分子克隆手册

分子克隆手册 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:中国农业出版社
作者:戈莱米斯 编
出品人:
页数:561
译者:贺福初
出版时间:2004-1
价格:120.00元
装帧:
isbn号码:9787109091580
丛书系列:
图书标签:
  • 行号
  • 蛋白質組學
  • 分子克隆
  • 分子生物学
  • 基因工程
  • 生物技术
  • 实验指南
  • 生物化学
  • DNA技术
  • PCR
  • 载体
  • 基因表达
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具体描述

研究蛋白质——蛋白质相互作用,不仅可以从分子水平揭示蛋白质的功能,而且对于提示生长、发育、分化和凋亡等生命活动规律至关重要,为探讨重大疾病的机理、疾病治疗、疾病预防和新药开发提供重要的理论基础。

  本书共35章。首先介绍了信号转导和人类遗传学/药物基因组学等问题,并强调蛋白质——蛋白质相互作用在其中发挥关键作用。然后分三部分介绍了如下内容:6个基于标准分子生物学、生物化学和微生物学技术建立起来的、用于分析蛋白质——蛋白质相互作用的方法;6种鉴定和识别蛋白质——蛋白质相互作用的生物物理学方法;近期改进过的与GST沉降和免疫沉淀相关技术、两个补体系统、渐增截断方法、蛋白成束、高通量方法。最后讨论蛋白质——蛋白质相互作用数据的整合及模型构建,以及这些模型在临床治疗方面的应用。

  本书内容详尽、具体,为蛋白质——蛋白质相互作用研究的关键技术提供操作指南,并提供大量识别和操作蛋白质的技术和相关综述,覆盖了迄今最完全、最有效的分析蛋白质——蛋白质相互作用的技术及原理,从理论的阐述到相关方案的列举和比对,包括经典的分子生物学、生物化学和微生物学方法、生物物理学方法、计算分析和相互作用模型的构建等,系统性好,浏览方便,是生命科学研究者很好的工具书。

