅是一本教材,更是一位随身的“实验顾问”。它让我从一个对生物化学实验感到茫然的初学者,逐渐成长为一个能够独立思考、动手操作的实验者。

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不得不说,《生物化学实验技术教程》这本书,在实验方法的选择和优化方面,给了我极大的启发。我一直觉得,好的实验设计是成功的一半,而这本书恰恰在这一点上做得非常出色。它在讲解“酶活性测定”时,不仅仅是介绍了如何进行动力学分析,还详细探讨了如何选择合适的底物浓度、反应时间和缓冲体系,以确保酶活性的准确测定。它还提供了一些常见酶的活性测定案例,以及如何处理实验数据中的偏差。这让我明白了,测定酶活性不仅仅是“加东西,看反应”,更是一种科学的判断和权衡。书中对“基因克隆与表达”技术的介绍也让我大开眼界。它详细讲解了载体的选择、基因的亚克隆、转化、筛选等一系列操作,并且解释了为什么需要这些步骤。它还提到了如何利用表达载体来获得目的蛋白,以及如何评估蛋白的表达水平和活性。这让我觉得,分子生物学技术与生物化学实验是紧密相连的,它们共同构成了现代生命科学研究的基石。此外,它还包含了“蛋白质相互作用研究”等前沿技术的介绍,比如酵母双杂交、免疫共沉淀等。虽然这些技术听起来有些高深,但书中都用非常清晰的图示和文字进行了讲解,让我能够理解它们的基本原理和应用。这本书让我看到了生物化学实验的无限可能,也激发了我对更复杂、更前沿的研究方法的兴趣。

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《生物化学实验技术教程》这本书,我可以说是在实验操作的各个细节上都得到了极大的启发。我一直觉得,一本好的实验教程,不仅要告诉你“做什么”,更要告诉你“为什么这么做”。而这本书恰恰做到了这一点。在讲解“核酸提取与纯化”时,它不仅仅是简单地给出“加入XX缓冲液,离心”这样的指令,而是详细解释了每种缓冲液的成分和作用,比如EDTA如何螯合Mg2+,从而抑制核酸酶的活性;CTAB如何与DNA形成复合物,便于沉淀;盐析如何改变蛋白质的溶解度,使其沉淀分离。这种深入的原理讲解,让我能够举一反三,理解不同条件下实验结果的变化。书中对“蛋白质的SDS-PAGE电泳”的讲解也非常细致,它详细介绍了SDS的作用,如何使蛋白质变性并携带负电荷,以及 PAGE 胶的构成和原理。它还提供了一些判断电泳条带是否清晰、如何优化电泳参数的技巧,这对于我这种经常在电泳问题上犯愁的人来说,简直是福音。此外,它还提到了Western Bloting 的基本原理和操作步骤,包括抗原的制备、抗体的选择、显色检测等,这让我对后续的蛋白质鉴定有了更清晰的认识。书中还包含了大量的实验数据分析和图表绘制的指导,例如如何根据酶活性随温度变化的曲线来确定最适温度,如何利用聚势图来分析抑制剂的作用模式。这种从实验设计到数据分析的全面指导,让我觉得这本书不仅仅是一本操作手册,更是一本科学研究的指南。

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我发现,《生物化学实验技术教程》这本书真的非常适合那些对生物化学实验充满热情但又缺乏实践经验的读者。它为我提供了系统性的知识体系和实用的操作技巧。我尤其欣赏它在介绍“色谱分析”时,对各种色谱原理的细致讲解,比如疏水相互作用色谱、亲和色谱等,它不仅解释了它们与离子交换和凝胶过滤色谱的区别,还提供了如何在实际操作中选择合适的色谱介质和洗脱条件。这本书让我理解了,色谱分析远不止是“把东西装进去,跑出来”那么简单,它背后蕴含着复杂的物理化学原理。书中对“光谱学在生物化学中的应用”也进行了深入的探讨,从紫外-可见吸收光谱到荧光光谱,再到圆二色谱,它都进行了详细的介绍,并提供了如何利用这些光谱信息来分析蛋白质的二级结构、分子构象等。这让我对蛋白质结构与功能的关系有了更深刻的理解。此外,它还涵盖了“放射性同位素标记技术”和“免疫学技术”在生物化学研究中的应用,比如放射性示踪法的原理和注意事项,ELISA技术的步骤和结果解读等。这些技术虽然听起来有些专业,但书中都用通俗易懂的语言进行了讲解,并且配有大量的示意图,让我能够轻松掌握。这本书不仅教会了我“如何做”,更让我明白了“为什么这样做”,这是一种从“术”到“道”的升华,让我对生物化学实验有了更深层次的理解和感悟。

