发育毒理学研究方法和实验技术

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出版者:北京医科大学出版社
作者:李勇
出品人:
页数:364
译者:
出版时间:2000-5-1
价格:40.00元
装帧:平装(无盘)
isbn号码:9787810348591
丛书系列:
图书标签:
  • 生物学
  • 医学
  • 发育毒理学
  • 毒理学
  • 实验技术
  • 研究方法
  • 生殖毒性
  • 胚胎毒性
  • 致畸性
  • 药物安全性
  • 风险评估
  • 动物实验
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具体描述

生物工程与分子生物学前沿技术:从基础理论到实践应用 本书聚焦于当前生命科学领域中,特别是生物工程和分子生物学方向的前沿研究方法和实验技术。全书旨在为从事相关领域研究的科研人员、研究生以及专业技术人员提供一套系统、深入且具有高度实践指导意义的技术手册和理论参考。 本书内容涵盖了构建新一代生物分子工具、解析复杂生命过程的分子机制、以及开发新型生物制剂和诊断系统的核心技术。我们摒弃了对单一、狭窄应用领域的过度聚焦,转而构建一个广阔的、涵盖多学科交叉技术的知识体系,确保读者能够在新兴生物技术浪潮中保持竞争力。 --- 第一部分:高通量基因组学与转录组学解析技术 本部分是理解生命信息编码与调控的基础,详细阐述了从样本制备到数据解读的全流程技术体系。 1. 新一代测序(NGS)平台的优化与应用: 深入剖析了Illumina、PacBio及Oxford Nanopore等主流测序平台的硬件原理、化学反应细节及其适用场景。重点讨论了如何针对不同样本类型(如FFPE组织、循环肿瘤DNA、单细胞悬液)设计特异性的文库构建策略,以最大限度减少偏倚。内容涵盖片段化技术(酶切与超声波)、Adapter Ligation的效率优化,以及质量控制标准(Q值评估与GC含量校正)。 2. 单细胞多组学技术集成: 单细胞分析是当前生物学研究的热点。本书详尽介绍了单细胞RNA测序(scRNA-seq)的微流控技术(如10x Genomics平台)和基于液滴分离的方法。更进一步,本书探讨了如何将功能信息整合进来,包括: 单细胞ATAC-seq(Assay for Transposase-Accessible Chromatin using sequencing): 解析染色质开放性与转录因子结合位点。 空间转录组学(Spatial Transcriptomics): 利用Visium或Slide-seq等技术,在保留组织形态信息的同时,实现全基因组的表达定量,重点讲解了数据配准和空间聚类分析的方法。 3. 宏基因组学与微生物组分析: 针对环境样本和人体微生物组研究,本书区分了宏基因组(Shotgun Metagenomics)和16S rRNA靶向测序的优缺点。关键技术点在于:环境DNA的提取纯化(克服腐殖酸等抑制剂干扰)、数据预处理(去宿主序列、去冗余)和功能注释(使用KEGG、COG数据库进行代谢通路重建)。 --- 第二部分:蛋白质组学与结构生物学的前沿策略 理解细胞功能,必须深入到蛋白质的层面。本部分专注于蛋白质的鉴定、定量、修饰研究以及高分辨率的三维结构解析。 4. 定量蛋白质组学:从标记到质谱分析: 本书详细对比了基于标签(TMT, iTRAQ)和无标签(Label-free)定量方法的优劣及其在不同通量研究中的适用性。在质谱分析层面,重点介绍了高分辨率串联质谱(MS/MS)的数据采集模式(如Data Dependent Acquisition, DDA与Data Independent Acquisition, DIA)的选择标准,以及如何利用谱图数据库(如MaxQuant, Proteome Discoverer)进行高效的数据处理和统计学验证。 5. 蛋白质翻译后修饰(PTMs)的鉴定与功能分析: PTMs是调节蛋白质功能的主要机制。本书深入探讨了磷酸化、泛素化、糖基化等关键修饰的富集策略(如金属亲和层析、抗体捕获),并结合使用特异性抗体阵列和活性质谱技术来追踪修饰位点的动态变化。 6. 