《细胞因子:生命活动的信号信使》 内容简介 在浩瀚的生命科学领域,细胞因子扮演着至关重要的角色,它们如同精密而高效的信号系统,调控着细胞间的相互作用,驱动着生命体的生长、发育、免疫应答、组织修复乃至病理过程。本书《细胞因子:生命活动的信号信使》并非仅仅对细胞因子进行简单的罗列和分类,而是深入探究这些分子信使的起源、演化、结构、功能、调控机制及其在疾病发生发展中的错综复杂的作用。本书旨在为生命科学研究者、医学生以及对生命奥秘充满好奇的读者,提供一个全面、深入且富有洞察力的细胞因子知识体系。 第一章 细胞因子的定义与分类 本章将从宏观视角出发,清晰界定“细胞因子”这一概念。我们将追溯其历史渊源,理解细胞因子作为细胞间通信分子在不同生命活动中的核心地位。随后,我们将基于细胞因子的来源、结构特点、主要功能等维度,对其进行系统性的分类。这包括但不限于: 免疫细胞因子: 如白细胞介素(ILs)、肿瘤坏死因子(TNF)、干扰素(IFNs)等,它们是免疫系统识别、激活和调控的关键分子。我们将细致阐述不同亚型的白细胞介素如何在免疫应答的不同阶段发挥作用,如IL-1与炎症的起始,IL-2与T细胞的增殖,IL-4与B细胞的激活,IL-10与免疫抑制等。肿瘤坏死因子家族则将在抗肿瘤免疫和炎症反应中占据重要篇幅。干扰素家族,特别是I型和II型干扰素,将是我们在抗病毒和抗肿瘤免疫章节中的重要讨论对象。 造血生长因子: 如集落刺激因子(CSFs)、促红细胞生成素(EPO)、血小板生成素(TPO)等,它们是调控骨髓细胞生成、分化和成熟的关键。我们将深入剖析不同种类的集落刺激因子如何特异性地影响粒细胞、巨噬细胞、单核细胞的生成,以及促红细胞生成素在红细胞数量调控中的关键作用。 趋化因子(Chemokines): 这类细胞因子以其引导细胞迁移的能力而著称。我们将详细介绍趋化因子及其受体的多样性,以及它们在招募免疫细胞到感染部位、参与胚胎发育、肿瘤转移等过程中的作用。 生长因子: 虽然生长因子与细胞因子在某些功能上有所重叠,但在本章中,我们将侧重于那些在细胞增殖、分化和存活中发挥核心作用的细胞因子类生长因子,如转化生长因子(TGFs)家族,它们在组织修复、细胞凋亡和免疫调控中具有双重性作用。 其他细胞因子: 涵盖一些在特定生理病理过程中发挥重要作用的细胞因子,如肿瘤微环境中的细胞因子,以及与神经内分泌系统相互作用的细胞因子。 第二章 细胞因子的结构与作用机制 本章将深入细胞因子的微观世界,探究它们的分子结构如何决定其生物活性,以及它们是如何实现跨细胞信号传递的。 三维结构与功能相关性: 我们将分析不同细胞因子家族的典型三维结构,如球状蛋白、螺旋状蛋白等,并阐明这些结构特征如何影响其与受体的结合特异性、稳定性和信号转导效率。例如,SDS-PAGE和Western Blot等常用技术在分析细胞因子纯度和表达水平中的应用,以及X射线晶体学和NMR技术在解析细胞因子三维结构中的贡献。 细胞因子受体: 细胞因子与细胞间的对话离不开特异性的受体。本章将详细介绍细胞因子受体的结构特点,特别是细胞因子受体超家族,包括跨膜结构域、细胞内信号转导域等。我们将重点讨论JAK/STAT信号通路、MAPK信号通路、NF-κB信号通路等细胞因子激活的主要信号转导途径,并解析这些通路如何将细胞外的信号转化为细胞内的响应。 信号转导复合物的形成: 细胞因子与受体的结合并非孤立事件,而是常常涉及多个蛋白分子的组装,形成复杂的信号转导复合物。我们将探讨这些复合物的动态变化,以及它们在信号放大和精细调控中的作用。 细胞因子的网络调控: 细胞因子并非独立工作,而是相互交织形成复杂的调控网络。本章将介绍细胞因子间的协同作用、拮抗作用以及正负反馈调控机制,强调这种网络化的调控方式如何确保生命活动的有序进行。 第三章 细胞因子在生命活动中的核心作用 本章将聚焦细胞因子在维持生命体正常运转中所扮演的关键角色,从生理学的角度揭示其不可或缺性。 免疫应答的调控: 细胞因子是免疫系统“指挥官”。我们将详细阐述细胞因子如何在先天免疫和适应性免疫中发挥作用。先天免疫部分,将重点介绍巨噬细胞、树突状细胞等抗原呈递细胞分泌的细胞因子如何启动炎症反应,招募中性粒细胞等效应细胞。适应性免疫部分,将深入探讨T淋巴细胞和B淋巴细胞在不同细胞因子环境下的分化方向,如Th1、Th2、Th17、Treg细胞的形成,以及B细胞浆细胞的转化和抗体产生。 组织发育与修复: 从胚胎发育到成年后组织的损伤修复,细胞因子始终参与其中。