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我一直对生物化学实验抱有敬畏之心,觉得那是极其严谨且充满挑战的领域。而《生物化学实验技术教程》这本书,就像一把金钥匙,为我开启了通往这个领域的大门。它以一种非常系统和全面的方式,介绍了生物化学实验所需的各种技术和方法。我尤其喜欢它在介绍“蛋白质的鉴定与定量”时,对各种化学显色反应的详细描述,比如 Lowry法、Bradford法等,它不仅给出了操作步骤,还解释了这些方法背后的生化原理,以及它们的优缺点和适用范围。这让我能够根据实验需求,选择最合适的方法。书中对“细胞培养技术”的介绍也让我受益匪浅。从无菌操作的规范,到培养基的选择和配制,再到细胞的计数和传代,每一个细节都被讲得清清楚楚。它还介绍了一些常用的细胞株,以及在细胞培养过程中可能遇到的问题和解决方法。这对于那些想要进入细胞生物学领域的研究者来说,绝对是一本不可多得的参考书。而且,这本书对“酶动力学”的讲解也相当深入,它不仅介绍了Michaelis-Menten方程,还讲解了如何通过Lineweaver-Burk图等方法来计算Km和Vmax值,以及如何分析抑制剂对酶活性的影响。这种由浅入深的讲解方式,让我能够逐步掌握这些复杂的概念。这本书的语言风格也非常严谨,但又不失通俗易懂,即使是初学者也能轻松理解。它就像一位经验丰富的导师,耐心地陪伴我一起探索生物化学实验的奥秘,让我从中获得了前所未有的满足感和成就感。

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《生物化学实验技术教程》这本书,让我最大的感受就是它的“实用性”和“全面性”。它不仅仅是一本操作手册,更像是一本“工具箱”,里面包含了解决各种生物化学实验问题的“工具”。我特别欣赏它在介绍“缓冲液制备”时,详细讲解了不同pH范围的缓冲体系,以及如何根据实验需求来选择合适的缓冲对和浓度。它还提到了缓冲液的储存和注意事项,这些看似琐碎的细节,却往往是影响实验结果的关键。书中在讲解“蛋白质变性与复性”时,它不仅介绍了SDS、尿素等常用的变性剂,还详细解释了变性剂是如何破坏蛋白质的四级、三级和二级结构的,以及如何通过改变条件(如去除变性剂、改变pH或离子强度)来实现蛋白质的复性。它还提到了不同蛋白质的复性能力存在差异,需要根据具体情况进行优化。这让我对蛋白质的结构与功能有了更深的理解。此外,它还包含了“脂质的提取与分析”以及“糖类的鉴定与定量”等内容,这些也是生物化学研究中非常重要的组成部分。书中对这些物质的提取、分离和鉴定方法都进行了详细的介绍,并且提供了相关的实验案例。这让我觉得,这本书就像一本“生物化学实验百科全书”,无论我遇到什么问题,都能在这里找到答案。

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《生物化学实验技术教程》这本书,我最喜欢的一点就是它对实验的“预设”和“反思”环节的处理。在讲解每一个实验之前,它都会引导读者思考“这个实验的目的到底是什么?”,在实验结束后,又会提示读者“这个实验结果说明了什么?可能存在哪些误差?”。这种科学研究的思维方式,贯穿了整本书。我特别受益于它在“生物样品处理”章节中,对不同类型生物样品(如血液、组织、细胞)的采集、保存和处理方法进行了详细的说明。它解释了为什么需要对样品进行预处理,比如匀浆、裂解、去除杂质等,以及不同的处理方法对后续实验结果可能产生的影响。这让我意识到,实验的成功往往取决于样品处理的规范性。书中在介绍“蛋白质纯化”技术时,它不仅讲解了超滤、透析等基本操作,还详细对比了不同纯化方法的优缺点,比如离子交换色谱的pH选择、疏水相互作用色谱的盐浓度梯度等。它还提到了如何根据蛋白质的等电点、分子量、亲和性等特性来设计合理的纯化方案。这让我觉得,纯化蛋白质的过程就像是一场精密的“寻宝”游戏,需要策略和技巧。此外,书中还包含了“分子量测定”和“电泳技术”的进阶内容,比如利用质量谱来精确测定蛋白质分子量,以及二维凝胶电泳在蛋白质组学研究中的应用。这些内容让我对生物化学实验的深度和广度有了更深的认识,也激发了我进一步探索的欲望。

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读完《生物化学实验技术教程》之后,我感觉自己仿佛打开了一个全新的世界。我一直以来对生物化学都充满好奇,但总觉得实验操作是一道难以逾越的门槛。这本书的出现,彻底打消了我的顾虑。它以一种非常友好的方式,将那些复杂的实验技术变得触手可及。我特别欣赏书中对每一个实验的“前言”部分,它会简要介绍这个实验的研究背景和意义,以及它在生物化学领域的重要性。这让我不只是机械地执行操作,而是能理解我正在做什么,以及为什么这样做。比如,在讲解核酸提取时,作者不仅仅告诉我要用裂解液,还解释了裂解液的作用原理,比如它如何破坏细胞膜和细胞核膜,释放出核酸。然后,它又介绍了酚-氯仿提取法,并详细说明了氯仿如何促进有机相和水相的分离,酚如何使蛋白质变性沉淀。读到这里,我才真正明白为什么这些步骤是必不可少的。书中对常见实验的改进和优化也有涉及,这对于有一定基础的读者来说,是非常有价值的。例如,在SDS-PAGE电泳部分,它不仅介绍了标准的制胶和电泳流程,还提到了如何根据蛋白质的大小来调整分离胶的浓度,以及如何优化电压和时间以获得更好的分离效果。而且,书中对各种仪器设备的维护和保养也有一定的指导,这在实际操作中非常重要,能够保证实验的顺利进行,也能延长仪器的使用寿命。最让我惊喜的是,它还提供了很多实验案例分析,通过分析真实的研究数据,来帮助我们理解理论知识如何应用于实际问题。这本书就像一位经验丰富的导师,耐心细致地引导我一步步走进生物化学实验的殿堂,让我从一个门外汉,逐渐变成一个能够独立思考、动手操作的实验者。

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