冷冻电镜(Cryo-EM)与高分辨率结构解析: Cryo-EM已成为解析大分子复合物结构的主流技术。本书着重讲解了样本的玻璃态冷冻技术、成像参数的优化、以及数据处理流程,包括2D分类、3D重建和局部精度优化。同时,也涵盖了X射线晶体学在解析小型、结构稳定蛋白时的应用,包括晶体生长条件筛选和SAD/MAD数据收集流程。 --- 第三部分:生物分子操控与新型生物技术平台构建 本部分侧重于主动操纵生命体与分子的技术工具,强调精确性与可编程性。 7. 先进基因编辑技术:CRISPR系统的拓展与优化: 超越基础的Cas9核酸酶,本书探讨了更精密的基因编辑工具: 碱基编辑器(Base Editors)和先导编辑器(Prime Editors): 它们如何实现无双链断裂的精确点突变或小片段插入/缺失,以及如何选择合适的脱靶评估方法。 表观遗传调控工具: 例如,利用dCas9融合表观遗传效应因子(如DNA甲基转移酶或组蛋白修饰酶)对基因表达进行靶向调控的研究设计。 8. 体外系统与人工细胞构建: 本书介绍了如何构建体外转录/翻译系统(Cell-Free Systems)用于快速筛选和蛋白质生产。更进一步,我们探讨了人工囊泡(Liposomes/Polymersomes)的构建技术,以及如何将复杂的信号通路元件(如合成基因回路)加载到这些人工微环境中,模拟细胞的边界和代谢活动。 9. 细胞治疗与基因载体开发: 在生物制药领域,本书详细阐述了病毒载体(AAV, Lentivirus)的包装优化技术、非病毒载体(如脂质纳米粒LNP)的制备工艺,以及如何通过体外筛选提高载体的组织靶向性。对于CAR-T等细胞治疗研究,重点分析了嵌合抗原受体(CAR)的设计原则和T细胞活化后效应的功能评估标准。 --- 第四部分:数据整合、生物信息学与计算模型 现代生命科学研究离不开强大的计算支撑。本部分提供了从数据生成到知识发现的关键计算方法。 10. 组学数据整合与多模态分析: 处理海量异构数据是核心挑战。本书介绍了多元统计分析方法(如PCA, t-SNE, UMAP)在降维和可视化中的应用。重点讲解了多组学数据整合技术,如WGCNA(Weighted Gene Co-expression Network Analysis)用于发现功能模块,以及Canonical Correlation Analysis (CCA) 或 MOFA+ 用于整合不同组学层次的信息。 11. 生物网络建模与系统生物学: 本书提供了构建和分析生物分子相互作用网络的实用方法,包括使用Cytoscape进行网络可视化,利用布尔网络或微分方程模型(如Kinetic Modeling)来模拟细胞信号转导的动态过程。同时,介绍了基于图神经网络(GNN)的药物靶点预测方法。 12. 机器学习在生物数据分析中的应用: 涵盖了深度学习在图像分析(如高内涵筛选图像分割与分类)、高维数据降噪、以及预测蛋白质结构(如AlphaFold原理简介)中的应用范例。强调了模型可解释性(Explainable AI, XAI)在生物学研究中的重要性。 --- 总结: 《生物工程与分子生物学前沿技术》旨在提供一个全面、深入且面向未来的技术视野。本书的结构设计强调了理论的严谨性与实验的可操作性之间的平衡,确保读者不仅理解“如何做”,更能洞悉“为什么这样做”背后的科学原理,从而能够独立设计和实施复杂的生命科学前沿研究项目。全书技术更新快、案例丰富,是当前生物技术工作者案头不可或缺的工具书。

作者简介

目录信息

第一章 绪论
第二章 着床后体外全胚胎培养
第三章 着床前和围着床期体外全胚胎培养
第四章 非哺乳动物体外胚胎培养
第五章 胚胎卵黄囊胎盘(YSP)体外培养技术
第六章 胚胎肢芽体外培养技术
第七章 胚胎器官和器官原基培养
第八章 细胞培养技术
第九章 哺乳动物整体发育毒性试验
第十章 化学物经胎盘转运和经胎盘致癌、致突变作用的试验方法
第十一章 发育神经行为毒性测试方法
第十二章 胚胎细胞行为学研究方法
第十三章 胚胎生化功能检测
第十四章 胚胎分子(基因)行为研究方法
第十五章 流行病学研究方法和公共卫生监测
· · · · · · (收起)

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