我们将探讨生长因子类细胞因子在细胞增殖、迁移、分化中的作用,以及它们如何指导胚胎器官的形成。在组织损伤修复方面,我们将重点关注巨噬细胞等细胞分泌的细胞因子如何在炎症期、增殖期和重塑期发挥作用,驱动血管生成、胶原沉积和疤痕形成。 造血与血液系统稳态: 细胞因子对血液细胞的生成至关重要。我们将详细阐述造血干细胞的自我更新和分化,以及各种集落刺激因子、促红细胞生成素、血小板生成素如何精确调控不同血细胞系的生成与成熟,维持血液系统的稳态。 神经系统功能: 越来越多的证据表明,细胞因子也参与神经系统的发育、功能和可塑性。我们将探讨神经胶质细胞分泌的细胞因子如何影响神经元的存活、突触形成和信号传递,以及它们在学习记忆和情绪调控中的潜在作用。 生殖与代谢: 细胞因子在生殖系统的发育、排卵、受精以及怀孕期间的维持也发挥作用。同时,它们也与代谢调控紧密相关,影响能量平衡和物质转化。 第四章 细胞因子与疾病:病理生理学的视角 本章将从病理生理学的角度,剖析细胞因子在各种疾病发生发展中所扮演的角色,以及它们如何成为疾病诊断和治疗的靶点。 炎症性疾病: 慢性炎症是许多疾病的共同特征。我们将深入探讨细胞因子在类风湿性关节炎、炎症性肠病、银屑病等自身免疫性疾病中的病理作用。例如,TNF-α在类风湿性关节炎中的促炎作用,IL-17在银屑病中的关键作用。 感染性疾病: 细胞因子在抵御病原体入侵和清除感染中发挥双重作用。一方面,它们启动免疫应答;另一方面,过度或失调的细胞因子释放可能导致“细胞因子风暴”,加剧组织损伤,甚至危及生命。我们将分析细菌、病毒、真菌等感染如何诱导特定的细胞因子应答。 肿瘤生物学: 细胞因子在肿瘤的发生、发展、转移和免疫逃逸中扮演着复杂而多面的角色。我们将探讨肿瘤细胞自身分泌的细胞因子如何促进肿瘤生长和血管生成,以及免疫细胞分泌的细胞因子如何参与抗肿瘤免疫或支持肿瘤生存。肿瘤微环境中的细胞因子网络将是重点分析对象。 心血管疾病: 细胞因子参与动脉粥样硬化的形成和进展,影响血管内皮功能、炎症反应和血栓形成。我们将分析IL-1、TNF-α等细胞因子在心肌梗死和心力衰竭中的作用。 神经退行性疾病: 神经炎症是阿尔茨海默病、帕金森病等神经退行性疾病的重要病理特征。我们将探讨小胶质细胞等神经胶质细胞分泌的细胞因子如何介导神经元的损伤和死亡。 代谢性疾病: 细胞因子与胰岛素抵抗、肥胖、2型糖尿病等代谢性疾病密切相关。我们将分析脂肪细胞因子(如瘦素、脂联素)在能量代谢中的作用,以及炎症细胞因子对胰岛素信号通路的影响。 第五章 细胞因子在现代生物医学中的应用 本章将聚焦细胞因子在现代生物医学中的实际应用,从基础研究到临床实践,展望其广阔前景。 细胞因子作为诊断标志物: 许多疾病的发生发展与特定的细胞因子水平变化相关。我们将介绍如何利用细胞因子作为疾病早期诊断、预后判断和疗效评估的生物标志物。例如,CRP(C反应蛋白,一种急性期反应蛋白,常与IL-6等细胞因子共同升高)在感染和炎症中的应用。 细胞因子在药物开发中的作用: 靶向细胞因子的药物是治疗多种炎症性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤的重要手段。我们将介绍针对TNF-α、IL-6、IL-1等细胞因子及其受体的单克隆抗体、小分子抑制剂等药物的研发进展和临床应用。例如,针对类风湿性关节炎的TNF抑制剂,针对银屑病的IL-17抑制剂。 细胞因子在再生医学和组织工程中的应用: 细胞因子在促进细胞增殖、分化和组织再生方面具有巨大潜力。我们将探讨如何利用细胞因子指导干细胞的分化,以及在组织工程构建中促进组织修复和再生。 细胞因子在免疫治疗中的应用: 细胞因子本身或作为免疫治疗策略的一部分,在抗肿瘤免疫、疫苗开发等方面发挥着重要作用。我们将探讨细胞因子在过继性免疫治疗、免疫检查点抑制剂联合治疗中的应用。 细胞因子的未来研究方向: 本章最后将展望细胞因子研究的未来趋势,包括更精细的信号通路解析、新型细胞因子的发现、个体化细胞因子治疗策略的开发,以及细胞因子在合成生物学等新兴领域的应用潜力。 《细胞因子:生命活动的信号信使》力求以清晰的逻辑、严谨的论证和丰富的实例,为读者构建一个关于细胞因子的立体认知框架。本书不仅是理解生命活动基本原理的重要参考,更是把握现代生物医学发展前沿的关键钥匙。通过对细胞因子这一核心分子家族的深入剖析,我们希望能激发读者对生命科学更深层次的探索与思考。

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用户评价

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坦白讲,我过去最大的困扰是理论和实践之间的鸿沟。大学里教的理论知识,到了实际操作台前,总感觉像是隔着一层毛玻璃,细节的东西总对不上。但这本手册的独特之处在于,它对“故障排除”(Troubleshooting)部分给予了空前的重视。它没有将故障排除视为一个附加章节,而是将其内嵌到了每一个关键操作步骤的讲解之后。比如,在讲完限制性内切酶消化后,它紧接着会列出一串常见问题:“如果你的酶切效率低下怎么办?”“如果跑胶时DNA拖尾严重怎么办?”并针对每一种情况,给出了三到四种可能的根本原因分析和对应的修正方案,有些甚至细致到“检查你的dNTPs是否已经冷冻循环超过五次”。这些实战经验的总结,是作者多年一线经验的结晶,是任何标准操作程序(SOP)都难以涵盖的“灰色地带”。正是这些宝贵的“避坑指南”,让我节省了大量宝贵的时间和昂贵的试剂。这本书真正做到了,不仅告诉你如何成功,更重要的是,告诉你当事情出错时,该如何冷静地找到问题所在并解决它。

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我得说,这本书在概念梳理上的功力深厚得令人惊叹。我之前尝试过几本其他同主题的书籍,它们要么过于侧重历史发展,读起来像在听故事,缺乏操作指导;要么就是纯粹的“菜谱式”罗列步骤,让人只知其然不知其所以然。而《分子克隆手册》成功地找到了那个完美的平衡点。它没有沉溺于过多的哲学思辨,而是用一种非常务实、目标导向的方式,将那些看似独立的分子技术,如PCR、限制性内切酶消化、胶电泳、载体构建等,串联成一个逻辑严密的体系。每一次介绍新的技术,作者都会先给出其在整个分子生物学研究链条中的“定位”,然后深入讲解原理,最后才进入操作细节。这种结构让我受益匪浅,我不再觉得这些技术是一堆孤立的技能点,而是构成了一个有机的整体。更棒的是,它对每种方法的优缺点进行了坦诚的比较,这一点非常重要。要知道,在真实世界中,没有一种技术是万能的,知道什么时候该用A方法而不是B方法,比单纯会做A方法重要得多。这本书就像一位冷静的战略顾问,指导我如何根据不同的研究目标,选择最优的技术路径。

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这本书的广度和深度,对于任何想要长期从事生物技术领域研究的人来说,都是一种投资。我特别欣赏它在不同技术平台间的整合能力。它不只是聚焦于某一种特定的技术流派,而是非常全面地覆盖了从传统的质粒构建到现代的高通量测序文库制备等一系列技术。例如,当我们讨论到基因表达研究时,它不仅仅停留在传统的Northern Blot或cDNA文库构建,而是迅速衔接到最新的CRISPR/Cas9介导的基因编辑和下一代测序(NGS)文库的准备工作。这种跨越式的知识覆盖,使得这本书具有极强的生命力和前瞻性。即便是今天最新的技术,这本书中也能找到相关的理论基础和操作逻辑的影子,这让我感觉这不仅仅是一本关于“克隆”的书,而是一部关于“基因操作艺术”的百科全书。它为我们这些研究人员提供了一个坚实的基础,让我们能够快速学习和适应实验室中不断涌现的新工具和新技术,保证我们的研究始终站在科技前沿。

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这本书的排版和图示设计,简直是视觉享受!说实话,很多专业书籍因为内容密度太大,读起来眼睛非常累,而且那些黑白的手绘图有时晦涩难懂。但翻开这本《分子克隆手册》,我立刻感受到了一种现代化的设计理念。它的插图极其精美,色彩运用得恰到好处,能瞬间抓住复杂的分子交互过程的关键点。例如,在解释DNA插入载体时的正向和反向连接机制时,书中的彩色示意图比我听过的任何一次讲座都要直观清晰。而且,它对流程图的组织也非常有效率。在介绍一个多步骤的实验方案时,它不会一下子把所有信息倾泻出来,而是采用分层展示,先给出一个宏观流程图,读者心中有了全局概念后,再逐层深入细节。这种“先画骨架再填血肉”的讲解方式,极大地降低了信息过载的可能性。我发现自己可以更轻松地在不同章节间跳转,并且能迅速回忆起某个特定步骤在整个实验体系中的位置。对于需要频繁查阅和回顾的工具书来说,这种用户体验上的优化,是衡量其是否优秀的绝佳标准。

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这本书简直是为我这种初入科研领域的新手量身定制的宝典!我记得当时拿到手的时候,厚厚的几百页让我有点望而却步,心想这得啃到什么时候去。但翻开第一页,那种清晰、详尽的叙述方式立刻抓住了我的注意力。它不像有些教科书那样堆砌着晦涩难懂的理论公式,而是更像一位经验丰富的前辈,手把手地教你如何在实验室里操作。特别是关于实验设计和结果分析那几个章节,简直是救星!我之前总是在设计对照组和设置样本量上感到迷茫,总是担心实验结果的可靠性。这本书里不仅详细解释了每一步背后的生物学原理,还提供了大量的“陷阱规避指南”,那些小小的注意事项,往往是教科书上不会细说的,但在实际操作中却能决定实验的成败。比如,它会提醒你某种酶在不同温度下的活性差异,或者某个缓冲液的微小成分变动可能对下游反应产生的影响。我已经按照书中的建议优化了我的几个关键步骤,现在的数据重复性和一致性明显提高了,这让我的导师都对我刮目相看。这本书对我最大的价值,是帮我建立了一个扎实的、实践性的知识框架,让我不再是“盲人摸象”,而是能带着清晰的路线图去面对复杂的分子生物学难题。

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